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Oral Transmission of <em>Listeria monocytogenes</em> in Mice via Ingestion of Contaminated Food

L. monocytogenes are facultative intracellular bacterial pathogens that cause food borne infections in humans. Very little is known about the ...

university of kentucky 

Clearance of the intracellular bacterial pathogen Listeria monocytogenes requires antigen-specific CD8(+) T cells. Recently it was shown that activation of class Ib major histocompatibility complex (MHC)-restricted CD8(+) T cells alone is sufficient for immune protection against listeriae. A major component of the class Ib MHC-restricted T-cell response is T cells that recognize formylated peptide antigens presented by M3 molecules. Although three N-formylated peptides derived from L. monocytogenes are known to bind to M3 molecules, fMIGWII is the immunodominant epitope presented by M3 during infection of mice. The source of fMIGWII peptide is the L. monocytogenes lemA gene, which encodes a 30-kDa protein of unknown function. In this report, we describe the generation of two L. monocytogenes lemA deletion mutants. We show that lemA is not required for growth of listeriae in tissue culture cells or for virulence during infection of mice. Surprisingly, we found that fMIGWII-specific T cells were still primed following infection with lemA mutant listeriae, suggesting that L. monocytogenes contains at least one additional antigen that is cross-reactive with the fMIGWII epitope. This cross-reactive antigen appears to be a small protease-resistant molecule that is secreted by L. monocytogenes.

The Listeria monocytogenes lemA gene product is not required for intracellular infection or to activate fMIGWII-specific T cells.

Clairance de la bact&eacute;rie pathog&egrave;ne intracellulaire Listeria monocytogenes exige des cellules CD8 T antig&egrave;ne-sp&eacute;cifiques. R&eacute;cemment, il a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute; que l&#39;activation de la classe Ib complexe majeur d&#39;histocompatibilit&eacute; (MHC)-des cellules T CD8 seuls est suffisant pour une protection immunitaire contre la listeriae. Une composante importante de la r&eacute;ponse de la classe Ib MHC restreints lymphocytes est des lymphocytes T qui reconnaissent les antig&egrave;nes de peptides formyl&eacute;s pr&eacute;sent&eacute;s par les mol&eacute;cules de M3. Bien que trois peptides N-formyl&eacute;s d&eacute;riv&eacute;s de L. monocytogenes sont connus pour se lier aux mol&eacute;cules de M3, fMIGWII est l&#39;&eacute;pitope immunodominant pr&eacute;sent&eacute; par M3 au cours de l&#39;infection des souris. La source de fMIGWII peptide est le g&egrave;ne lemA de L. monocytogenes, qui code pour une prot&eacute;ine de 30 kDa de fonction inconnue. Dans ce rapport, nous d&eacute;crivons la g&eacute;n&eacute;ration de deux mutants de d&eacute;l&eacute;tion L. monocytogenes lemA. Nous montrons que lemA n&#39;est pas n&eacute;cessaire pour la croissance des listeriae dans les cellules de culture de tissus ou de virulence durant l&#39;infection des souris. &Eacute;tonnamment, nous avons constat&eacute; que cellules T sp&eacute;cifiques fMIGWII &eacute;taient encore amorc&eacute;es apr&egrave;s l&#39;infection avec lemA listeriae mutant, sugg&eacute;rant que L. monocytogenes contient au moins un antig&egrave;ne suppl&eacute;mentaire qui est une r&eacute;action crois&eacute;e avec l&#39;&eacute;pitope fMIGWII. Cet antig&egrave;ne une r&eacute;action crois&eacute;e semble &ecirc;tre une petite mol&eacute;cule r&eacute;sistante aux prot&eacute;ase qui est s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e par L. monocytogenes.

Le produit du g&egrave;ne lemA Listeria monocytogenes n&#39;est pas requis pour l&#39;infection intracellulaire ou d&#39;activer des cellules T sp&eacute;cifiques fMIGWII.

Liquidazione dell&#39;agente patogeno intracellulare batterica Listeria monocytogenes richiede cellule cellule T antigene-specifiche. Recentemente &egrave; stato dimostrato che attivazione della classe Ib istocompatibilit&agrave; complex (MHC)-limitate cellule cellule T da sola &egrave; sufficiente per la protezione immunitaria contro listerie. Una componente importante della risposta classe Ib MHC-ristretta T-cellula &egrave; cellule T che riconoscono gli antigeni del peptide formylated presentati da molecole M3. Anche se tre peptidi N-formylated derivati da L. monocytogenes sono noti per legarsi alle molecole di M3, fMIGWII &egrave; l&#39;epitopo immunodominanti presentato da M3 durante l&#39;infezione di topi. L&#39;origine del peptide fMIGWII &egrave; il gene L. monocytogenes lemA, che codifica per una proteina di kDa 30 dalla funzione sconosciuta. In questo rapporto, descriviamo la generazione di due mutanti di delezione dal lemA di monocytogenes L.. Mostriamo che lemA non &egrave; necessaria per la crescita di listerie in cellule di coltura del tessuto o per virulenza durante l&#39;infezione di topi. Sorprendentemente, abbiamo trovato che le cellule T specifiche fMIGWII erano ancora innescate dopo infezione con lemA mutante listerie, suggerendo che L. monocytogenes contiene almeno un antigene supplementare che &egrave; interferenti con l&#39;epitopo fMIGWII. Questo antigene interferenti sembra essere una piccola molecola resistente alle proteasi che viene secreta da L. monocytogenes.

Il prodotto del gene lemA Listeria monocytogenes non &egrave; necessario per l&#39;infezione intracellulare o per attivare le cellule T specifiche per fMIGWII.

Studies using major histocompatibility complex (MHC)-Ia-deficient mice have shown that MHC-Ib-restricted CD8+ T cells can clear infections caused by intracellular pathogens such as Listeria monocytogenes. M3-restricted CD8+ T cells, which recognize short hydrophobic N-formylated peptides, appear to comprise a substantial portion of the MHC-Ib-restricted T cell response in the mouse model of L. monocytogenes infection. In this study, we isolated formyltransferase (fmt) mutant strains of L. monocytogenes that lacked the ability to add formyl groups to nascent polypeptides. These fmt mutant Listeria strains did not produce antigens that could be recognized by M3-restricted T cells. We showed that immunization of MHC-Ia-deficient mice with fmt mutant Listeria resulted in stimulation of a protective memory response that cleared subsequent challenge with wild-type L. monocytogenes, despite the fact that M3-restricted CD8+ T cells did not proliferate in these mice. These data suggest that M3-restricted T cells are not required for protection against L. monocytogenes and underscore the importance of searching for new antigen-presenting molecules among the large MHC-Ib family of proteins.

H2-M3-restricted CD8+ T cells are not required for MHC class Ib-restricted immunity against Listeria monocytogenes.

