Iniziare ritagliando microarray stampati identici dalla membrana di nitrocellulosa e mettendoli in un recipiente adatto per il sondaggio. Per ridurre il legame non specifico, aggiungere il tampone di blocco MP-TBST ai microarray e incubare per un'ora su un agitatore rotante. Dopo l'incubazione, sostituire il tampone con MP-TBST fresco.
Incubare gli array con anticorpi monoclonali e MP-TBST per due ore su un agitatore rotante. Dopo l'incubazione, rimuovere la soluzione della sonda molecolare. Immergere completamente gli array in TBST pulito.
Sostituire immediatamente il tampone con un nuovo volume per rimuovere la soluzione residua della sonda. Posizionare gli array su uno shaker rotante per cinque minuti. Sostituire il TBST con un nuovo volume buffer e posizionare gli array sullo shaker per altri cinque minuti.
Successivamente, incubare gli array con anticorpi coniugati con fosfatasi alcalina per due ore su un agitatore rotante. Una volta completata l'incubazione e lavati i microarray, coprirli con tetrazolio blu nitro e soluzione di sviluppo del colore BCIP per rilevare cromogenicamente il legame dell'anticorpo. Terminare la reazione immergendo l'array in acqua di rubinetto pulita.
Quindi posizionare le matrici ad asciugare tra carta assorbente per una notte a temperatura ambiente. L'abbondanza relativa di 16 epitopi diagnostici di polisaccaridi della parete cellulare vegetale non cellulosica è stata rilevata attaccando anticorpi monoclonali diretti ai glicani agli estratti stampati. La maggior parte dei glicani estratti sono stati rilevati all'interno della frazione alcalina di idrossido di sodio.
Forti segnali di legame sono stati registrati per LM-10 e LM-11 che rappresentano xilano e arabinoxilano all'interno delle bucce di tutte le varietà di mango testate. LM-10 e LM-11 hanno mostrato un legame preferenziale all'estratto di tessuto della radice dell'aglio e un legame debole all'estratto del tessuto fogliare. LM-19 che rappresenta l'omogalatturonano parzialmente metilesterificato o non esterificato fortemente legato ad alcuni estratti di varietà di mango e solo alle frazioni di polpa di caffè.
