まず、外科用ハサミを使用した拡散技術を使用して、調達した豚の肺の気道を注意深く露出させます。まず、通常2〜4センチメートルの直径を持つ最大の気道を見つけます。次に、鉗子を使用して、気道の長さを1インチの深さまで触診します。
最後に、外科用ハサミを気道と平行に持ち、閉じた先端を見えない気道を囲む組織に挿入します。外科用はさみをそっと開いて、周囲の膜を引き離します。はさみを取り出し、ティッシュを切らないでください。
このプロセスを断続的に繰り返して、気道を露出させ続けます。外科用ハサミを使用して、分岐点で気道を切断し、いずれかの枝に沿って独立して解剖します。気道の切断領域は、無傷の端が確実であると確信すると、識別可能なままであり、簡単に見つけることができます。
切断された領域のサイズが1〜5センチメートルの範囲で、気道の木に沿った相対的な位置に基づいて幅が変化するように、気道の切断領域を対応するチューブに配置します。血管系にそっと圧力を加えて露出させ、ゆっくりと気道から引き離します。血管系をわずかに伸ばし、外科用ハサミを使用して気道からさらに分離します。
血管系を引き裂く可能性があるため、過度の圧力をかけることは避けてください。血管樹の分岐点が露出したら、分岐点のすぐ下、2つの対応する血管系領域の間に外科用ハサミの閉じた先端を挿入します。次に、はさみをゆっくりと開いて、下にある組織を広げます。
一対のピンセットを断続的に使用して、広げられた組織および血管系を直接囲む他の組織を除去する。血管系が気道の領域を覆う場合、または解剖ステップが面倒になる場合は、分岐点で血管系を切断します。その後、いずれかの枝に沿って独立して解剖します。
血管系の両端が識別可能なままであり、さらなる解剖のために簡単に配置できることを確認します。次に、血管系の領域を切断します。肺胞組織を切除するには、気道または血管系の近くにない組織の領域を見つけます。
血管系または気道がないように見える組織の小さな領域をつまんで、つまんだ組織を肺から引き裂きます。肺胞組織は肺に広く存在し、解剖全体で除去する必要があります。摘出した組織の領域を観察し、肺胞組織であるかどうかを確認します。
この手順をヒト肺モデルに適用した。切除された組織の質量分析は、ECM組成が、肺全ECM、肺胞濃縮ECM、気道ECM、および血管系ECMを含む脱細胞化肺の個々の領域間で異なることを示しました。肺疾患の既往歴のない患者から得られた脱細胞化肺では、肺胞濃縮ECMで基底膜関連タンパク質が増加しました。
同時に、気道ECMは、アグリカンなどの軟骨関連ECMタンパク質に富化されていた。血管系ECMは、フィブロネクチンおよび血管に関連する他の可溶性ECMタンパク質で増強された。
