Iniziare a prelevare il cuore del donatore neonatale anestetizzando e sterilizzando il ratto e praticando un'incisione orizzontale allo xifoide con un bisturi a 15 lame sotto un microscopio operatorio 12,5x. Successivamente, usa le forbici per creare incisioni verticali lateralmente fino alle ascelle, su entrambi i lati. Rimuovere la parete toracica anteriore con un'altra incisione orizzontale sotto il collo.
Sezionare la vena cava inferiore, o IVC, la vena cava superiore destra e sinistra, o SVC, e i vasi polmonari con le forbici. Circondare e legare i vasi opachi utilizzando una sutura di seta 7-0. Spingere leggermente il diaframma verso il basso con una pinza e somministrare tre millilitri di soluzione di Krebs-Henseleit modificata ghiacciata e ad alto contenuto di potassio nell'atrio destro perforando l'IVC con un ago calibro 30.
Tagliare l'IVC, l'SVC e i vasi polmonari usando le forbici. Garantire una lunghezza adeguata sezionando il più possibile le arterie polmonari e l'aorta, distale rispetto al tronco brachiocefalico, utilizzando un bisturi a lama numero 11. Sciacquare il cuore con la soluzione cardioplegica ghiacciata utilizzando una siringa da tre millilitri.
Metti il ratto anestetizzato su un ripiano obliquo. Fissare i denti anteriori con una corda e posizionare la testa verso il chirurgo. Posiziona la luce all'esterno del collo sull'area delle corde vocali.
Afferrare la lingua con due dita e spingerla delicatamente verso l'alto e verso sinistra per una visibilità ottimale dell'intubazione. Ora, usa una cannula da 18 pollici per un ratto da 100 a 150 grammi e fissa il tubo intratracheale con del nastro adesivo. Collegare la cannula per intubazione al ventilatore per piccoli animali e regolare le impostazioni in base alle dimensioni dell'animale, seguendo le istruzioni del produttore.
Dopo aver intubato il ratto, eseguire una laparotomia sulla linea mediana utilizzando un bisturi a 15 lame per eseguire l'incisione cutanea. Aprire la parete addominale anteriore con le forbici e mobilizzare l'intestino verso il quadrante superiore destro. Successivamente, esporre l'aorta addominale retroperitoneale e l'IVC, utilizzando applicatori con punta di cotone.
Coprire l'intestino con una garza calda imbevuta di soluzione salina e utilizzare divaricatori per mantenere un'esposizione ottimale dell'IVC e dell'aorta addominale. A questo punto, eseguire una dissezione contundente dell'IVC infrarenale e dell'aorta addominale fino alla biforcazione. Legare le arterie e le vene ramificate infrarenali opache con una sutura in nylon 10-0.
Trasportare il cuore del donatore prelevato in una bacinella chirurgica sterile contenente il tampone Krebs-Heneseleit sul campo operatorio. Assicurarsi di irrigare il cuore del donatore in modo intermittente con una soluzione cardioplegica ghiacciata. Successivamente, separare il tronco polmonare e l'aorta discendente utilizzando microforbici e irrigare il cuore del donatore con una soluzione cardioplegica ghiacciata.
Successivamente, applicare quattro pinze vascolari atraumatiche ai segmenti distale e prossimale dell'aorta infrarenale e dell'IVC. Eseguire un'aortotomia utilizzando micro forbici per eseguire due piccoli tagli orizzontali. Quindi, posizionare il cuore del donatore sul lato sinistro dell'aorta.
Fissare l'aorta infrarenale del ricevente e l'aorta ascendente del donatore e di lato nelle posizioni delle ore 12 e delle sei dell'aortotomia con punti di sutura. Procedere con la terza e la quarta sutura a ore tre e nove, ruotando delicatamente il cuore sul lato sinistro dell'aorta dopo la terza sutura. Finalizzare l'anastomosi arteriosa aggiungendo uno o due punti di sutura a ciascun interspazio.
Ora, ruota il ratto in senso antiorario, in modo che la testa sia rivolta verso la mano sinistra del chirurgo. Spostare il cuore del donatore sul lato sinistro dell'aorta addominale per una visione ottimale dell'IVC. Eseguire una venotomia sull'IVC, leggermente prossimale all'anastomosi aortica.
Utilizzando una lama 11 per puntura e micro forbici per regolare le dimensioni in base al diametro del tronco polmonare del donatore, lavare il lume intracovale con soluzione fisiologica. Successivamente, eseguire l'anastomosi venosa tra l'IVC del ricevente e il tronco polmonare del donatore posizionando suture di nylon 11-0 interrotte sulla parete posteriore del vaso, a partire dalle posizioni delle ore 12 e sei. Posizionare una sutura continua in nylon 11-0 sulla parete anteriore, posizionare strisce di spugna di gelatina riassorbibile sulle anastomosi e rimuovere le pinze microvascolari, iniziando da quelle distali.
Assicurarsi che i vasi coronarici si riempiano e che il cuore del donatore inizi a battere poco dopo il rilascio delle pinze prossimali. Applicare una leggera pressione utilizzando un applicatore con punta di cotone sulle spugne per ottenere un'emostasi ottimale. Riposizionare con cura l'intestino nell'addome, facendo attenzione a non distorcere l'anastomosi arteriosa e venosa.
Chiudere la parete addominale e lasciare che l'animale si riprenda. Viene mostrata una fetta orizzontale dell'innesto del donatore resecata a livello ventricolare medio dei ventricoli destro e sinistro. L'analisi istologica ha indicato che il tessuto della fibroelastosi endocardica aveva elevate quantità di fibre organizzate di collagene ed elastina.
Tessuto di fibroelastosi endocardica, doppia colorazione per VE-Caderina e alfa-SMA. CD-31, fosfo-SMAD2 e SMAD3, CD-31 e lumaca o lumaca indicavano una transizione da endoteliale a mesenchimale.