&Eacute;tudes utilisant le complexe majeur d&#39;histocompatibilit&eacute; (MHC) - Ia - deficient mice ont montr&eacute; que les cellules T CD8 + restriction MHC-Ib peuvent effacer des infections caus&eacute;es par des pathog&egrave;nes intracellulaires tels que Listeria monocytogenes. M3 restreints aux cellules T CD8 +, qui reconnaissent des peptides N-formyl&eacute;s hydrophobes courts, semblent constituent une partie importante de la r&eacute;ponse de restriction MHC-Ib des lymphocytes T dans le mod&egrave;le de souris de l&#39;infection de L. monocytogenes. Dans cette &eacute;tude, nous avons isol&eacute; formyltransf&eacute;rase (fmt) des souches mutantes de L. monocytogenes qui n&#39;ont pas la possibilit&eacute; d&#39;ajouter des groupes de formyle aux polypeptides naissantes. Ces souches de Listeria mutantes fmt ne produisaient pas les antig&egrave;nes qui pourraient &ecirc;tre reconnues par les cellules T M3 restreints. Nous avons montr&eacute; que l&#39;immunisation de souris d&eacute;ficientes MHC-Ia avec fmt mutant que Listeria a donn&eacute; lieu &agrave; une stimulation d&#39;une r&eacute;ponse de protection m&eacute;moire vid&eacute; d&eacute;fi subs&eacute;quente avec sauvage L. monocytogenes, malgr&eacute; le fait que les cellules T CD8 + restriction M3 prolif&egrave;rent pas chez ces souris. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que les cellules T M3 restreints ne sont pas n&eacute;cessaires pour se prot&eacute;ger de L. monocytogenes et soulignent l&#39;importance de la recherche de nouvelles mol&eacute;cules pr&eacute;sentatrices parmi la grande famille de MHC-Ib des prot&eacute;ines.

H2-M3-restreint de cellules T CD8 + ne sont pas requises pour MHC classe Ib restreints immunit&eacute; contre Listeria monocytogenes.

Studi usando il complesso maggiore di istocompatibilit&agrave; (MHC) - Ia - deficient mice hanno dimostrato che cellule T CD8 + MHC-Ib-limitato possono cancellare le infezioni causate da agenti patogeni intracellulari come Listeria monocytogenes. M3-restricted CD8 + T cellule che riconoscono brevi peptidi N-formylated idrofobici, sembrano che costituiscono una parte notevole della risposta delle cellule T MHC-Ib-limitato nel modello del mouse dell&#39;infezione da L. monocytogenes. In questo studio, abbiamo isolato formyltransferase (fmt) ceppi mutanti di L. monocytogenes che mancava la capacit&agrave; di aggiungere gruppi di formile nascente polipeptidi. Questi ceppi di Listeria mutanti fmt non hanno prodotto gli antigeni che potevano essere riconosciuti dalle cellule T M3-limitato. Abbiamo dimostrato che l&#39;immunizzazione di mouse MHC-Ia-carenti con fmt mutante che Listeria ha portato nella stimolazione di una risposta protettiva memoria che ha eliminato la sfida successiva con selvaggio-tipo L. monocytogenes, nonostante il fatto che le cellule T CD8 + M3-limitato non ha fatto proliferare in questi topi. Questi dati suggeriscono che le cellule T M3-limitato non sono richieste per la protezione contro L. monocytogenes e sottolineano l&#39;importanza della ricerca di nuove molecole presentanti l&#39;antigene tra grande famiglia delle proteine MHC-Ib.

Cellule T CD8 + H2-M3-limitato non sono richieste per la classe MHC Ib-limitato immunit&agrave; contro Listeria monocytogenes.

IFN-gamma is critical for innate immunity against Listeria monocytogenes (L. monocytogenes), and it has long been thought that NK cells are the major source of IFN-gamma during the first few days of infection. However, it was recently shown that a significant number of CD44highCD8+ T cells also secrete IFN-gamma in an Ag-independent fashion within 16 h of infection with L. monocytogenes. In this report, we showed that infection with other intracellular pathogens did not trigger this early IFN-gamma response and that cytosolic localization of Listeria was required to induce rapid IFN-gamma production by CD44highCD8+ T cells. Infection of C57BL/6 mice with an Escherichia coli strain expressing listeriolysin O (LLO), a pore-forming toxin from L. monocytogenes, also resulted in rapid IFN-gamma expression by CD8+ T cells. These results suggest that LLO expression is essential for induction of the early IFN-gamma response, although it is not yet clear whether LLO plays a direct role in triggering a signal cascade that leads to cytokine production or whether it is required simply to release other bacterial product(s) into the host cell cytosol. Interestingly, mouse strains that displayed a rapid CD8+ T cell IFN-gamma response (C57BL/6, 129, and NZB) all had lower bacterial burdens in the liver 3 days postinfection compared with mouse strains that did not have an early CD8+ T cell IFN-gamma response (BALB/c, A/J, and SJL). These data suggest that participation of memory CD8+ T cells in the early immune response against L. monocytogenes correlates with innate host resistance to infection.

Cytosolic localization of Listeria monocytogenes triggers an early IFN-gamma response by CD8+ T cells that correlates with innate resistance to infection.

IFN-gamma est cruciale pour l&#39;immunit&eacute; inn&eacute;e contre Listeria monocytogenes (L. monocytogenes), et on a longtemps pens&eacute; que les cellules NK sont la principale source d&#39;IFN-gamma durant les premiers jours de l&#39;infection. Toutefois, il a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute; r&eacute;cemment qu&#39;un nombre important de cellules T CD44highCD8 + s&eacute;cr&egrave;te &eacute;galement IFN-gamma de fa&ccedil;on ind&eacute;pendante du Ag dans les 16 h de l&#39;infection par L. monocytogenes. Dans ce rapport, nous avons montr&eacute; que l&#39;infection par d&#39;autres pathog&egrave;nes intracellulaires n&#39;a pas d&eacute;clench&eacute; cette premi&egrave;re r&eacute;ponse de l&#39;IFN-gamma et qu&#39;il fallait pour induire la production d&#39;IFN-gamma rapide par les cellules T CD44highCD8 + localisation cytosolique de Listeria. Infection des souris C57BL/6 avec une souche d&#39;Escherichia coli exprimant la list&eacute;riolysine O (LLO), une toxine formant des pores de L. monocytogenes, a aussi entra&icirc;n&eacute; rapide expression d&#39;IFN-gamma par les cellules T CD8 +. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent qu&#39;expression LLO est essentielle pour l&#39;induction de la r&eacute;ponse d&#39;IFN-gamma pr&eacute;coce, m&ecirc;me si ce n&#39;est pas encore clair si LLO joue un r&ocirc;le direct dans le d&eacute;clenchement d&#39;un signal en cascade qui conduit &agrave; la production de cytokines ou si c&#39;est n&eacute;cessaire simplement pour lib&eacute;rer les autres produits bact&eacute;riens dans le cytosol de cellule h&ocirc;te. Fait int&eacute;ressant, les souches de souris qui affiche un T CD8 + rapide cell r&eacute;ponse de l&#39;IFN-gamma (C57BL/6, 129 et NZB) tous pr&eacute;sentaient des charges bact&eacute;riennes plus faibles dans le foie 3 jours apr&egrave;s l&#39;infection compar&eacute;e aux souches de souris qui n&#39;a pas eu une cellule T CD8 + d&eacute;but r&eacute;ponse de l&#39;IFN-gamma (BALB/c, A / J et SJL). Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que la participation des cellules T CD8 + m&eacute;moire dans la r&eacute;ponse immunitaire pr&eacute;coce contre les corr&eacute;lats de L. monocytogenes avec r&eacute;sistance de l&#39;h&ocirc;te inn&eacute;e &agrave; l&#39;infection.

