紫外および可視 (紫外可視) 放射線の吸光度は、紫外可視分光計を使用して測定されます。紫外放射線を放射する重水素ランプと可視領域の放射線を生成するタングステンランプは、紫外可視分光計の光源として使用されます。モノクロメータまたはプリズムは、回折格子、つまり入射放射線を異なる波長に分割するために使用されます。スリットシステムを使用して、サンプルセルに目的の波長を集中させます。紫外可視分光計のサンプルは、液相である必要があります。したがって、固体有機化合物は、分析前に適切な溶媒に溶解する必要があります。次に、サンプルはキュベットと呼ばれるサンプルホルダーに配置されます。サンプルと使用される放射線に応じて、キュベットは石英結晶、ガラス、またはプラスチックで作られます。可視分光法では、ガラスまたはプラスチックのサンプルセルが使用されます。これは、それらのスペクトルカットオフが約 350nm であるためです。つまり、それらは可視光を効果的に透過しますが、紫外線を吸収します。紫外分光法では、紫外光を透過できるように、約 200nm のより低いカットオフを持つ石英セルを使用します。
溶媒も光を吸収するため、実際のサンプルを分析する前に、溶媒のみのサンプルブランクを使用します。紫外線分光法に適した溶媒を選択することは、正確な吸光度測定に不可欠です。水、95% エタノール、およびヘキサンは、紫外可視分光法で最も一般的に使用される溶媒です。適切な溶媒は、吸収帯の微細構造を取得するのにも役立ちます。非極性溶媒は、溶質と水素結合を形成しません。その結果、溶質の最終的なスペクトルは、微細構造が存在することが多い気相で観察されるスペクトルに類似します。対照的に、極性溶媒は溶質と水素結合を形成するため、吸収帯の微細構造は存在しません。
検出器としては通常、光電子増倍管、電荷結合素子、フォトダイオードまたはフォトダイオードアレイが使用されます。サンプルセルを通過する光の強度は I と呼ばれます。シングルビーム装置では、すべての光がサンプル セルを通過します。ダブル ビーム装置では、光は 2 つのビームに分割され、1 つのビームは参照として使用され、もう 1 つのビームはサンプルを通過します。最新のダイオードアレイ分光光度計では、フォトダイオード検出器を使用してスペクトル全体を一度に記録します。
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