マウスにおける間接外傷性視神経障害(ITON)の誘発のための過圧空気供給

まず、つま先のつま先つまみに対する反応がないことを評価することにより、マウスの麻酔を確認します。マウスを内側のアニマルホルダーに固定し、頭と上部の後肩を長方形の開口部から露出させ、背肢と下肢をシールドしたままにします。マウスを固定するために、後肩の上部にサージカルテープを貼ります。

内側のアニマルホルダーを外側のホルダーに挿入します。アニマルホルダー内の二次麻酔ラインを開いた後、実験中に麻酔薬がチューブから漏れたり、マウスが動かなくなったりしないように、ホルダーの端を密閉します。外側の動物ホルダーの4mmの円形開口部をマウスの左目の真上に合わせます。

コントロールノブを使用して、アニマルホルダーをXYテーブルに配置し、その開口部がペイントボールガンの銃身と揃い、外面が銃身の端から5ミリメートルになるようにします。キャリブレーション後、過圧エアシーケンスを開始して、0.5秒間隔で15PSIのバーストを2回供給します。偽のグループマウスの場合は、動物ホルダーをバレルから遠ざけ、段ボールのシールドで空気を遮断し、過圧空気のノイズにさらします。

偽のグループでは、健康で密集した軸索が観察されました。対照的に、ITONグループは、軸索形状の不規則性やミエリン鞘の破壊など、軸索変性の兆候を示しました。ITON群では、偽軸群と比較して軸索の総数が有意に減少しました。

変性プロファイルの有意な増加は、偽グループと比較してITONグループで検出されました。ITONマウスの網膜ではミクログリアの増殖の増加が観察され、ミクログリアは外側の核層に広がっていました。ミクログリアが典型的な網膜層にとどまっていた偽のグループと比較されます。

桿体双極細胞と光受容体との間の無傷のシナプス結合は、ITONマウスと偽マウスの両方で認められ、シナプス障害は検出されませんでした。