Localisation cytosolique de Listeria monocytogenes d&eacute;clenche une r&eacute;ponse pr&eacute;coce de IFN-gamma par les cellules T CD8 + qui est en corr&eacute;lation avec la r&eacute;sistance inn&eacute;e &agrave; l&#39;infection.

IFN-gamma &egrave; critico per l&#39;immunit&agrave; innata contro Listeria monocytogenes (L. monocytogenes), e si &egrave; a lungo ritenuto che le cellule NK sono la fonte principale di IFN-gamma durante i primi giorni di infezione. Tuttavia, recentemente &egrave; stato dimostrato che un significativo numero di cellule T CD44highCD8 + inoltre secrezione IFN-gamma in maniera indipendente dalla Ag entro 16 h di infezione con L. monocytogenes. In questa relazione, abbiamo mostrato che infezione con altri agenti patogeni intracellulari non ha fatto scatenare questa risposta iniziale di IFN-gamma e che localizzazione citosolica di Listeria &egrave; stata necessaria per indurre la rapida produzione di IFN-gamma di cellule CD44highCD8 + T. Infezione di topi C57BL/6 con un ceppo di Escherichia coli esprimendo listeriolysin O (LLO), una tossina che formano dei pori da L. monocytogenes, ha portato anche in rapida espressione di IFN-gamma di cellule T CD8 +. Questi risultati suggeriscono che LLO espressione &egrave; essenziale per l&#39;induzione della risposta precoce IFN-gamma, anche se non &egrave; ancora chiaro se LLO gioca un ruolo diretto nell&#39;innescare un segnale a cascata che porta alla produzione di citochine o se &egrave; semplicemente necessario rilasciare altri prodotti batterici nel cytosol delle cellule ospite. &Egrave; interessante notare, ceppi di topo che visualizzate una rapida CD8 + T cell risposta IFN-gamma (C57BL/6, 129 e NZB) avuto tutti gli oneri batterici inferiori nel fegato 3 giorni postinfection rispetto ai ceppi del mouse che non hanno una precoce delle cellule CD8 + T risposta IFN-gamma (BALB/c, A / J e SJL). Questi dati suggeriscono che la partecipazione di cellule T CD8 + memoria precoce risposta immunitaria contro correla di L. monocytogenes con resistenza innata ospite all&#39;infezione.

Localizzazione citosolica di Listeria monocytogenes innesca una risposta iniziale di IFN-gamma di cellule T CD8 + che correla con resistenza innata all&#39;infezione.

Detection of cytotoxic activity by pathogen-specific T cells of unknown antigenic specificity is difficult due to the limitations of using infected cells, instead of peptide-pulsed cells, as targets. We report here that the recently described CD107 mobilization assay readily allowed for the ex vivo detection of cytotoxic T lymphocytes (CTL) with a novel MHC-Ib restriction that specifically recognized Listeria monocytogenes-infected macrophages. The CD107 mobilization assay is likely to be a useful tool for detection of CD8(+) T cells that recognize a wide variety of intracellular pathogens.

Use of the CD107 mobilization assay reveals that cytotoxic T lymphocytes with novel MHC-Ib restriction are activated during Listeria monocytogenes infection.

D&eacute;tection de l&#39;activit&eacute; cytotoxique de lymphocytes T sp&eacute;cifiques de sp&eacute;cificit&eacute; antig&eacute;nique inconnue est difficile en raison des limitations de l&#39;utilisation des cellules infect&eacute;es, au lieu de cellules de peptide-puls&eacute;, comme cibles. Nous rapportons ici que le test de mobilisation CD107 d&eacute;crit r&eacute;cemment admis facilement pour l&#39;ex vivo d&eacute;tection des lymphocytes T cytotoxiques (CTL) avec une nouvelle restriction MHC-Ib qui reconna&icirc;t sp&eacute;cifiquement les macrophages infect&eacute;s par monocytogenes de Listeria. Le test de mobilisation CD107 est susceptible d&#39;&ecirc;tre un outil utile pour la d&eacute;tection des cellules T CD8 qui reconnaissent une grande vari&eacute;t&eacute; de pathog&egrave;nes intracellulaires.

Utilisation de l&#39;essai de mobilisation CD107 r&eacute;v&egrave;le que les lymphocytes T cytotoxiques avec nouvelle restriction MHC-Ib sont activ&eacute;s au cours de l&#39;infection &agrave; Listeria monocytogenes.

Rilevazione di attivit&agrave; citotossica di cellule T da organismi patogeni specifici di specificit&agrave; antigenica sconosciuto &egrave; difficile a causa delle limitazioni dell&#39;utilizzo di cellule infette, invece le cellule del peptide-pulsato, come bersagli. Segnaliamo qui che il dosaggio di mobilitazione CD107 recentemente descritto facilmente consentito per l&#39;ex vivo rilevamento dei linfociti T citotossici (CTL) con un romanzo restrizione MHC-Ib che specificamente riconosciuti i macrofagi infettati monocytogenes di Listeria. Il dosaggio di mobilitazione CD107 rischia di essere un utile strumento per la rilevazione delle cellule cellule T che riconoscono una vasta gamma di agenti patogeni intracellulari.

Uso del dosaggio mobilitazione CD107 rivela che i linfociti T citotossici con restrizione MHC-Ib romanzo vengono attivati durante l&#39;infezione da Listeria monocytogenes.

A subset of CD8+ T cells can rapidly secrete gamma interferon (IFN-gamma) in an antigen-independent and interleukin-12 (IL-12)- and IL-18-dependent manner within 16 h of infection with the intracellular bacterial pathogen Listeria monocytogenes. This rapid IFN-gamma response is robust enough to be detected directly ex vivo and is not observed following infection with intracellular bacterial pathogens that remain sequestered within host cell vacuoles. We demonstrate here that three distinct pathways can lead to rapid secretion of IFN-gamma by CD8+ T cells during L. monocytogenes infection: (i) a direct cytokine-inducing activity encoded by the cholesterol-dependent cytolysin (CDC) listeriolysin O (LLO) acts within the infected cell, (ii) the pore-forming activity of LLO promotes cytosolic localization of bacterial products that trigger cytosol-specific signaling pathways, and (iii) the sustained presence of high concentrations of bacterial products can exogenously trigger cytokine production. Although it has been suggested that CDC protein toxins may act as Toll-like receptor 4 (TLR4) agonists to trigger proinflammatory cytokine secretion, we show in this report that TLR4 signaling is not required to induce a maximal rapid IFN-gamma response by CD8+ T cells. The results presented here indicate that multiple mechanisms contribute to the induction of rapid IFN-gamma secretion by CD8+ T cells during Listeria infection and that care must be taken when interpreting the results of in vitro assays, since the contribution of each pathway can vary depending on how the assay is performed.

