Per iniziare, prendi 50 millilitri ciascuno, un terreno di fibroblasti e un mezzo epiteliale vaginale, in tubi conici separati da 50 millilitri. Degassare il terreno riscaldato sotto vuoto sterile per cinque minuti. Successivamente, disinfezione dei vassoi puliti con CaviCide ed etanolo per il modulo a flusso dinamico.
Rimuovere le cialde dalla confezione e posizionarle nei vassoi del modulo di flusso dinamico. Pipettare due millilitri di terreno epiteliale vaginale degassato nel serbatoio di ingresso apicale. E aggiungere tre millilitri di terreno fibroblastico degassato al serbatoio di ingresso basale.
Pipettare 500 microlitri di terreno epiteliale vaginale degassato nel serbatoio di uscita apicale e 500 microlitri di terreno di fibroblasti degassato nel serbatoio di uscita basale. Far scorrere i vassoi contenenti le cialde nel modulo di flusso dinamico. Ora, esegui il ciclo principale due volte.
Se non si forma una gocciolina dopo quattro cicli di preparazione, entrare in contatto diretto con la porta all'interno del serbatoio di uscita della cialda. Pipettare 200 microlitri del rispettivo terreno per consentire al fluido di fluire tra il serbatoio nel canale per adescare manualmente le cialde. Quindi, rimuovere i puntali delle pipette dai chip di organi con semi di fibroblasti uterini umani.
Posiziona una goccia del rispettivo mezzo su tutte le porte di ciascun chip. Far scivolare le patatine nei baccelli e posizionare i baccelli sui vassoi. Aspirare qualsiasi fluido sulla superficie dei trucioli, quindi far scorrere ciascun vassoio in un modulo a flusso dinamico.
Successivamente, sul modulo, impostare la parte superiore e inferiore come liquido, il flusso apicale a 15 microlitri all'ora, il flusso basale a 30 microlitri all'ora, l'allungamento a 0% e la frequenza a zero hertz. Eseguire il ciclo di regolazione sul modulo e lasciare fluire durante la notte. Sul dispositivo a chip d'organo è stato osservato un foglio continuo di cellule epiteliali vaginali che formavano progressivamente più strati cellulari dopo la differenziazione.
