Iniziare aggiungendo 50 microlitri di cellule elettrocompetenti di Agrobacterium tumefaciens in un Q-vet pre-raffreddato da 0,1 millimetri. Aggiungere due microlitri di pCAMBIA1302 al Q-vet. Ora usa un elettroporatore a 2.400 volt per elettropolizzare le cellule.
Aggiungere immediatamente un millilitro di terreno LB al Q-vet e pipettare la soluzione su e giù per miscelare delicatamente. Successivamente, trasferire le cellule risospese in un microtubo da 1,5 millilitri. Quindi incubarlo a 24-30 gradi Celsius per almeno un'ora per riprendersi.
Ora placcare le cellule sulla coclea LB integrata con antibiotico. Incubare le piastre a 28-30 gradi Celsius per due o tre giorni. Infine, inoculare una singola colonia in brodo LB.
Lascia che la cultura cresca da un giorno all'altro. Quindi crioconservare il ceppo contenente plasmidi con una soluzione di glicerolo al 50% a 80 gradi Celsius per un uso futuro.