Multiple mechanisms contribute to the robust rapid gamma interferon response by CD8+ T cells during Listeria monocytogenes infection.

Un sous-ensemble de cellules T CD8 + peut rapidement s&eacute;cr&eacute;ter l&#39;interf&eacute;ron gamma (IFN-gamma) dans un antig&egrave;ne-ind&eacute;pendant et l&#39;interleukine-12 (IL-12)- et IL-18-d&eacute;pendant moins de 16 h d&#39;infection par la bact&eacute;rie pathog&egrave;ne intracellulaire Listeria monocytogenes. Cette r&eacute;action rapide d&#39;IFN-gamma est assez robuste pour &ecirc;tre d&eacute;tect&eacute;e directement ex vivo et n&#39;est pas observ&eacute;e suite &agrave; une infection par des pathog&egrave;nes bact&eacute;riens intracellulaires qui restent pi&eacute;g&eacute;es dans les vacuoles des cellules h&ocirc;tes. Nous montrons ici que trois voies distinctes peuvent conduire &agrave; une s&eacute;cr&eacute;tion rapide d&#39;IFN-gamma par les cellules T CD8 + au cours de l&#39;infection de L. monocytogenes: (i) une activit&eacute; directe de cytokine induisant cod&eacute;e par la cytolysine cholest&eacute;rol-d&eacute;pendante (CDC) list&eacute;riolysine O (LLO) agit dans le cadre de la cellule infect&eacute;e, (ii) l&#39;activit&eacute; formant des pores de LLO favorise une localisation cytosolique de produits bact&eacute;riens qui d&eacute;clenchent des voies de signalisation sp&eacute;cifiques cytosol et (iii) la pr&eacute;sence soutenue de fortes concentrations de produits bact&eacute;riens peut d&eacute;clencher exog&egrave;ne de la production de cytokines. On a suppos&eacute; que les toxines prot&eacute;iques CDC peuvent agir comme Toll-like receptor 4 (TLR4) agonistes pour d&eacute;clencher la s&eacute;cr&eacute;tion de cytokines pro-inflammatoires, nous montrons dans le pr&eacute;sent rapport que TLR4 signalisation n&#39;est pas tenue d&#39;induire une r&eacute;ponse maximale d&#39;IFN-gamma rapide par les cellules T CD8 +. Les r&eacute;sultats pr&eacute;sent&eacute;s ici montrent que plusieurs m&eacute;canismes contribuent &agrave; l&#39;induction de la s&eacute;cr&eacute;tion rapide d&#39;IFN-gamma par les cellules T CD8 + au cours de l&#39;infection &agrave; Listeria et qu&#39;il faut quand interpr&eacute;ter les r&eacute;sultats d&#39;essais in vitro, puisque la contribution de chaque voie peut varier selon la fa&ccedil;on dont l&#39;analyse est r&eacute;alis&eacute;e.

Plusieurs m&eacute;canismes contribuent &agrave; la r&eacute;ponse de l&#39;interf&eacute;ron gamma rapide robuste par les cellules T CD8 + au cours de l&#39;infection &agrave; Listeria monocytogenes.

Un subset di cellule T CD8 + pu&ograve; rapidamente secernono interferone gamma (IFN-gamma) in un antigene-indipendente e interleukin-12 (IL-12)- e IL-18-dipendente modo entro 16 h di infezione con l&#39;agente patogeno batterico intracellulare Listeria monocytogenes. Questa rapida risposta IFN-gamma &egrave; abbastanza robusta per essere rilevato direttamente ex vivo e non si osserva dopo infezione da agenti patogeni batterici intracellulari che rimangono sequestrato all&#39;interno di vacuoli cellula ospitante. Qui dimostriamo che tre distinti percorsi possono portare a rapida secrezione di IFN-gamma di cellule T CD8 + durante l&#39;infezione da L. monocytogenes: (i) un&#39;attivit&agrave; di induzione delle citochine diretta codificato dal cytolysin colesterolo-dipendente (CDC) listeriolysin O (LLO) agisce all&#39;interno della cellula infetta, (ii) l&#39;attivit&agrave; formando dei pori di LLO promuove la localizzazione citosolica dei prodotti batterici che attivano specifici del citosol segnalazione percorsi e (iii) la presenza continua di alte concentrazioni di prodotti batterici esogenicamente pu&ograve; innescare la produzione di citochine. Anche se &egrave; stato suggerito che le tossine di proteina CDC possono agire come recettori Toll-like 4 (TLR4) agonisti per innescare la secrezione di citochine proinfiammatorie, vi mostriamo in questa relazione che TLR4 segnalazione non &egrave; necessario per indurre una risposta rapida massima di IFN-gamma di cellule T CD8 +. I risultati presentati qui indicano che meccanismi multipli contribuiscono per l&#39;induzione di secrezione di IFN-gamma di cellule T CD8 + rapida durante l&#39;infezione da Listeria e che cura deve essere presa quando nell&#39;interpretazione dei risultati di saggi in vitro, poich&eacute; il contributo di ciascun percorso pu&ograve; variare a seconda di come viene eseguita l&#39;analisi.

Meccanismi multipli contribuiscono alla risposta interferone gamma rapida robusta di cellule T CD8 + durante l&#39;infezione da Listeria monocytogenes.

It is widely reported that Listeria monocytogenes can infect virtually all cell types, however, the degree to which this facultative intracellular pathogen can infect lymphocytes has not been well characterized. Previous studies have shown that a subset of lymphocytes, including activated T cells, are susceptible to apoptosis following exposure to L. monocytogenes, but the ability of the bacteria to replicate in the cytosol of lymphocytes prior to cell death was not examined. In this report, we demonstrate that intracellular L. monocytogenes can survive and multiply in vitro in a variety of transformed cell lines of lymphocytic origin. Intracellular L. monocytogenes were also recovered from splenic B cells, T cells, and NK cells following intravenous infection of mice. In fact, lymphocyte-associated L. monocytogenes comprised a substantial portion of the total bacterial burden in the spleen throughout the course of murine infection and B cell-deficient mice had significantly lower titers of bacteria present in the spleen following intravenous infection. These results suggest that lymphocytes can be a reservoir for L. monocytogenes growth in vivo.

Lymphocytes serve as a reservoir for Listeria monocytogenes growth during infection of mice.

