Iniziare aggiungendo 200 microlitri di inoculo batterico in ciascun pozzetto di una piastra sterile a 96 pozzetti preparata per l'analisi microscopica. Incubare la piastra a 25 gradi Celsius per 24 ore prima di rimuovere il surnatante con la pipetta. Successivamente, aggiungere con cura 300 microlitri di acqua deionizzata sterilizzata con filtro in ciascun pozzetto.
Rimuovere nuovamente il surnatante con una pipetta. In un'altra provetta, preparare una miscela diluita di SYTO 9 e ioduro di propidio e acqua deionizzata sterilizzata con filtro fino alle rispettive concentrazioni finali desiderate. Quindi aggiungere 200 microlitri di miscela in ogni pozzetto e incubare la piastra per 20-30 minuti a temperatura ambiente in un ambiente buio.
La microscopia a scansione laser confocale ha rivelato che la formazione di biofilm variava significativamente a seconda dei ceppi. Una notevole quantità di biofilm è stata trovata in Acinetobacter junii, Acinetobacter baumannii e Acinetobacter ursingii con morfologie di biofilm distinte.
