Il miscelatore a getto a impatto confinato dirige due flussi ad alto numero di Reynolds l'uno verso l'altro all'interno di una camera di miscelazione più grande. Il momento lineare di ciascun getto viene dissipato nella formazione di vortici turbolenti su scala micron che provocano una miscelazione rapida e uniforme dei flussi di solvente e antisolvente. Per iniziare a formulare le nanoparticelle lipidiche, riempire due siringhe da cinque millilitri con etanolo e bloccarle in una porta di ingresso del getto a impatto confinato, o miscelatore CIJ.
Premere rapidamente le siringhe e raccogliere l'effluente del miscelatore come rifiuto. Rimuovere le siringhe per il lavaggio con etanolo dal CIJ. Soffiare un flusso di azoto secco attraverso gli adattatori di ingresso per asciugare i canali interni del CIJ.
Mescolare le soluzioni madre lipidiche e diluirle con etanolo in una provetta da microcentrifuga da 1,5 millilitri. Diluire il tampone acetato a pH 4 da 100 millimolari a 10 millimolari in un volume totale di quattro millilitri. Per preparare il flusso di antisolvente, mescolare l'RNA con il tampone acetato in una provetta da 1,5 millilitri.
Preparare 500 microlitri di soluzione in una siringa da un millilitro. Capovolgere la siringa ed espellere l'aria dal flusso acquoso dell'antisolvente. Allo stesso modo, raccogli 500 microlitri di soluzione lipidica in una siringa da un millilitro.
Quindi, capovolgere la siringa per espellere l'aria dal flusso di solvente etanoico. Posizionare il miscelatore CIJ pulito sopra la fiala del bagno di tempra. Accoppiare le due siringhe alle porte di ingresso del miscelatore CIJ.
Premere rapidamente entrambe le siringhe per miscelare i flussi di solvente e antisolvente e raccogliere le nanoparticelle lipidiche nel bagno di tempra. Rimuovere il miscelatore CIJ dal bagno di tempra con le siringhe ancora attaccate. Tenere l'ICJ sopra un contenitore per rifiuti e rimuovere le siringhe, lasciando che il volume residuo di ritenzione fluisca nel contenitore per rifiuti.
Ora tappare il bagno di tempra contenente la dispersione di nanoparticelle lipidiche e agitare delicatamente la fiala.