Il a largement rapport&eacute; que Listeria monocytogenes peut infecter pratiquement tous les types de cellules, cependant, le degr&eacute; auquel ce pathog&egrave;ne intracellulaire facultatif peut infecter les lymphocytes n&#39;a pas &eacute;t&eacute; bien caract&eacute;ris&eacute;. Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures ont montr&eacute; qu&#39;un sous-ensemble des lymphocytes, y compris les lymphocytes T activ&eacute;s, sont sensibles &agrave; l&#39;apoptose apr&egrave;s une exposition &agrave; L. monocytogenes, mais la capacit&eacute; des bact&eacute;ries &agrave; r&eacute;pliquer dans le cytosol des lymphocytes avant la mort des cellules n&#39;a pas &eacute;t&eacute; examin&eacute;e. Dans ce rapport, nous d&eacute;montrons qu&#39;intracellulaire L. monocytogenes peuvent survivre et se multiplier in vitro dans une vari&eacute;t&eacute; de lign&eacute;es cellulaires transform&eacute;es d&#39;origine lympho&iuml;de. Intracellulaires L. monocytogenes parasitent &eacute;galement les cellules spl&eacute;niques de B, les lymphocytes T et des cellules NK apr&egrave;s infection par voie intraveineuse &agrave; des souris. En fait, lymphocyte-associated L. monocytogenes comprend une partie importante de la charge bact&eacute;rienne totale dans la rate tout au long de l&#39;&eacute;volution de l&#39;infection murine et souris d&eacute;ficientes en lymphocytes B avaient des titres significativement plus faibles de bact&eacute;ries pr&eacute;sentes dans la rate suite &agrave; une infection par voie intraveineuse. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les lymphocytes peuvent &ecirc;tre un r&eacute;servoir de croissance monocytogenes de L. in vivo.

Lymphocytes servent de r&eacute;servoir pour la croissance de Listeria monocytogenes durant l&#39;infection des souris.

&Egrave; stato ampiamente riferito che Listeria monocytogenes pu&ograve; infettare praticamente tutti i tipi di cellule, tuttavia, il grado a cui questo patogeno intracellulare facoltativo pu&ograve; infettare i linfociti non si &egrave; ben caratterizzato. Studi precedenti hanno mostrato che un sottoinsieme dei linfociti, comprese le cellule T attivate, sono suscettibili all&#39;apoptosi in seguito all&#39;esposizione di L. monocytogenes, ma non &egrave; stata esaminata la capacit&agrave; dei batteri di replicare nel citosol dei linfociti prima della morte delle cellule. In questa relazione, dimostreremo che intracellulare L. monocytogenes possono sopravvivere e moltiplicarsi in vitro in una variet&agrave; di linee cellulari trasformate di origine linfocitaria. Intracellulare L. monocytogenes sono stati recuperati anche dalla splenica B, cellule T e cellule NK dopo infezione per via endovenosa di topi. In realt&agrave;, associato al linfocita di L. monocytogenes comprende una porzione sostanziale della carica batterica totale nella milza durante tutto il corso dell&#39;infezione murina e topi con deficit delle cellule B erano significativamente inferiori titoli di batteri presenti nella milza dopo infezione per via endovenosa. Questi risultati suggeriscono che i linfociti possono essere un serbatoio per la crescita di monocytogenes L. in vivo.

Linfociti servono come un serbatoio per una crescita Listeria monocytogenes durante l&#39;infezione di topi.

Heat shock factor 1 (HSF1) is a stress-induced transcription factor that promotes expression of genes that protect mammalian cells from the lethal effects of severely elevated temperatures (>42Â°C). However, we recently showed that HSF1 is activated at a lower temperature (39.5Â°C) in T cells, suggesting that HSF1 may be important for preserving T cell function during pathogen-induced fever responses. To test this, we examined the role of HSF1 in clearance of Listeria monocytogenes, an intracellular bacterial pathogen that elicits a strong CD8(+) T cell response in mice. Using temperature transponder microchips, we showed that the core body temperature increased approximately 2Â°C in L. monocytogenes-infected mice and that the fever response was maintained for at least 24 h. HSF1-deficient mice cleared a low-dose infection with slightly slower kinetics than did HSF1(+/+) littermate controls but were significantly more susceptible to challenges with higher doses of bacteria. Surprisingly, HSF1-deficient mice did not show a defect in CD8(+) T cell responses following sublethal infection. However, when HSF1-deficient mice were challenged with high doses of L. monocytogenes, increased levels of serum tumor necrosis factor alpha (TNF-Î±) and gamma interferon (IFN-Î³) compared to those of littermate control mice were observed, and rapid death of the animals occurred within 48 to 60 h of infection. Neutralization of TNF-Î± enhanced the survival of HSF1-deficient mice. These results suggest that HSF1 is needed to prevent the overproduction of proinflammatory cytokines and subsequent death due to septic shock that can result following high-dose challenge with bacterial pathogens.

Heat shock factor 1 protects mice from rapid death during Listeria monocytogenes infection by regulating expression of tumor necrosis factor alpha during fever.

Facteur de choc thermique 1 (HSF1) est un facteur de transcription induite par le stress qui favorise l&#39;expression des g&egrave;nes qui prot&egrave;gent les cellules de mammif&egrave;res de l&#39;effet l&eacute;tal des temp&eacute;ratures tr&egrave;s &eacute;lev&eacute;es (&amp;gt; 42&deg; C). Cependant, nous viennent de montrer que HSF1 est activ&eacute;e &agrave; une temp&eacute;rature plus basse (39,5 &deg; C) dans les cellules T, sugg&eacute;rant que HSF1 peut &ecirc;tre important pour pr&eacute;server la fonction des cellules T durant les r&eacute;ponses de fi&egrave;vre provoqu&eacute;e par le pathog&egrave;ne. Pour le v&eacute;rifier, nous avons examin&eacute; le r&ocirc;le de HSF1 clairance de Listeria monocytogenes, un bact&eacute;rie pathog&egrave;ne intracellulaire qui provoque une forte r&eacute;ponse des lymphocytes T CD8 chez la souris. &Agrave; l&#39;aide de puces transpondeur temp&eacute;rature, nous avons montr&eacute; que la temp&eacute;rature centrale du corps a augment&eacute; d&#39;environ 2&deg; C chez la souris de L. monocytogenes-infect&eacute;s et que la r&eacute;ponse de fi&egrave;vre a &eacute;t&eacute; maintenue pendant au moins souris d&eacute;ficientes HSF1 en 24 h. &eacute;limin&eacute; une infection &agrave; faible dose avec une cin&eacute;tique l&eacute;g&egrave;rement plus lente que fait m&ecirc;me port&eacute;e HSF1(+/+) contr&ocirc;les mais &eacute;taient nettement plus vuln&eacute;rables aux d&eacute;fis avec des doses plus &eacute;lev&eacute;es de bact&eacute;ries. &Eacute;tonnamment, souris d&eacute;ficientes HSF1 n&#39;a pas montr&eacute; un d&eacute;faut dans les lymphocytes T CD8, suite &agrave; une infection subl&eacute;tale. Toutefois, lorsque les souris d&eacute;ficientes en HSF1 ont &eacute;t&eacute; contest&eacute;es avec de fortes doses de L. monocytogenes, augmentation des niveaux de s&eacute;rum facteur de n&eacute;crose tumorale alpha (TNF-&alpha;) et l&#39;interf&eacute;ron gamma (IFN-&gamma;) par rapport &agrave; celles des souris t&eacute;moins m&ecirc;me port&eacute;e ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;e et rapide la mort des animaux s&#39;est produite dans les 48 &agrave; 60 h d&#39;infection. Neutralisation de TNF-&alpha; a am&eacute;lior&eacute; la survie des souris d&eacute;ficientes HSF1. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que HSF1 est n&eacute;cessaire pour &eacute;viter la surproduction de cytokines pro-inflammatoires et la mort suite &agrave; un choc septique qui peut r&eacute;sulter suite &agrave; forte dose de d&eacute;fi avec des bact&eacute;ries pathog&egrave;nes.

