Per iniziare, adagiare un topo maschio nero C57 anestetizzato da 8 a 10 settimane sul banco operatorio. Usando una pinza smussata, estrai la lingua e tienila con le dita. Inserire un laringoscopio in bocca e visualizzare le corde vocali.
Stabilizzare il mento del topo sul laringoscopio e tenere il catetere endovenoso calibro 20 o IV con un filo guida inserito al suo interno. Quindi inserire leggermente il filo guida nella corda vocale e spingere lentamente il catetere endovenoso calibro 20 nella trachea fino a quando la sua parte alare non è allineata con la punta del naso. Una volta che il mouse è collegato al ventilatore, tenerlo in posizione laterale con l'area temporale destra rivolta verso l'alto.
Mantenere la temperatura rettale a 37 gradi Celsius utilizzando un termoforo e una lampada riscaldante. Dopo aver individuato l'arcata zigomatica e inciso il muscolo temporale, utilizzare due pinze per sezionare l'arcata zigomatica sottostante ed esporre l'articolazione tra la mascella e le ossa zigomatiche. Quindi, usando le forbici, taglia una porzione di tre millimetri dell'arcata zigomatica e rimuovila.
Infine, separare il muscolo massetere dalla base del cranio. Posizionare quattro piccoli divaricatori in direzioni diverse ed esporre la base cranica cranica con un divaricatore che tira lateralmente i rami del nervo trigemino. Applicare una goccia salina sul cranio sopra l'arteria cerebrale media, o sul tronco MCA e prossimale al ramo della corteccia rinale.
Usa una smerigliatrice elettrica per assottigliare il cranio fino a quando non è visibile una piccola frattura. E con la punta della pinza, rimuovi il cranio sottile. Posiziona un anello a filo singolo di seta intrecciata nera sopra l'MCA.
Quindi inserire un 8-O ago microchirurgico per sollevare il tronco MCA e legare la sutura sotto l'ago, lasciando le due estremità dell'ago sopra il nodo ad anello del filo di seta. Per l'occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media, o MCAO, stringere leggermente il nodo del filo di seta sotto l'ago per bloccare il flusso sanguigno arterioso, che rappresenta l'insorgenza di MCAO. Utilizzare la pinza per tenere la sutura e rimuovere lentamente l'ago alla fine dell'ischemia.
L'imaging con contrasto laser speckle ha confermato la riduzione dell'afflusso di sangue nell'MCA destro. Per l'MCAO transitorio dopo la rimozione della sutura, la riperfusione del flusso sanguigno cerebrale era evidente e migliorava ulteriormente dopo 24 ore. La colorazione TTC del cervello dopo 24 ore di ictus ha dimostrato la generazione di tessuto infartuato sia nell'area corticale che in quella dello striato laterale nei topi giovani e anziani.
La dimensione dell'infarto era moderata rispetto al filamento MCAO.
