ヒト人工多能性幹細胞(hiPSC)の培養のためのプレート調製

まず、準備した25ミリリットルの冷たく高度なDMEM / F-12メディアが入ったチューブを氷の上に置きます。解凍したマトリックスを各チューブに追加します。懸濁液を混ぜ合わせ、塊が形成されないようにします。

次に、希釈したマトリックスの250マイクロリットルを24ウェルプレートの各ウェルにピペットで移します。プレートを傾けて、コーティング溶液を均等に広げます。インキュベーション後、血清ピペットを使用して、コーティングされた表面を傷つけずに余分な溶液を穏やかに除去します。

すぐに250マイクロリットルの温かい完全幹細胞培地を各ウェルにピペットで入れます。組織培養プレートをMatrix 4キセノールフリーハイドロゲルでコーティングするには、まずハイドロゲルを室温まで温めます。1容量の3x Stem Cells培地が入ったチューブに、2容量のハイドロゲルを加えます。

溶液を上下にピペットで動かして、完全に混合します。250マイクロリットルのヒドロゲルを24ウェル組織培養プレートのウェルに移します。次に、プレートを傾けてハイドロゲルを均等に広げます。

10〜15分後、コーティングされたプレートは、人工多能性幹細胞の培養の準備が整います。