Intracerebroventricular Injection in Mice

まず、作業台にクリーンベンチパッドまたはドレープ素材を置きます。イソフルラン気化器のノーズコーンを表面にテープで固定し、実験者の反対側を向くようにします。長さ10mm、27ゲージの針を45度の斜めに5マイクロリットルのガラスシリンジに取り付けます。

針にシラストチューブを追加し、先端の3.5ミリメートルが突き出るようにし、チューブを実験用テープでシリンジ本体に固定します。次に、最初に必要以上に吸引し、次に3マイクロリットルだけが残るまで余分なものを排出することにより、3マイクロリットルの注入媒体をガラスシリンジに引き込みます。ラボタイマーをカウントアップモードで起動し、注入中に見やすいように配置します。

針を横方向と尾側に動かす練習をした後、麻酔をかけたマウスを注射部位をヨウ素で洗浄し、次にアルコールで3回洗浄します。18ゲージの針を使用して注射部位を特定し、開頭部位に通します。マウスを注射するには、まず、利き手ではない方の手でマウスの頭をしっかりと持ちます。

ヘッドを作業台に平らに配置します。次に、ガラス注射器の針を頭蓋骨の穴に通し、チューブがマウスの皮膚に当たるまで入れます。シリンジを冠状面と矢状面に垂直に保持し、1分かけてゆっくりと培地を注入します。

シリンジとニードルをさらに1分間保持して、逆流を最小限に抑えます。次に、針をゆっくりと引っ込めます。マウスをノーズコーンから取り外します。

滅菌ガーゼを使用して注射部位から血液をきれいにし、マウスをケージウォーマーのケージに入れて、目を覚ますまで置きます。ガス麻酔への短時間の曝露と心室系への3マイクロリットルの液体の注入だけでは、拍動性黄体形成ホルモンの分泌は変化しませんでした。.注射路は神経組織に見え、側脳室と交差していた。