Questo metodo è molto importante per rispondere a domande chiave nei settori dell'oncologia, della neuro-biologia, della cardiologia e dello sviluppo fetale, e naturalmente è anche importante nell'area della ricerca riproduttiva. I principali vantaggi di questa tecnica sono che non è invasiva, indolore, facile, veloce e consente il follow-up dei feti nei punti di tempo gestazionali rilevanti durante la gravidanza. Almeno mezz'ora prima della procedura di imaging, accendere il sistema ad ultrasuoni, la piattaforma riscaldata e lo scalda gel.
Aprire un nuovo studio o una nuova serie in uno studio esistente nel browser. Immettere tutte le informazioni richieste nella finestra delle informazioni di studio. Fare clic su OK e verificare che venga visualizzata la finestra di imaging in modalità B.
Quando l'ecografia è pronta, confermare la mancanza di risposta al dito del dito in un topo anestetizzato e applicare un unguento agli occhi dell'animale. Posizionare una goccia di elettro gel su ciascuna delle 4 sezioni di rame della piattaforma riscaldata e fissare le zampe alle sezioni rivestite di gel elettrico della piattaforma. Rimuovere i capelli dall'addome dell'animale con crema depilatoria e un batuffolo di cotone, lavando la crema dalla pelle depilata dopo un minuto con un impacco imbevuto d'acqua.
Quindi applicare il gel ad ultrasuoni preri riscaldato sull'area esposta. Una delle ragioni della bassa intensità del segnale può essere la bassa quantità di gel posta tra il mouse e il fascio ultrasonico. Nella nostra esperienza, una quantità piuttosto grande di gel è necessaria per una buona qualità del segnale.
Quando l'animale è pronto, posizionare il trasduttore sopra la vescica per utilizzarlo come punto di riferimento e spostare il tavolo della piattaforma di riscaldamento ai lati sinistro e destro dell'addome per tracciare gli impianti fetali in modalità B 2D, regolando il trasduttore o la piattaforma se necessario fino a quando il primo impianto non è visibile sullo schermo, alle sue dimensioni più grandi. Selezionare Etichetta immagine e immettere un nome per il file di immagine. Regolare la posizione dell'immagine, fino a quando il flusso sanguigno all'interno dell'arteria ombelicale della placenta è in vista, e conservare un singolo fotogramma o cineloop per misurazioni placentari.
Affinché l'imaging Doppler a colori determini la direzione del flusso sanguigno, premere il pulsante Colore e utilizzare la trackball per spostare la casella di colore nella posizione appropriata, facendo clic su Aggiorna per regolare le dimensioni della scatola in base alle esigenze. Quando la casella ha le dimensioni corrette, fare clic su Seleziona e archiviare l'immagine come appropriata in modo sperimentale. Per la quantificazione doppler dell'onda pulsata del flusso sanguigno attraverso i vasi, individuare la regione di interesse nella modalità di acquisizione Doppler del colore e fare clic su Pulse Wave.
Apparirà una linea tratteggiata. Spostare la linea sul vaso sanguigno di interesse e utilizzare la manopola dell'angolo Doppler per regolare l'angolo della linea per allinearlo al flusso sanguigno. Per le misurazioni Doppler ad onda pulsata, è importante guardare l'angolo tra la direzione del flusso sanguigno e il fascio ultrasonico.
Angoli troppo alti o angoli diversi tra gli animali nello stesso esperimento possono portare a misurazioni imprecise della velocità. Quindi, fate clic su Aggiorna (Update) e memorizzate il cineloop delle linee Doppler visualizzate nella finestra di acquisizione Doppler ad onda pulsata. Per esaminare i dati, fare clic su Gestione studi, scorrere fino all'immagine di anteprima di interesse e fare doppio clic su Aggiorna, quindi di nuovo su Gestione studi e quindi su Chiudi per chiudere la finestra del browser per completare l'acquisizione dei dati e salvare una serie registrata.
Per esportare i dati, connettere un disco rigido, fare clic su Esporta in, per contrassegnare una o più serie di dati e selezionare lo spazio di archiviazione per copiare i dati sul disco rigido. Qui vengono mostrate immagini ecografiche rappresentative acquisite in modalità B nei giorni gestazionali 5, 8, 10 e 12 e i corrispondenti risultati di misurazione dell'area di impianto, rivelando una significativa riduzione dell'area di impianto nei topi anti-CD122 trattati carenti di mast cellulari dal giorno gestazionale 10 in poi. L'imaging in modalità B facilita l'imaging e la misurazione di singole parti di un impianto.
Ad esempio, gli animali carenti di mast-cell trattati anti-CD122 dimostrano una significativa riduzione dell'area placentare, dello spessore e del diametro rispetto ai topi non trattati nei giorni gestazionali 10 e 12. Al contrario, l'area placentare e il diametro sono simili tra i gruppi al giorno gestazionale 14 e lo spessore placentare, un aumento significativo degli animali transgenici trattati anti-CD122 rispetto ai topi non trattati nel giorno gestazionale 14. L'imaging Doppler ad onda pulsata dell'arteria uterina per la misurazione della velocità sistolica di picco e della velocità diastolica, e l'indice di resistenza calcolato, rivelano valori simili tra gli animali trattati e non trattati.
L'indice di resistenza dell'arteria ombelicale negli animali carenti di masto cell trattati anti-CD122, tuttavia, è significativamente aumentato rispetto ai topi non trattati. Durante il tentativo di questa procedura, è importante tenere a mente che dovresti farlo a giorni diversi da ogni giorno, per evitare lo stress e il rischio di narcotizzazione ripetitiva degli animali. Seguendo questa procedura, è possibile eseguire altre misurazioni, come la misurazione 3D, la visualizzazione e la quantificazione del movimento dei tessuti nel tempo, misurazioni della pressione sanguigna e anche iniezioni guidate da ultrasuoni.
Dopo il suo sviluppo, questo metodo ha spianato la strada a medici e ricercatori nell'area dell'assistenza ostetrica e prenatale, perché è possibile seguire lo sviluppo fetale e riconoscere possibili anomalie durante la gravidanza.
