Iniziare la preparazione del bioink idrogel in modo asettico all'interno di una cabina di biosicurezza preparando prima una soluzione madre da 0,25 milligrammi per millilitro di PEG alfa metacrilato in terreni di coltura cellulari sterili senza FBS. Inoltre, utilizzando TCEP sterile da 20 millimolari, preparare soluzioni stock da 250 millimolari di DTT, reticolante degradabile MMP2 e peptide RGD. Infine, preparare una soluzione madre al 15% in peso di PEO utilizzando acqua distillata.
Combinare le quantità richieste delle soluzioni madre di reagenti preparate e dei terreni di coltura cellulare a basso contenuto di siero con i fibroblasti in una provetta conica da 15 millilitri. Miscelare accuratamente il bioink risultante utilizzando una pipetta a spostamento positivo per assicurarsi che le cellule siano singole. Verificare che la soluzione finale del precursore abbia un pH di 6,2.
Rimuovere la testina di stampa dalla biostampante per accedere alla siringa di vetro. Per caricare il bioink nella siringa di vetro, rimuovere lo stantuffo della siringa. Quindi, raccogliere il bioink dalla provetta da centrifuga utilizzando una siringa separata montata su un ago a punta smussata lungo 1,5 pollici, calibro 15.
Sostituire l'ago calibro 15 con un ago calibro 30, lungo 0,5 pollici, con punta smussata e trasferirlo nella siringa di vetro, evitando la formazione di bolle d'aria. Infine, posizionare la siringa di vetro all'interno della testina di stampa e fissare i componenti della testina di stampa assicurandosi che sia ben salda la stampa.
