Maturation Profiling of Human Monocyte-Derived Dendritic Cells (Mo-DCs)

Iniziare a raccogliere un nuovo campione delle cellule di interesse per la colorazione degli anticorpi lavando le cellule a temperatura ambiente per cinque minuti a 300 G con una pausa normale. Distribuire le cellule in microtubi. Per eseguire la colorazione utilizzando gli anticorpi desiderati, incubare gli anticorpi coniugati a fluorescenza al buio per 15 minuti a temperatura ambiente.

Lavare le cellule con un millilitro di PBS prima di centrifugarle per cinque minuti a 300 G a temperatura ambiente. Aggiungi fino a 100 microlitri di PBS a tutte le micro provette. Quindi risospendere le cellule in 300 microlitri di paraformaldeide al 2% e conservare le provette al buio a quattro gradi Celsius fino alla citometria a flusso.

È stato osservato un aumento significativo dell'espressione delle molecole presentanti l'antigene MHC-I e MHC-II e dell'espressione delle molecole co-stimolatorie CD80 e CD86 dovute al trattamento con sialidasi.