Inizia tagliando sezioni dalle aree intercostali lungo la nervatura centrale delle foglie di Triticum aestivum su una lastra di vetro. Assicurarsi che la lunghezza della sezione tagliata scorra lungo la venatura della foglia. Quindi posizionare il materiale vegetale in una siringa con un millilitro di tampone di fissaggio.
Tenere la siringa in posizione verticale. Rimuovere l'aria e pompare la siringa per creare il vuoto tenendo un dito sulla punta. Dopo aver eseguito il protocollo di infiltrazione completo, secondo le istruzioni del produttore della resina, coprire le cavità di uno stampo da inclusione piatto con resina al 100% e posizionare i campioni su un'estremità della cavità.
Prepara etichette di carta scritte a matita per ogni campione e posizionale sull'altra estremità della cavità. Raddrizzare i campioni e le etichette se si sono mossi. Coprire lo stampo con la pellicola di inclusione e polimerizzare in forno secondo le linee guida del prodotto in resina acrilica.
Quindi posizionare il blocco polimerizzato con il campione nel supporto per campioni per ultra microtomo. Usando un coltello da vetro ruvido, taglia il blocco fino a quando il tessuto diventa visibile e la resina in eccesso viene eliminata. Successivamente, utilizzando un coltello da vetro o diamantato, si tagliano sezioni semisottili trasversalmente.
Con un anello di inoculazione in metallo, raccogliere le sezioni dalla superficie dell'acqua e posizionarle su un vetrino. Asciugare il vetrino su una piastra calda per fissare le sezioni sul vetro. Colorare le sezioni fisse con blu toluidina per cinque secondi.
Sezioni trasversali semisottili di Triticum aestivum e Zea mays hanno mostrato che tutti i tessuti fogliari erano visibili e misurabili. Zea mays ha mostrato un'anatomia dei crani con cellule mesofille attorno alle vene e guaine di fasci piene di cloroplasti che facilitano il rapido scambio di metaboliti.
