フィジーを用いたマルチコンパートメント(MC)デバイスにおける背根神経節神経突起成長の定量化

マルチコンパートメントデバイスで培養した後根神経節をイメージングした後、Image Jを起動して画像ファイルを開きます。Shift キーと C キーのショートカットを使用してコントラストを強化し、最小の神経突起を表示するには、明るさとコントラスト オプションを開きます。明るさとコントラストのスライダーを調整して、神経突起を視覚化します。

次に、[適用]をクリックします。次に、[Plugins] に移動し、[Segmentation] を選択し、[Simple Neurite Tracer] をクリックして神経突起トレーサーを開きます。次に、後根神経節本体の神経突起の一方の端をクリックして新しいトレースを開始し、神経突起が完全にトレースされるまで神経突起に沿ってポイントを追加し続けます。

次に、[完全なパス]をクリックします。フィジーの直線ツールを使用して、線の端を離さずにスケールバーと同じ長さの線を引きます。そして、ツールバーの下にある長さの値に注意してください。

神経突起の長さを実数単位に変換するようにスケールを設定し、結果をExcelにコピーします。次に、Excelで長さを実際の単位に変換します。次に、後根神経節の両側から伸びる6本の長い神経突起の長さを測定し、後根神経節の平均の長さと標準偏差を計算します。

27日目と21日目には、それぞれマルチコンパートメントとプレーンゲルに神経突起がしっかりと成長しました。マルチコンパートメントデバイス内の神経突起の平均長さは、対照平面ゲルの神経突起の長さに匹敵しました。