Facteur de choc thermique 1 prot&egrave;ge les souris d&#39;une mort rapide au cours de l&#39;infection &agrave; Listeria monocytogenes par r&eacute;gulation d&#39;expression du facteur de n&eacute;crose tumorale alpha durant la fi&egrave;vre.

Fattore di scossa di calore 1 (HSF1) &egrave; un fattore di stress-induced trascrizione che promuove l&#39;espressione dei geni che proteggono le cellule di mammiferi dagli effetti letali di temperature molto elevate (&amp;gt; 42&deg; C). Tuttavia, abbiamo recentemente dimostrato che HSF1 &egrave; attivato ad una temperatura inferiore (39,5 &deg; C) in cellule T, suggerendo che HSF1 pu&ograve; essere importante per preservare la funzione delle cellule T durante le risposte febbre indotta da agenti patogeni. Per eseguire questo test, abbiamo esaminato il ruolo di HSF1 in liquidazione di Listeria monocytogenes, un patogeno batterico intracellulare che suscita una forte risposta delle cellule T cellule nei topi. Utilizzo di microchips transponder temperatura, vi abbiamo mostrato che la temperatura corporea aumentata circa 2&deg; C in topi di L. monocytogenes infetti e che la risposta di febbre &egrave; stata mantenuta per almeno topi deficienti HSF1 24 h. ha eliminato un&#39;infezione basse dosi con cinetica leggermente pi&ugrave; lento di quanto ha fatto HSF1(+/+) alleverei controlli ma erano significativamente pi&ugrave; sensibili alle sfide con dosi pi&ugrave; elevate di batteri. Sorprendentemente, mouse HSF1-carenti non hanno mostrato un difetto nelle risposte di cellule T cellule dopo infezione subletali. Tuttavia, quando il mouse HSF1-carenti sono stati sfidati con alte dosi di L. monocytogenes, aumento dei livelli di siero fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-&alpha;) e l&#39;interferone gamma (IFN-&gamma;) rispetto a quelli dei topi di controllo alleverei sono stata osservata e rapida morte degli animali accaduto entro 48-60 h di infezione. Neutralizzazione del TNF-&alpha; migliorato la sopravvivenza dei topi HSF1-carenti. Questi risultati suggeriscono che HSF1 &egrave; necessaria per evitare la sovrapproduzione di citochine proinfiammatorie e successiva morte dovuta a shock settico che possono risultare dopo la sfida della alto-dose con agenti patogeni batterici.

Fattore di scossa di calore 1 protegge topi da morte rapida durante l&#39;infezione da Listeria monocytogenes regolare espressione del fattore di necrosi tumorale alfa durante la febbre.

A subset of CD44(hi)CD8(+) T cells isolated from C57BL/6/J (B6) mice, but not BALB/c/By/J (BALB/c) mice, rapidly secrete IFN-Î³ within 16 h of infection with Listeria monocytogenes. This Ag-independent response requires the presence of both IL-12 and IL-18. Previous studies showed that dendritic cells from B6 mice produced more Th1-type cytokines such as IL-12 than did those from BALB/c mice in response to L. monocytogenes infection. In this report, we demonstrate that the microenvironment in L. monocytogenes-infected BALB/c mice is sufficient to induce responsive B6 CD8(+) T cells to rapidly secrete IFN-Î³. Furthermore, BALB/c CD8(+) T cells did not rapidly secrete IFN-Î³ even when they were exposed to high concentrations of IL-12 plus IL-18 in vitro. In the presence of IL-12 and IL-18, B6 CD44(hi)CD8(+) T cells upregulated expression of the receptor subunits for these cytokines more rapidly than did BALB/c T cells. In comparing particular subsets of memory phenotype CD8(+) T cells, we found that virtual memory cells, rather than true Ag-experienced cells, had the greatest level of impairment in BALB/c mice. These data suggest that the degree of cytokine-driven bystander activation of CD8(+) T cells that occurs during infection depends on both APCs and T cell-intrinsic properties that can vary among mouse strains.

T cell-intrinsic factors contribute to the differential ability of CD8+ T cells to rapidly secrete IFN-Î³ in the absence of antigen.

Un sous-ensemble de cellules de T de CD44(hi)CD8(+) isol&eacute; de souris C57BL/6/J (B6), mais pas les souris BALB/c/par/J (BALB/c), rapidement s&eacute;cr&egrave;tent IFN-&gamma; dans les 16 h de l&#39;infection par Listeria monocytogenes. Cette r&eacute;ponse Ag ind&eacute;pendant n&eacute;cessite la pr&eacute;sence d&#39;IL-12 et de IL-18. Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures ont montr&eacute; que les cellules dendritiques des souris B6 plus de cytokines de type Th1 telles que IL-12 que ceux des souris BALB/c en r&eacute;ponse &agrave; L. monocytogenes infection. Dans le pr&eacute;sent rapport, nous d&eacute;montrons que le microenvironnement chez L. monocytogenes infect&eacute;s BALB/c est suffisant pour induire les cellules T CD8 B6 sensibles rapidement s&eacute;cr&egrave;tent IFN-&gamma;. En outre, les cellules T CD8 BALB/c s&eacute;cr&egrave;tent pas rapidement IFN-&gamma; m&ecirc;me lorsqu&#39;ils ont &eacute;t&eacute; expos&eacute;s &agrave; des concentrations &eacute;lev&eacute;es de IL-12, plus IL-18 in vitro. En pr&eacute;sence d&#39;IL-12 et IL-18, B6 CD44(hi)CD8(+) T les cellules plus rapidement que les cellules BALB/c T expression augment&eacute;e des sous-unit&eacute;s du r&eacute;cepteur pour ces cytokines. En comparant des sous-ensembles sp&eacute;cifiques de cellules de m&eacute;moire ph&eacute;notype CD8 T, nous avons constat&eacute; que les cellules de m&eacute;moire virtuelle, plut&ocirc;t que de vrai Ag exp&eacute;riment&eacute;s cellules, avaient le plus haut degr&eacute; de d&eacute;ficience chez des souris BALB/c. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que le degr&eacute; d&#39;activation de spectateur ax&eacute;e sur les cytokines des cellules T CD8 qui se produit au cours de l&#39;infection d&eacute;pend de deux APC et des propri&eacute;t&eacute;s intrins&egrave;ques des lymphocytes T qui peuvent varier entre les souches de souris.

