マウスサンプル中のミトコンドリア呼吸を測定するための高分解能呼吸測定器のキャリブレーション

まず、高解像度呼吸計と真空システムをオンにします。ストッパーを取り外し、真空システムを使用して、70%エタノール貯蔵溶液を取り出します。チャンバーに超高純度の分子グレードの水を補充します。

最終洗浄後、クレアチンまたはブレビスタチンを含まない MiRO5 を 2 ミリリットル各チャンバーに加えます。呼吸器測定ソフトウェアを開きます。ポップアップボックスで、チャンバースターラーの速度を750rpm、温度を摂氏37度、データ記録間隔を2秒に設定します。

酸素センサーのゲインを1に、分極電圧を800ミリボルトに設定します。「Oxygraph に接続」をクリックして、装置との通信を確立します。プロンプトが表示されたら、現在のデータとキャリブレーションを含む実験ファイルに名前を付けて保存します。

酸素濃度を少なくとも30分間記録して、チャンバーをウォームアップし、空気校正のための信号を記録するようにします。キャリブレーションの最後に、Shiftキーとマウスの左ボタンを押したまま、タイムライン上の領域をドラッグして、安定した酸素濃度領域をマークします。[Oxygraph] に移動し、続いて [Oxygen Calibration] に移動します。

空気校正の場合は、安定した酸素濃度マークを選択し、[校正してクリップボードにコピー]をクリックします。エアキャリブレーションの記録を停止し、ファイルを保存します。