Per iniziare, disporre l'attrezzatura chirurgica sterile su una piattaforma chirurgica. Circa 72 ore dopo l'impianto elettromiografico del muscolo del diaframma, o EMG, pesare il ratto. Prima di anestetizzare il topo, mettilo in una gabbia in stile Bowman.
Collegare con cura i fili, uscendo dal dorso di ratto a un preamplificatore per registrare l'EMG bilaterale del muscolo del diaframma. Quindi, posizionare il ratto anestetizzato in posizione prona. Radere i peli dal collo all'incirca all'altezza delle orecchie e fino alle scapole.
Collegare i fili degli elettrodi esposti dalla schiena del ratto all'amplificatore. Disinfettare la pelle alternando tre volte con clorexidina gluconato al 4% e alcol isopropilico. Coprire il ratto con coperture chirurgiche sterili, ad eccezione della parte superiore del dorso.
Usando un bisturi, fai un'incisione rostrocaudale di quattro centimetri. Ritrarre la pelle e tagliare il muscolo acromiotrapezio. Quindi sezionare il muscolo romboidale per esporre i muscoli spinali.
Sotto un microscopio chirurgico, rimuovere la colonna vertebrale da C1 a C3. Quindi usa rongeur per eseguire con cura una laminectomia a C2 senza danneggiare le arterie o i nervi principali. Tagliare e rimuovere la dura madre a C2. Durante il monitoraggio dell'EMG del muscolo diaframma, inserire il coltello da dissezione angolare appena sotto il punto in cui la radice dorsale entra nel midollo spinale e sezionare fino al punto medio della superficie ventrale. Quindi registrare l'attività EMG del diaframma omolaterale eupneico sul ratto anestetizzato con emisezione spinale C2 eseguita.
Sutura i muscoli del midollo spinale con suture 3-0, quindi chiudere l'incisione cutanea. Per mantenere l'idratazione, iniettare per via sottocutanea un millilitro di soluzione fisiologica per 50 grammi di massa animale. Metti il ratto in una gabbia pulita con un termoforo per il recupero.
Impostare il filtro passa-banda alto del preamplificatore a 100 hertz e il filtro passa-basso a 1000 hertz. Dopo aver raccolto uno o due minuti di registrazione EMG eupneica dell'emidiaframma sinistro e destro, conservare la data in un formato appropriato per ulteriori analisi. Un esempio di successo di emisezione spinale C2 ha mostrato l'assenza di attività EMG del diaframma omolaterale eupnico in anestesia il terzo giorno dopo l'infortunio.
L'attività EMG del muscolo diaframma in condizioni di veglia ha mostrato una riduzione del diaframma omolaterale eupnico rispetto al basale pre-infortunio. L'attività EMG del muscolo del diaframma controlaterale è aumentata sia in condizioni di anestetismo che di veglia.
