Dopo aver colorato la sezione fogliare di Triticum aestivum con blu di toluidina, posizionare il vetrino sul tavolino del microscopio. Utilizzando un ingrandimento dell'obiettivo 40x, metti a fuoco la sezione e regola la luminosità per assicurarti che tutte le strutture cellulari siano visibili. Quindi utilizzare la funzione navigatore per impostare l'area di posizione delle sezioni per assicurarsi che l'intera sezione sia ripresa, quindi fare clic sul pulsante punto.
Successivamente, fare clic su Fine ed eseguire per consentire al microscopio di visualizzare l'intera sezione. Aprire il software di analisi delle immagini e le tessere scattate dal microscopio. Utilizzando la funzione di allineamento, assicurarsi che le tessere non si sovrappongano.
Dopo aver generato l'immagine, regolare il posizionamento, la luminosità e la rotazione utilizzando la scheda di regolazione. Quindi stampa la scala sull'immagine prima di salvarla in formato TIF. Aprire il software ImageJ e trascinare l'immagine nella finestra per caricarla.
Utilizzando lo strumento linea, disegna una linea sopra la barra della scala. Scegliere Analizza e fare clic su Imposta scala. Modificare la distanza nota con la lunghezza della barra della scala e l'unità di lunghezza con l'unità corretta.
Per misurare il tratto potenziale, seleziona lo strumento linea, traccia una linea attraverso l'area di interesse e premi il tasto M. Per le misurazioni dell'area, utilizzare lo strumento di selezione dei poligoni per delineare il tessuto di interesse. Quindi premere il tasto M per concludere.
Apparirà una finestra pop-up che mostra le misurazioni, che può essere copiata in un foglio di calcolo per un'ulteriore analisi dei dati. I box plot hanno illustrato differenze anatomiche significative tra Triticum aestivum e ZMA, in particolare nelle distanze interveinali, nel diametro della guaina del fascio, nella frazione delle cellule della guaina del fascio, nel materiale sintetico non fotografico e nella frequenza delle vene che riflettono le distinzioni attese dell'anatomia delle foglie C3 e C4.
