自動微生物同定および抗菌剤感受性試験システム(aMIAST)を使用した細菌同定のための直接接種プロトコル(DIP)

まず、クラス2Aのバイオセーフティキャビネット内に70%イソプロピルアルコールを含む単形グラム陰性菌を含む自動血液培養ボトルの中隔を綿棒で拭きます。5ミリリットルの血液ブロス混合物を、21ゲージの針を備えた滅菌注射器に引き込みます。次に、ゴムセパレーターチューブのゴムセプタムを消毒します。

血液ブロス混合物をチューブに移します。サンプルを160 Gで10分間遠心分離します。次に、バイオセーフティキャビネット内の上清を慎重にピペットで取り出します。

上清を新しい単純な採血バイアルに移します。.キャップをしたバイアルを2000 Gの遠心分離機に10分間入れます。次に、滅菌ピペットで上清を吸引します。

次に、3ミリリットルの滅菌生理食塩水をディスペンサーボトル付きのaMIASTチューブに分注します。滅菌接種ループを使用して、バイアルの底から細菌ペレットを取り出し、aMIASTチューブに接種します。滅菌生理食塩水と濃度計を使用して、懸濁液の濁度を0.47〜0.63に調整します。

次に、グラム陰性aMIAST識別カードの毛細血管アタッチメントを最初のチューブに入れます。.選択したカードをカセットに適切に配置します。次に、サンプルバーコードを内側に向けて、カセットをフィラーチャンバー内の所定の位置にロードします。

ドアを閉め、ユーザーインターフェイス画面のフィルを押します。充填サイクルが完了すると、システムの青いインジケーターライトが点滅します。次に、カセットを充填チャンバーからローディングチャンバーに移します。

装填が完了したら、カセットのくずを取り除きます。CLED寒天上のチューブに残った懸濁液を継代培養し、分離株の純度を確認します。直接接種プロトコルを使用して同定された7つの陽性血液培養ボトルの結果は、種レベルまで一致しませんでした。

標準的な接種プロトコルによって同定された 105 の RAST 報告可能なグラム陰性のうち、98 は直接接種プロトコルによって正しく同定されました。99の非RAST報告用グラム陰性のうち、RAST報告用グラム陰性は4つの陽性血液培養ボトルで同定されました。