Inizia usando una tecnica di diffusione con forbici chirurgiche per esporre attentamente le vie aeree del polmone di maiale procurato. In primo luogo, individuare le vie aeree più grandi che in genere hanno un diametro da due a quattro centimetri. Quindi utilizzare un paio di pinze per palpare la lunghezza delle vie aeree fino a una profondità di un pollice.
Infine, tenere le forbici chirurgiche parallele alle vie aeree e inserire le punte chiuse nel tessuto che circonda le vie aeree invisibili. Aprire delicatamente le forbici chirurgiche per separare la membrana circostante. Tira fuori le forbici e astieniti dal tagliare qualsiasi tessuto.
Ripetere questo processo a intermittenza per continuare a esporre le vie aeree. Usando le forbici chirurgiche, tagliare le vie aeree nei punti di ramificazione e sezionare lungo entrambi i rami in modo indipendente. Recidere le regioni delle vie aeree una volta sicuri che le estremità intatte rimarranno identificabili e facilmente localizzate.
Posizionare le regioni recise delle vie aeree nel tubo corrispondente, con la dimensione delle regioni recise che varia da uno a cinque centimetri di lunghezza e la larghezza varia in base alla posizione relativa lungo l'albero delle vie aeree. Applicare delicatamente una pressione sulla vascolarizzazione per esporla e allontanarla lentamente dalle vie aeree. Lasciare che la vascolarizzazione si allunghi leggermente e utilizzare le forbici chirurgiche per separarla ulteriormente dalle vie aeree.
Evitare di applicare troppa pressione in quanto potrebbe strappare la vascolarizzazione. Una volta esposto il punto di ramificazione nell'albero vascolare, inserire le punte chiuse delle forbici chirurgiche appena sotto il punto di ramificazione e tra le due regioni vascolari corrispondenti. Quindi aprire lentamente le forbici per diffondere i tessuti sottostanti.
Utilizzare in modo intermittente un paio di pinzette per rimuovere il tessuto divaricato e qualsiasi altro tessuto che circonda direttamente la vascolarizzazione. Tagliare la vascolarizzazione in un punto di ramificazione quando copre le regioni delle vie aeree o diventa ingombrante per qualsiasi fase di dissezione. Successivamente, sezionare lungo entrambi i rami in modo indipendente.
Confermare che le due estremità della vascolarizzazione rimangano identificabili e facilmente individuabili per un'ulteriore dissezione. Quindi recidere le regioni del sistema vascolare. Per asportare il tessuto alveolare, individuare una regione del tessuto che non si trova nelle vicinanze delle vie aeree o della vascolarizzazione.
Pizzicare una piccola regione del tessuto che sembra essere priva di vascolarizzazione o vie aeree e strappare il tessuto pizzicato dal polmone. Il tessuto alveolare è ampiamente presente nel polmone e deve essere rimosso durante la dissezione. Osservare la regione del tessuto rimosso e confermare se si tratta o meno di tessuto alveolare.
Questa procedura è stata applicata a un modello di polmone umano. Un'analisi di spettrometria di massa dei tessuti asportati ha indicato che la composizione della ECM varia tra le singole regioni dei polmoni decellularizzati, tra cui ECM polmonare intero, ECM arricchita alveolare, ECM delle vie aeree e ECM vascolare. Nei polmoni decellularizzati ottenuti da pazienti senza storia di malattia polmonare, le proteine associate alla membrana basale sono aumentate nella ECM arricchita alveolare.
Allo stesso tempo, la ECM delle vie aeree è stata arricchita in proteine ECM associate alla cartilagine come l'aggrecano. La ECM vascolare è stata potenziata con fibronectina e altre proteine ECM solubili associate ai vasi sanguigni.
