Per iniziare, inserire una sonda rettale lubrificata per controllare la temperatura del ratto anestetizzato durante l'intervento chirurgico. Dopo aver individuato la regione giugulare nella regione inferiore destra del collo del ratto anestetizzato sopra la clavicola, utilizzare la pinza atraumatica DeBakey per afferrare delicatamente la pelle e praticare un'incisione precisa con forbici affilate o un bisturi. Tagliare delicatamente il tessuto con una pinza standard.
Localizzare e liberare delicatamente la vena giugulare dal suo compartimento muscolare. Posizionare un filo di sutura di seta 4-0 per legare saldamente il lato distale della vena giugulare. Utilizzare la sutura con i portaaghi per tendere la vena giugulare.
Posizionare una sutura 4-0 sul lato prossimale della vena giugulare e preparare un nodo da chirurgo senza stringerlo. Utilizzando le forbici per micro dissezione Vannas, praticare una piccola incisione nella vena giugulare. Dopo aver afferrato con cura la parete venosa con una piccola pinza, inserire il catetere PE50 nella vena giugulare.
Far avanzare leggermente il catetere e, per confermare il suo corretto posizionamento nella vena, prelevare una piccola quantità di sangue e reiniettarla. Stringere il nodo precedentemente preparato per fissare il catetere. Applicare una goccia di lidocaina sull'area incisa.
Coprire l'incisione con una garza sterile umida. Usa le pinze atraumatiche DeBakey per afferrare la pelle del triangolo di Scarpa sulla gamba sinistra e fai un'incisione con forbici affilate o un bisturi. Dilacerare delicatamente il tessuto con una pinza standard.
Individua la triade femorale e posiziona una pinza sotto la triade. Quindi, con una seconda pinza standard, separare con cura l'arteria dal nervo e dalla vena femorale. Posizionare una sutura 4-0 per legare distalmente l'arteria femorale e prendere la sutura con i portaaghi per mettere in tensione l'arteria femorale.
Ora posiziona una sutura 4-0 sul lato prossimale dell'arteria femorale e prepara un nodo da chirurgo senza chiuderlo. Dopo aver clampato l'arteria, utilizzare le forbici da micro dissezione Vannas per praticare un'incisione trasversale nell'arteria femorale. Afferrare la parete dell'arteria con una pinza standard e incannulare l'arteria femorale con il catetere che la tiene con una pinza.
Sbloccare delicatamente l'arteria e assicurarsi che il sangue non rifluisca nel catetere. Se il segnale è buono, far avanzare leggermente il catetere nell'arteria e stringere il nodo del chirurgo precedentemente preparato. Somministrare eparina nel ratto e posizionare una garza sterile inumidita sull'area incisa.
Dopo 10 minuti di stabilizzazione, registrare i valori emodinamici basali per cinque minuti. Per indurre lo shock emorragico, utilizzare una siringa da un millilitro per prelevare cinque millilitri di sangue dall'arteria femorale in cinque minuti. Preparare una miscela di soluzione di Ringer lattato al 50% e sangue raccolto al 50% a temperatura ambiente.
Posizionare una siringa da due millilitri riempita con la miscela all'estremità della cannula della vena giugulare. Per il mantenimento dello shock emorragico, quando la pressione arteriosa media supera i 38 millimetri di mercurio, prelevare 200 microlitri di sangue dall'arteria femorale. Se la pressione scende al di sotto di 32 millimetri di mercurio, iniettare 200 microlitri della miscela di Ringer 50% sangue e 50% lattato attraverso la vena giugulare.
Dopo la preparazione sterile della coda con una garza, utilizzare la punta dell'ago per prelevare una goccia di sangue dall'estremità della coda per misurare il lattato nel sangue periferico. Infine, rianimare il ratto con una soluzione di Ringer lattato utilizzando una siringa da 20 millilitri attraverso il catetere giugulare con una pompa a siringa.
