高密度微小電極アレイ(HD-MEA)上でのヒト人工多能性幹細胞(iPS細胞)のin vitro培養

まず、HD-MEAチップを取り上げます。96%エタノールで湿らせたティッシュでガラスリングでチップを拭きます。各デバイスをフードの下の滅菌ペトリ皿に入れ、MEAリザーバーに70%エタノールを入れます。

エタノールを吸引した後、リザーバーを滅菌、ろ過、二重蒸留水で3回洗浄します。1ミリリットルのプレコンディショニング培地を加え、一晩インキュベートします。翌日、デバイスからプレコンディショニングメディアを取り出します。

各デバイスのアクティブ領域を1ミリリットルのPDLOでコーティングします。翌日、デバイスからPDLOを吸引します。デバイスを二重蒸留水で3回洗浄し、フードの下で乾かします。

35 x 10 mmのシャーレに滅菌、ろ過、二重蒸留水を入れ、チップの横に置きます。予熱した培地を使用して、細胞懸濁液をチップの活性領域の表面にピペットで移します。チップを5%の二酸化炭素を含む環境で摂氏37度でインキュベートします。

45分後、室温に温めた2ミリリットルの培地をHD-MEAリザーバーに静かに加えます。チップを摂氏37度で5%の二酸化炭素でインキュベートします。