咀嚼昆虫にシロイヌナズナの抵抗をテストするための選択肢と無選択アッセイ

要約

咀嚼昆虫草食動物に植物の抵抗性は、いくつかの方法でテストすることができます。ここでは、選択肢と害虫種モンシロチョウに対する抵抗性を識別するために、モデル植物のシロイヌナズナと非選択の実験をセットアップする方法を示します。

要約

小さな白いモンシロチョウの幼虫は、農業の設定では害虫です。このキャタピラー種は、キャベツ、ブロッコリーなどの多くの作物を含むキャベツ家族の中で植物、、芽キャベツなどからフィード昆虫の飼育は、温室でキャベツの工場で行われます。少なくとも二つのケージは、モンシロチョウの飼育のために必要とされる。幼虫と大人が含まれているため、他の一つ、蝶。この害虫に抵抗性の植物ホルモンや有毒植物の化学物質の役割を調べるために、我々は2つ​​の実験を示しています。咀嚼昆虫モンシロチョウの抵抗で - ジャスモン酸の役割の最初の、決定（しばしば昆虫への抵抗に示されている植物ホルモンJA）。キャタピラー社の成長は、JAの生産に障害野生型および変異植物に比較することができます。幼虫を合成したり、JAで欠損している単一の植物に内在することを余儀なくされているため、この実験は、"選択の余地"とはみなされません。第二に、我々は産卵（産卵）の信号として使用されるグルコシノレート、の役割を調査する実験を示す。ここで、我々は、女性の蝶がどちらかの遺伝子型の植物に産卵することを選択することを許可される"選択"実験におけるグルコシノレートの生産に障害WTと変異体シロイヌナズナを使用してください。このビデオでは、アッセイと同様に代表的な結果の両方の実験のセットアップを示しています。

プロトコル

選択の余地の実験なし：

1. 慎重にプラスチックのカップに関心のシロイヌナズナ植物を囲みます。この場合は：COL - 0（WT）とJAの生産に障害変異体。あなたが葉の損傷を制限することを確認してください。そのために私はこの絵筆のバックを使用してください。
   
2. キャベツの植民地からの新鮮な孵化した幼虫を取るために微細な絵筆を使用してください。
   
3. シロイヌナズナの幼虫を静かに置きます。
   
4. 4日目、7日、10時の体重の幼虫。ヒント：（1幼虫は1工場での完全なライフサイクルを満たすことができる）栄養成長を高めるために（8時間の光）短日条件下で植物を育てる。

選択実験：

1. 二つの植物は、各遺伝子型のいずれかを選択されています。ベストは、このようなトレイの影響など、他の要因、などを制限するために、同じポットで植物を育てることです
   
2. バタフライケージに植物を置きます。
   
3. 肥沃な女性を選択してください。私は通常、積極的に飼育コロニーで産卵をされた女性をキャッチ。
   
4. 24時間の2つの植物の選択とケージにメスを離します。
   

ヒント1：学習の影響を排除するために、その後の選択肢のテストのために女性を再利用しないでください。

ヒント2：1つだけ同じような成長の表現型を有する植物を比較することができます。あるいは、三角フラスコの上に各遺伝子型から葉をマウントし、女性に自分の魅力を比較することができます。

をご覧ください植物学の年次レビューを昆虫草食にこのプロトコルと植物免疫の詳細については、。