光ルミネセンスは、その固有の感度と選択性により、幅広いアプリケーションを提供します。この技術では、分析物の直接分析と間接分析の両方が可能です。分析物が蛍光またはリン光に対して好ましい量子収率を示す場合、直接定量分析が可能です。ただし、分析物が蛍光またはリン光でない場合、または量子収率が好ましくない場合は、間接分析が実行可能な場合があります。間接的な方法には、分析物を試薬と反応させて蛍光生成物を形成するか、蛍光分子を含む溶液に分析物を加えたときの蛍光の減少を測定することが含まれます。
無機イオンは、UO_2^+ などのいくつかの例外を除き、一般に直接分析するには蛍光が不十分です。これらのイオンは、有機リガンドで分析して蛍光またはリン光金属リガンド複合体を形成できます。芳香族環を含む有機化合物は通常蛍光を発しますが、芳香族複素環はリン光になる傾向があります。有機分析物が天然の蛍光性または燐光性でない場合は、化学反応に組み込んで蛍光性または燐光性の生成物を生成することがあります。たとえば、クレアチンホスホキナーゼ酵素は、クレアチンホスホからクレアチンの形成を触媒することで測定できます。クレアチンホスホはその後ニンヒドリンと反応して構造不明の蛍光性生成物を生成します。
リン光法と蛍光法は相補的であり、強い蛍光を発する化合物は弱い燐光を示し、その逆も同様です。リン光測定法は、さまざまな有機種および生化学種の測定に使用されてきました。ただし、低温が必要であり、リン光測定の精度が一般に劣るため、蛍光測定法ほど普及していません。近年、室温で実行できる燐光測定法の開発に多大な努力が払われています。これには、分析物がろ紙やシリカゲルなどの固体支持体に結合されるか、ミセルまたはシクロデキストリン分子のコアに組み込まれる方法が含まれます。ほとんどの室温実験では、Tl(I)、Pb(II)、Ag(I)、ハロゲン化物イオンなどの重原子が項間交差を促進するために使用されます。
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