Dissociazione rapida del tessuto tumorale per ottenere informazioni avanzate sui tumori a cellula singola

Per iniziare la digestione del tumore, versare il campione in una piastra di coltura tissutale da 60 millimetri posta su ghiaccio. Pipettare 420 microlitri di terreno dalla piastra a una provetta da microcentrifuga da 1,5 millilitri. Utilizzando una pinzetta, trasferire il tessuto campione nella provetta contenente il terreno.

Tagliare il campione con forbici pulite in pezzi di due o tre millimetri di diametro. Aggiungere al campione volumi appropriati di enzimi e terreni di digestione. Agitare la provetta per cinque secondi e incubarla in un miscelatore termico posizionato verticalmente su un lato.

Posizionare un filtro cellulare da 50 micrometri sopra un nuovo tubo conico da 15 millilitri. E adescare il filtro con un millilitro di media RPMI fresco. Utilizzando un puntale per pipetta largo a bassa tensione da 1.000 microlitri, caricare il campione sul filtro e aggiungere il terreno.

Quindi, con il retro di uno stantuffo della siringa, macinare e spingere il campione sul filtro con un movimento rotatorio. Lavare il filtro con cinque millilitri di terreno e l'eventuale materiale rimanente dal piatto che contiene il campione.