脱細胞化脾臓マトリックスの調製のためのラット脾臓収穫

まず、麻酔をかけた剃毛ラットを手術台の上で仰臥位に置きます。全身抗凝固のために、2ミリリットルのヘパリン化生理食塩水を陰茎背静脈に注入します。剃った腹部の皮膚をポビドンヨウ素溶液で消毒し、滅菌ドレープ布で覆います。.

手術用ハサミで、腹部に十字形の切開を行います。止血鉗子で腹腔を伸ばし、肝臓を横隔膜に向かってひっくり返し、胃腸管を腹部の右側に外に出し、湿ったガーゼで覆います。脾胃靭帯を慎重に分離して切断し、脾孔を露出させます。

脾の門に沿って徐々に解剖して、総肝動脈、胃十二指腸動脈、脾動脈を分離して露出させます。胃十二指腸動脈と総肝動脈を結紮して切断し、周囲の組織を徐々に解離させます。脾臓を右側にひっくり返して、腹部大動脈を露出させます。

綿棒で鈍的解剖を行い、腹部大動脈と腹腔幹を露出させます。腹腔幹の枝の上下に長さ約3センチの3-0シルク縫合糸を置きます。次に、腹腔幹の枝に長さ10センチの6-0シルク縫合糸を配置します。

腹腔幹の枝の下と上の腹部大動脈を結紮します。次に、動脈枝を小さく切開します。6-0シルク縫合糸をそっと持ち上げ、24ゲージの静脈カテーテルを腹腔幹に沿って脾動脈に挿入します。

カテーテルを結紮して所定の位置に固定します。シリンジポンプを使用して、50ミリリットルのヘパリン処理された生理食塩水を毎分4ミリリットルの速度で注入します。同時に、注入された液体が脾臓から流出するように、流出チャネルとして門脈を切断します。

脾臓の周囲の組織を注意深く解剖し、主要な付属血管を維持しながら膵臓の損傷を回避します。脾臓の周囲に漏れがないか確認してください。次に、脾臓と膵臓を取り除き、生理食塩水ですすいでください。

脾臓を生理食塩水で満たされた50ミリリットルの遠心分離管に移します。そして、摂氏80度の冷凍庫に保管します。