Facteurs intrins&egrave;ques des lymphocytes t contribuent &agrave; la capacit&eacute; diff&eacute;rentielle des cellules T CD8 + rapidement s&eacute;cr&egrave;tent IFN-&gamma; en l&#39;absence d&#39;antig&egrave;ne.

Un subset di cellule T CD44(hi)CD8(+) isolate da topi C57BL/6/J (B6), ma non topi BALB/c/da/J (BALB/c), rapidamente secernono IFN-&gamma; entro 16 h di infezione da Listeria monocytogenes. Questa risposta Ag-indipendente richiede la presenza di IL-12 e IL-18. Studi precedenti hanno mostrato che le cellule dendritiche da topi B6 prodotto pi&ugrave; Th1-tipo citochine come IL-12 che ha fatto quelli da topi BALB/c in risposta all&#39;infezione da L. monocytogenes. In questa relazione, ci dimostrano che il microambiente in topi di L. monocytogenes infetti BALB/c &egrave; sufficiente per indurre cellule B6 cellule T reattive rapidamente secernono IFN-&gamma;. Le cellule T cellule BALB/c, inoltre, non ha fatto secernono rapidamente IFN-&gamma; anche quando essi sono stati esposti ad elevate concentrazioni di IL-12 e IL-18 in vitro. In presenza di IL-12 e IL-18, B6 CD44(hi)CD8(+) T cellule sovraregolati espressione di una subunit&agrave; del recettore per queste citochine pi&ugrave; rapidamente di quanto ha fatto cellule BALB/c T. Nel confronto tra particolari sottoinsiemi di cellule fenotipo di cellule T memoria, abbiamo trovato che le cellule di memoria virtuale, piuttosto che il vero Ag-sperimentato le cellule, avevano il pi&ugrave; alto livello di compromissione in topi BALB/c. Questi dati suggeriscono che il grado di attivazione di citochine-driven astante delle cellule cellule T che si verifica durante l&#39;infezione dipende entrambe APC e propriet&agrave; intrinseche delle cellule T che pu&ograve; variare tra i ceppi il mouse.

T cell-intrinseci fattori contribuiscono alla capacit&agrave; differenziale di cellule T CD8 + rapidamente secernono IFN-&gamma; in assenza di antigene.

A subset of CD44(hi)CD8+ T cells in some, but not all mice, can be induced to rapidly secrete IFNÎ³ during infection with Listeria monocytogenes. This response is dependent on the presence of both IL-12 and IL-18 and does not require engagement of the T cell receptor. In this study, we demonstrate that human CD8+ T cells also vary widely in their ability to secrete IFNÎ³ within 15h of either Listeria infection or cytokine stimulation. The magnitude of the rapid IFNÎ³ response correlated more closely with the intrinsic responsiveness of the T cells to cytokine stimulation rather than the amount of IL-12 produced. CD8+ T cells from 2 out of 16 blood donors (12.5%) failed to generate a significant IFNÎ³ response. These results demonstrate that bystander activation of CD8+ T cells varies among individuals and validate further study of the differential responses observed using BALB/c vs. C57BL/6 mice.

Human CD8+ T cells display a differential ability to undergo cytokine-driven bystander activation.

Un sous-ensemble du CD44 (Salut) T CD8 + cellules dans certains, mais pas toutes les souris, peuvent &ecirc;tre induites &agrave; s&eacute;cr&eacute;ter rapidement IFN&gamma; au cours de l&#39;infection par Listeria monocytogenes. Cette r&eacute;ponse d&eacute;pend de la pr&eacute;sence d&#39;IL-12 et IL-18 et n&#39;exige pas d&#39;engagement du r&eacute;cepteur des lymphocytes T. Dans cette &eacute;tude, nous d&eacute;montrons que des cellules T CD8 + varient &eacute;galement consid&eacute;rablement dans leur capacit&eacute; &agrave; s&eacute;cr&eacute;ter des IFN&gamma; dans les 15h de stimulation des cytokines ou infection &agrave; Listeria. L&#39;ampleur de la r&eacute;action rapide d&#39;IFN&gamma; corr&eacute;l&eacute;es plus &eacute;troitement avec la r&eacute;activit&eacute; intrins&egrave;que des cellules T &agrave; la stimulation des cytokines, plut&ocirc;t que la quantit&eacute; d&#39;IL-12 produites. Les cellules T CD8 + de donneurs de sang de 2 des 16 (12,5 %) n&#39;a pas pu g&eacute;n&eacute;rer une r&eacute;ponse significative d&#39;IFN&gamma;. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que l&#39;activation spectateur des cellules T CD8 + varie selon les individus et valider plus loin l&#39;&eacute;tude des r&eacute;ponses diff&eacute;rentielles observ&eacute;es &agrave; l&#39;aide de la souris BALB/c vs C57BL/6.

Des cellules T CD8 + affichent une aptitude diff&eacute;rentielle &agrave; activation spectateur ax&eacute;e sur les cytokines.

Un sottoinsieme di CD44 (Ciao) CD8 + T cellule in alcuni, ma non tutti i topi, possono essere indotto a rapidamente secernono IFN&gamma; durante l&#39;infezione da Listeria monocytogenes. Questa risposta dipende dalla presenza di IL-12 e di IL-18 e non richiede l&#39;impegno del recettore delle cellule T. In questo studio dimostriamo che le cellule CD8 + T umane anche variano ampiamente nella loro capacit&agrave; di secernere IFN&gamma; entro 15h di infezione da Listeria o stimolazione delle citochine. La grandezza della risposta rapida IFN&gamma; pi&ugrave; strettamente correlato con la reattivit&agrave; intrinseca delle cellule T alla stimolazione delle citochine, piuttosto che la quantit&agrave; di IL-12 prodotto. Cellule T CD8 + da donatori di sangue 2 di 16 (12,5%) non &egrave; riuscito a generare una risposta significativa IFN&gamma;. Questi risultati dimostrano che astante attivazione delle cellule T CD8 + varia tra gli individui e convalidare ulteriormente studio delle risposte differenziali osservati utilizzando topi BALB/c vs C57BL/6.

Umane cellule T CD8 + visualizzano una capacit&agrave; differenziale di sottoporsi ad attivazione bystander cytokine-driven.

