まず、線維芽細胞培地と膣上皮培地をそれぞれ50ミリリットルずつ、別々の50ミリリットルの円錐管に入れます。温めた媒体を無菌真空下で5分間脱気します。次に、動的フローモジュール用のCaviCideとエタノールでクリーンなトレイを消毒します。
ポッドをパッケージから取り出し、ダイナミックフローモジュールトレイに置きます。脱気した2ミリリットルの膣上皮培地を頂端入口リザーバーにピペットで入れます。そして、3ミリリットルの脱気線維芽細胞培地を基底入口リザーバーに加える。
500マイクロリットルの脱気膣上皮培地を頂端出口リザーバーにピペットし、500マイクロリットルの脱気線維芽細胞培地を基底出口リザーバーにピペットで移します。ポッドを含むトレイをダイナミックフローモジュールにスライドさせます。次に、プライムサイクルを2回実行します。
4回のプライムサイクル後に液滴が形成されない場合は、ポッドの出口リザーバー内のポートに直接接触させます。それぞれの培地を200マイクロリットルピペットでピペットして、培地がチャネル内のリザーバー間を流れるようにして、ポッドを手でプライミングします。次に、ヒト子宮線維芽細胞播種臓器チップからピペットチップを取り外します。
各チップのすべてのポートにそれぞれの培地の液滴を置きます。チップをポッドにスライドさせ、ポッドをトレイに置きます。チップの表面にあるメディアを吸引し、各トレイをダイナミックフローモジュールにスライドさせます。
次に、モジュールで、上部と下部を液体として、頂端の流れを毎時15マイクロリットルに、基礎の流れを毎時30マイクロリットルに、ストレッチを0%に、周波数をゼロヘルツに設定します。モジュールで調整サイクルを実行し、一晩流れます。分化後に徐々に複数の細胞層を形成する膣上皮細胞の連続シートが臓器チップデバイス上で観察されました。
