Per iniziare la trasfezione cellulare, aggiungere 20 microlitri della sospensione cellulare HeLa ai pozzetti a piastra a 384 pozzetti contenenti siRNA diluito per seminare 700 cellule HeLa per pozzetto. Dopo un'ora di incubazione a temperatura ambiente, posizionare la piastra del pozzo in un'incubatrice per 72 ore a 37 gradi Celsius e al 5% di anidride carbonica. Per incorporare BrdU nelle cellule trasfettate, aggiungere 10 microlitri di soluzione di BrdU 90-micromolare a ciascun pozzetto dopo 56 ore di trasfezione di siRNA.
Incubare le cellule per 16 ore a 37 gradi Celsius e 5% di anidride carbonica. La specificità dell'incorporazione di BrdU nel DNA mitocondriale delle cellule HeLa è stata studiata utilizzando cellule rho0 prive di DNA mitocondriale.