Intestinal Listeria monocytogenes infection is not efficient in mice and this has been attributed to a low affinity interaction between the bacterial surface protein InlA and E-cadherin on murine intestinal epithelial cells. Previous studies using either transgenic mice expressing human E-cadherin or mouse-adapted L. monocytogenes expressing a modified InlA protein (InlA(m)) with high affinity for murine E-cadherin showed increased efficiency of intragastric infection. However, the large inocula used in these studies disseminated to the spleen and liver rapidly, resulting in a lethal systemic infection that made it difficult to define the natural course of intestinal infection. We describe here a novel mouse model of oral listeriosis that closely mimics all phases of human disease: (1) ingestion of contaminated food, (2) a distinct period of time during which L. monocytogenes colonize only the intestines, (3) varying degrees of systemic spread in susceptible vs. resistant mice, and (4) late stage spread to the brain. Using this natural feeding model, we showed that the type of food, the time of day when feeding occurred, and mouse gender each affected susceptibility to L. monocytogenes infection. Co-infection studies using L. monocytogenes strains that expressed either a high affinity ligand for E-cadherin (InlA(m)), a low affinity ligand (wild type InlA from Lm EGDe), or no InlA (Î”inlA) showed that InlA was not required to establish intestinal infection in mice. However, expression of InlA(m) significantly increased bacterial persistence in the underlying lamina propria and greatly enhanced dissemination to the mesenteric lymph nodes. Thus, these studies revealed a previously uncharacterized role for InlA in facilitating systemic spread via the lymphatic system after invasion of the gut mucosa.

InlA promotes dissemination of Listeria monocytogenes to the mesenteric lymph nodes during food borne infection of mice.

L&#39;infection intestinale Listeria monocytogenes n&#39;est pas efficace chez les souris, et ceci a &eacute;t&eacute; attribu&eacute; &agrave; une interaction faible affinit&eacute; entre la prot&eacute;ine bact&eacute;rienne de surface InlA et la E-cadh&eacute;rine sur les cellules &eacute;pith&eacute;liales intestinales murines. &Eacute;tudes ant&eacute;rieures, en utilisant soit des souris transg&eacute;niques exprimant la E-cadh&eacute;rine ou souris adapt&eacute;s L. monocytogenes exprimant une prot&eacute;ine modifi&eacute;e de l&#39;InlA (InlA(m)) avec une forte affinit&eacute; pour murin Qu&#39;e-cadh&eacute;rine a montr&eacute; une efficacit&eacute; accrue de l&#39;infection gastrique. Cependant, les grands inoculums utilis&eacute;es dans ces &eacute;tudes diffus&eacute;s &agrave; la rate et le foie rapidement, entra&icirc;nant une infection syst&eacute;mique l&eacute;tale qui rendait difficile de d&eacute;finissent l&#39;&eacute;volution naturelle de l&#39;infection intestinale. Nous d&eacute;crivons ici un mod&egrave;le de souris roman de list&eacute;riose orale qui imite &eacute;troitement toutes les phases de la maladie humaine: (1) l&#39;ingestion d&#39;aliments contamin&eacute;s, (2) une p&eacute;riode distincte au cours de laquelle L. monocytogenes coloniser uniquement l&#39;intestins, (3) des degr&eacute;s de syst&eacute;mique r&eacute;pandue dans sensibles vs souris r&eacute;sistantes et (4) vers la fin de sc&egrave;ne propagation vers le cerveau. &Agrave; l&#39;aide de ce mod&egrave;le d&#39;alimentation naturel, nous avons montr&eacute; que le type d&#39;aliment, le temps du jour o&ugrave; l&#39;alimentation s&#39;est produite, et sexe de souris chaque touch&eacute; de susceptibilit&eacute; &agrave; l&#39;infection de L. monocytogenes. &Eacute;tudes de co-infection par L. monocytogenes souches qui expriment soit un ligand de haute affinit&eacute; pour la E-cadh&eacute;rine (InlA(m)), un ligand de faible affinit&eacute; (type sauvage InlA de Lm EGDe) ou aucun InlA (&Delta;inlA) a montr&eacute; que la InlA n&#39;&eacute;tait pas tenu d&#39;&eacute;tablir une infection intestinale chez les souris. Toutefois, l&#39;expression de InlA(m) a consid&eacute;rablement augment&eacute; bact&eacute;rienne persistance dans la lamina propria sous-jacente et de la diffusion am&eacute;lior&eacute;e vers les ganglions lymphatiques m&eacute;sent&eacute;riques. Ainsi, ces &eacute;tudes ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; un r&ocirc;le non d&eacute;finie auparavant pour l&#39;InlA en facilitant la diffusion syst&eacute;mique par le syst&egrave;me lymphatique apr&egrave;s l&#39;invasion de la muqueuse de l&#39;intestin.

InlA favorise la diffusion de Listeria monocytogenes dans les ganglions lymphatiques m&eacute;sent&eacute;riques au cours de l&#39;infection des souris d&#39;origine alimentaire.

Intestinale infezioni di Listeria monocytogenes non sono efficace nei topi, e questo &egrave; stato attribuito a un&#39;interazione di bassa affinit&agrave; tra la proteina di superficie batterica InlA ed E-caderina su cellule epiteliali intestinali murine. Precedenti studi utilizzando sia topi transgenici che esprimono umana E-caderina o mouse adattato L. monocytogenes che esprime una proteina di InlA modificata (InlA(m)) con alta affinit&agrave; per E-caderina ha mostrato maggiore efficienza di infezione intragastrico murino. Tuttavia, i grandi inoculi utilizzati in questi studi diffusi rapidamente, alla milza e fegato in un letale infezione sistemica che ha reso difficile definiscono il corso naturale dell&#39;infezione intestinale. Descriviamo qui un modello del mouse romanzo di listeriosi orale che imita molto attentamente tutte le fasi della malattia umana: (1) l&#39;ingestione di alimenti contaminati, (2) un distinto periodo di tempo durante il quale L. monocytogenes colonizzare solo l&#39;intestino, (3) diversi gradi di sistemica diffusa in sensibili vs topi resistenti e (4) tarda fase di diffusione al cervello. Utilizzando questo modello di alimentazione naturale, abbiamo dimostrato che il tipo di cibo, il tempo del giorno in cui alimentazione si &egrave; verificato, e genere del mouse ogni interessato suscettibilit&agrave; all&#39;infezione da L. monocytogenes. Gli studi di coinfezione utilizzando L. monocytogenes ceppi che esprime sia un ligando ad alta affinit&agrave; per E-caderina (no InlA, un ligando di bassa affinit&agrave; (wild type InlA da Lm EGDe) o InlA(m)) (&Delta;inlA) ha mostrato che InlA non era necessario stabilire infezione intestinale nei topi. Tuttavia, espressione di InlA(m) significativamente aumentata persistenza batterica nella sottostante lamina propria e notevolmente migliorata diffusione ai linfonodi mesenterici. Cos&igrave;, questi studi hanno rivelato un ruolo precedentemente atipiche per InlA nel facilitare la diffusione sistemica tramite il sistema linfatico dopo l&#39;invasione della mucosa intestinale.

Sarah E.F. D'Orazio

Department of Microbiology,
Immunology,
and Molecular Genetics,
Department of Microbiology, Immunology, and Molecular Genetics

university of kentucky

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Sarah E.F. D'Orazio

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Microbiology,Immunology,and Molecular Genetics,Department of Microbiology, Immunology, and Molecular Genetics

university of kentucky

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Department of Microbiology,
Immunology,
and Molecular Genetics,
Department of Microbiology, Immunology, and Molecular Genetics