Per iniziare, distribuire in modo casuale i topi la cui cavità orale è negativa per la crescita della candida in nove gruppi, ciascuno corrispondente a una diversa concentrazione di curcuminoidi con o senza luce. Il primo giorno, iniettare per via sottocutanea il farmaco immunosoppressore prednisolone a tutti i membri dei gruppi. Fornire tetraciclina cloridrato alla concentrazione di 0,83 milligrammi per millilitro in acqua potabile dal primo giorno fino alla fine dell'esperimento.
Il secondo giorno, somministrare clorpromazina cloruro per via intramuscolare su ciascun muscolo della coscia per sedare il topo per l'inoculazione intraorale. Successivamente, immergere un tampone sterile in una sospensione standardizzata appena preparata di candida albicans. Dopo aver posizionato il topo in posizione supina, strofina la lingua con un tampone imbevuto per 30 secondi.
Il quinto giorno, somministrare un'iniezione sottocutanea gratuita di prednisolone per mantenere l'immunosoppressione. Il settimo giorno, prima del trattamento, posizionare il topo anestetizzato in posizione supina su un dispositivo PAD dotato di fili. Avvolgi il filo intorno agli incisivi per mantenere la bocca aperta.
Erogare 70 microlitri di fotosensibilizzante sul dorso della lingua di ciascun topo appartenente ai gruppi C+L+. Quindi, riportare la lingua all'interno della cavità orale e tenere il topo in un ambiente buio per 20 minuti come periodo di pre-irradiazione. Dopo il periodo di fotosensibilizzazione, posizionare il dispositivo LED sul dorso della lingua e illuminarlo per sette minuti.
Applicare il fotosensibilizzante sui gruppi C+L come dimostrato e tenere i topi al buio per 27 minuti. Subito dopo il trattamento tamponare il dorso della lingua per un minuto, utilizzando un batuffolo di cotone sterile per recuperare la candida albicans dalla lingua. Posizionare ogni tampone del campione in una provetta contenente un millilitro di soluzione fisiologica sterile e vorticare per un minuto per risospendere le cellule microbiche.
Eseguire senza indugio diluizioni seriali dieci volte in PBS e piastre aliquote da 25 microlitri su piastre Sabouraud Dextrose Agar in doppio. incubare le piastre aerobicamente a 37 gradi Celsius per 48 ore. Dopo 48 ore, utilizzare un contatore digitale di colonie per determinare il numero di colonie di lievito.
Calcola il carico di candida albicans per ogni animale. L'ottavo giorno, dopo aver adeguatamente soppresso l'animale, procedere alla rimozione chirurgica della lingua, eseguire la rimozione della lingua prima delle papille circumvallate per garantire che l'intera lingua venga rimossa. Infine, procedere con l'analisi istopatologica della lingua isolata.
Il modello murino di candidosi orale mostrava tipiche macchie bianche e pseudo membrane sulla lingua dei topi infetti. La terapia fotodinamica antimicrobica ha ridotto la vitalità della candida albicans a una concentrazione di 80 curcuminoidi micromolari. Le lingue degli animali non infetti mostravano tessuti sani normali, tra cui: lamina propria intatta, membrana basale e papille filiformi.
Nel gruppo C-L, lievito e filamenti sono stati osservati nello strato epiteliale cheratinizzato. Una lieve risposta infiammatoria era presente nel tessuto connettivo sottostante. Al contrario, i topi trattati con terapia fotodinamica antimicrobica mediata da 80 curcuminoidi micromolari avevano meno cellule fungine nello strato cheratinizzato dell'epitelio della lingua.
