1. Protocollo generale per l'uso sicuro della centrifuga
2. Ulteriori precauzioni durante la manipolazione di sostanze chimiche pericolose o materiali infettivi
3. Situazioni di emergenza e relative misure di sicurezza
Una situazione di emergenza può verificarsi se il rotore non funziona correttamente o se c'è una fuoriuscita nella centrifuga a causa di rottura del tubo o cattiva gestione. In tali situazioni, dovrebbero essere prese le seguenti misure.
4. Manutenzione della Centrifuga
NOTA: Il corpo della centrifuga è solitamente costituito da metalli che possono corrodersi in presenza di umidità, sostanze chimiche o detergenti forti. Per una corretta manutenzione della centrifuga, si consiglia di seguire attentamente le istruzioni del produttore per la pulizia e la manutenzione. Oltre a ciò, alcune misure generali per la manutenzione da tenere a mente sono le seguenti.
La centrifugazione è uno degli strumenti più potenti utilizzati nei laboratori per la separazione di miscele eterogenee, ma può essere pericoloso e quindi devono essere applicate precauzioni di sicurezza.
Una centrifuga fa girare rapidamente i campioni per separare materiali eterogenei, il che induce forze centrifughe estreme sui campioni e sullo strumento. A causa dell'elevata velocità con cui funziona una centrifuga, può causare gravi lesioni all'utente se mal gestita. Pertanto, è necessario prestare particolare attenzione quando si utilizza una centrifuga per evitare fuoriuscite e danni all'apparecchiatura.
Questo video illustrerà il meccanismo di una centrifuga e come utilizzarla e mantenerne una in sicurezza.
Prima di entrare nei dettagli delle misure di sicurezza, esaminiamo rapidamente le basi della centrifugazione. Le centrifughe contengono un rotore alloggiato su un mandrino. Rotori di dimensioni diverse di solito possono essere montati su un singolo mandrino per ospitare diverse bottiglie, tubi o sacchetti campione. Un motore fa girare il rotore a un determinato numero di giri al minuto. Questo, a sua volta, impartisce la forza centrifuga sulla miscela eterogenea diretta lontano dall'asse di rotazione, che separa particelle con densità diverse.
Diverse tipologie di centrifughe operano a diversi RPM. Centrifughe a bassa velocità funzionano a meno di 10.000 GIRI/MIN, ad alta velocità fino a 21.000 e ultracentrifughe a 30.000 e oltre. Ogni tipo ha rotori diversi che sono compatibili con esso. Dopo la corsa, un sistema frenante di solito rallenta il rotore. In qualsiasi centrifuga, l'alta velocità deforma il rotore.
Nell'uso normale, tornerà alle sue dimensioni precedenti. Tuttavia, se la forza dovuta alla rotazione supera la forza massima che il rotore può gestire, potrebbe deformarsi in modo permanente. Ciò può portare a crepe, che possono, a loro volta, portare a gravi guasti. I guasti della centrifuga, d'altra parte, possono portare a perdite di campioni, che possono essere pericolose se sono coinvolti materiali pericolosi e devono essere maneggiati con cura. Ora, ti mostreremo come preparare i campioni e usarli in sicurezza nella centrifuga.
Innanzitutto, selezionare i tubi centrifughi appropriati che siano compatibili con le velocità di rotazione che si desidera utilizzare. Controlla la documentazione per scoprire i limiti del tubo. I tubi devono essere intatti e privi di crepe. Riempi ciascuno a non più di 3/4 pieno per evitare fuoriuscite. Quindi assicurarsi che i tubi siano bilanciati e coprirli saldamente.
Quando si centrifuga campioni chimici o biologici pericolosi, prendere precauzioni speciali. Indossare dispositivi di protezione appropriati e preparare i campioni in un ambiente di lavoro appropriato, come una cappa aspirante o un armadio a flusso laminare. Per ulteriori informazioni su queste funzioni di sicurezza, consulta i video di JoVE sulle cappe aspiranti.
Se necessario, utilizzare un contenimento secondario per materiali pericolosi, come un inserto in vetro o plastica. Possono essere utilizzati anche tubi di sicurezza sigillati che forniscono un ambiente contenuto. Tutti devono essere addestrati prima di utilizzare qualsiasi centrifuga o rotore.
Selezionare un rotore appropriato alla centrifuga. Controllare che il rotore e il suo coperchio siano puliti e asciutti e non presentino crepe o deformità. Assicurarsi inoltre che gli O-ring sul rotore o sul coperchio non siano usurati. Inoltre, controllare il mandrino della centrifuga per vedere se è piegato o presenta altre deformità. Quindi posizionare il rotore sul mandrino assicurandosi che sia correttamente seduto. Inserire campioni nel rotore, assicurandosi che i tubi si adattino perfettamente al rotore.
Metti sempre i tubi bilanciati uno di fronte all'altro. Coprire il rotore, assicurandosi che la tenuta sia ermetica. Chiudere il coperchio della centrifuga e avviare il programma. Ancora una volta, vedere il precedente video sulla centrifuga di JoVE, per ulteriori informazioni sull'esecuzione di un programma di centrifuga.
Rimanere alla centrifuga fino a quando non ha raggiunto la sua velocità massima. Familiarizzare con la posizione del pulsante di accensione. Spegnere il pulsante di accensione se ci sono suoni o vibrazioni insolite per fermare immediatamente la centrifuga. Quindi evacuare l'area circostante fino a quando il rotore non si è fermato. Una volta che si è fermato, ispezionare i campioni per la fuoriuscita e il rotore per eventuali anomalie o squilibri. Se non ci sono stati problemi, attendere che la centrifuga abbia completato il suo programma e si sia completamente fermata.
Attendere un'ulteriore mezz'ora se sono presenti sostanze chimiche che formano aerosol. In caso contrario, è possibile aprire
la centrifuga immediatamente. Rimuovere i campioni e riportarli in un'area specializzata per l'apertura, se necessario. In caso di fuoriuscita, pulire immediatamente la centrifuga. Utilizzare DPI appropriati per qualsiasi pericolo presente e smaltire i materiali contaminati secondo le linee guida. Non utilizzare fili abrasivi per la pulizia in quanto potrebbero danneggiare il rotore. Allertare il personale di emergenza e non tentare di pulire la centrifuga se si sono riversati pericoli potenzialmente letali.
Decontaminare il rotore con candeggina al 10% per qualsiasi campione biologico utilizzato nella centrifuga indipendentemente dalla fuoriuscita o meno. Lasciare riposare la candeggina per 30 minuti, quindi risciacquare il 70% di etanolo e asciugare all'aria. Infine, rimuovere e ispezionare il rotore per eventuali danni e annotare l'uso nel giornale di bordo.
Hai appena visto l'introduzione di JoVE all'uso delle centrifughe. Ora dovresti capire come preparare i tuoi campioni e come utilizzare e mantenere lo strumento.
Grazie per l'attenzione.