Per iniziare, prepara i nanocompositi di ossido di grafene/rame. Il primo giorno, inoculare una colonia di batteri dalla piastra di agar in 10 millilitri di brodo usando un anello. Incubare il brodo a 37 gradi Celsius utilizzando un'incubatrice ad agitazione impostata a 200 giri/min per 24 ore.
Il secondo giorno, diluire la miscela di nanocompositi utilizzando DPBS per ottenere tre diverse concentrazioni e preparare le soluzioni di controllo per l'esperimento. Quindi erogare 100 microlitri di sospensione nanocomposita e soluzioni di controllo in piastre da 96 pozzetti. Sulla base delle CFU, diluire la sospensione batterica a una volta per 10 alla potenza di sei CFU per millilitro in Brodo di Soia Trittica.
Inoculare 100 microlitri di sospensione batterica diluita nei pozzetti del campione nella piastra a 96 pozzetti e incubare la piastra a 37 gradi Celsius in un incubatore ad agitazione impostato a 200 giri/min per 24 ore. Il terzo giorno, mescolare energicamente il campione e le sospensioni batteriche con una micropipetta da 200 microlitri prima di diluire in serie la miscela batterica del campione di dieci volte con acqua distillata sterile. Quindi stendere 100 microlitri della sospensione batterica diluita su una piastra di agar con uno spalmatore e incubare la piastra a 37 gradi Celsius per 24 ore.
Il quarto giorno, contare le colonie batteriche e determinare i valori di CFU per confermare l'attività antibatterica dei nanocompositi utilizzando l'equazione. I nanocompositi hanno dimostrato una significativa efficacia antibatterica contro Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa resistenti alla meticillina, eradicando rispettivamente il 99,8% e l'84,7% di questi batteri a una concentrazione di 500 microgrammi per millilitro.
