Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace GC-MS

はじめに、薬用材料のフェレティマ、ペリプラネタアメリカーナ、ヒルドをハーブグラインダーで粉砕します。2番と4番の標準的な薬のふるいを通して薬用粉末をふるいにかけます。2つのふるいの間に粉末を収集して、必要なサンプル粉末を取得します。

50ミリリットルのプラスチック製遠沈管に1グラムの粉末を取ります。20ミリリットルの5%トリクロロ酢酸溶液を加え、高速分散ホモジナイザーで1, 000 RPMで1分間均質化する。均質化後、ホモジネートを1, 717 Gで室温で5分間遠心分離し、吸収性の綿に浸したガラス漏斗を通して上清を50ミリリットルのメスフラスコに濾過する。

15および10ミリリットルの5%トリクロロ酢酸溶液で抽出プロセスを2回繰り返した後、濾液を混合し、5%トリクロロ酢酸溶液で50ミリリットルに容量を構成します。次に、20ミリリットルのヘッドスペースバイアルに2ミリリットルの水酸化ナトリウム溶液と0.5グラムの固体パラフィンを正確に加えます。次に、摂氏70度のオーブンに約30分間入れます。

バイアルを取り出し、パラフィンが固まるように室温まで冷却します。サンプルヘッドスペースを処理するには、固化したパラフィン含有バイアルに各サンプル抽出溶液を2ミリリットル加えます。キャップを押してバイアルを密封します。

密封されたヘッドスペースバイアルをGCMSに置き、測定します。検量線を得るために、凝固パラフィン層の上に一連の2ミリリットルのトリメチルアミン標準溶液を吸引する。密封されたヘッドスペースバイアルをトリメチルアミン測定のために機械に置きます。

精密試験を行うには、固化したパラフィン層の上に2ミリリットルの0.1マイクログラム/ミリリットルのトリメチルアミン標準溶液を吸引します。製造元の指示に従って、マシンで6つの並列テストを実行します。回収率の実験では、前述のようにGCMSでトリエチルアミンが検出されなくなるまで、サンプル粉末のいくつかのバッチをオーブンで焼きます。

次に、オーブンで焼いた微粉末と微粉末をそれぞれ50ミリリットルのプラスチック製遠心管に入れます。すべてのチューブに50マイクロリットルのトリメチルアミン標準溶液を加え、前述のように5%トリクロロ酢酸溶液で抽出します。トリメチルアミンの保持時間は2.3分で、ピークが鋭く、他の不純物からの干渉がないことがわかりました。

Pheretima, Periplaneta americana, Hirudo試料をハーブ中のトリエチルアミンを減少させるために乾燥によるスパイク回収試験を行ったところ,それぞれ平均回収率が84.49%,94.66%,85.67%であった。トリエチルアミンは、キログラムあたり13.23〜271.63ミリグラムの範囲の濃度のハーブの9つのバッチで検出されました。