私たちは、プラスチックに埋め込まステントを区画に優れた技術支援のために夫人アンジェラフロイントに感謝します。私たちは、免疫組織化学染色との専門家の助けにも夫人ロヤソルタン夫妻アンジェラフロイントに感謝します。

1。ステントの準備と注入<ol><li>ステントストラット（フォートウェイン金属、キャッスル、アイルランド）編組し、次いで繊維技術と機械工学研究所、ドイツのアーヘン工科大学（ 図1A）で希望のサイズにカット。 </li><li>注入前に、ステントは、鉗子を使用して、2つのセンチメートルシリコンチューブに転送する必要があり、一つの末端で2ミリ置かれ、前端（ 図1A）と呼ぶ。 </li><li>フロントエンドは、移植のための鋭い先端を確実にするために、斜めにカットする必要がある。 </li><li>移植の前に、ステントが滑りを確実にするために、豊富に骨抜きにする必要があります。 </li></ol> 2。ステント移植<ol><li> 10〜12週齢のオスのC57BL / 6野生型マウス、25〜27グラ​​ムは100 mg / kgでケタミンおよび10 mg / kgをキシラジンの腹腔内注射を用いて麻酔する。適切な麻酔は、反射の欠如によって手術前に確認されていると髭の動き。麻酔下ながら乾燥を防止するために、マウスの眼をbepantheneクリームの膜で覆われている。 </li><li>シェービングと腹側頸部領域の適切な消毒した後、1cmの正中小さな切開鋏を用いて、実体顕微鏡下で行われる。無菌の湾曲したピンセットで2脂肪体を分離した後、左総頸動脈は気管と共に脈打つ見ることができます。 </li><li> 1左総頸動脈のCMと分岐は自由に準備する必要があります。 5/0絹糸を使用して1ノットは、左総頸動脈の周りにバインドされ、7/0絹糸を使用して2ノットが左外頸動脈の周りにバインドされ、7/0絹糸を使用して1ノットは、バインドされます内頸動脈の周囲（ 図1B）。 </li><li>血流は、その後しっかりと同様に、サラウンド結び目を引っ張って内頸動脈および近位外頸動脈に結び目を結合することによって中断された総頸動脈をING。容器は共通と外頸動脈が直線になっていることの方法で修正する必要があります。 </li><li>外頚動脈における小さな切開をVannasはさみを使用して、近位結び目の近くに、行われる。ステントを含むシリコンチューブは、ガイドワイヤを用いて、前方の鋭い端を、外頸動脈に導入される。ステントが所望の位置に達した後、シリコンチューブをガイドワイヤ上に引き戻され、ステント（ 図1B）の形状記憶の拡張を可能にする。 </li><li>外頸動脈に遠結び目は、それによって血流を回復、切開内部および総頸動脈でノットのサイトが削除されているクローズする強固に結合されています。 </li><li>皮膚切開は3-4ミシェルの縫合クリップとミシェル鉗子を使用して閉じている。マウスが完全に回復するまで、赤色光の下に置かれている。鎮痛処置は必要ありません。 </li><li>ザプラークは1-3週間後に分析することができます。再内皮化を研究するために、以前のエンド時点が必要である（3-4日）。我々は、特に小型化ステントbiofunctionalizeする特定のコーティングの使用により、4週間この外科的介入後のことをステント移植の我々のモデルで観察された、血管新生は、試料の約30％で発生します。これは、異なるメカニズムと別の病理学的問題を表すと、改造と再生プロセスの後ろ足です。ステント留置後3週間の終了時点では血管新生の発症により誘発される再生効果と混同しないことが有益であろうこれらの副作用のメカニズムの新生内膜形成、ステント内狭窄および/または分析に集中する。 </li></ol> 3。プラーク形成の分析<ol><li>エンド時点で、動物は100 mg / kgでケタミンおよび10 mg / kgをキシラジンの腹腔内注射を用いて麻酔する。適切な麻酔は、反射神経と髭の動きの欠如によって手術前に確認された。 </li><li>動物は、心臓内放血によって殺されている。血清、血液、さらなる分析のために回収される。 </li><li>胸腔を開いて、PBS 4％パラホルムアルデヒド（PFA）溶液で心臓内穿刺、ボディ灌流を介して洗浄した後、5分間行われる。ステントを含む左頸動脈を直接、4％PFA溶液中に配置され、少なくとも16時間後にプラスチックembbeded、解剖されています。 </li><li> 50μmの厚さの切片を、ダイヤモンドソーバンドを使用してプラスチック包埋サンプルから実行されます。 </li><li>プラークサイズを測定するために、ギムザ染色が行われる。 </li><li>血管のステント領域内に再内皮化の速度を分析するために、フォン·ウィルブランド因子（vWF）のための免疫組織化学を行う。 </li></ol>

<ol>
	<li>Ross, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+to+injury+and+atherogenesis.">Response to injury and atherogenesis.</a> Am. J. Pathol. 86, 675-684 (1977).</li><li>Virmani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+the+vulnerable+plaque.">Pathology of the vulnerable plaque.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 47, 13-18 (2006).</li><li>Farb, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+acute+and+chronic+coronary+stenting+in+humans.">Pathology of acute and chronic coronary stenting in humans.</a> Circulation. 99, 44-52 (1999).</li><li>Weber, C., Noels, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerosis:+current+pathogenesis+and+therapeutic+options.">Atherosclerosis: current pathogenesis and therapeutic options.</a> Nat. Med. 17, 1410-1422 (2011).</li><li>Lenzen, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+and+outcome+of+patients+with+established+coronary+artery+disease:+the+Euro+Heart+Survey+on+coronary+revascularization.">Management and outcome of patients with established coronary artery disease: the Euro Heart Survey on coronary revascularization.</a> Eur. Heart J. 26, 1169-1179 (2005).</li><li>Babapulle, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hierarchical+Bayesian+meta-analysis+of+randomised+clinical+trials+of+drug-eluting+stents.">A hierarchical Bayesian meta-analysis of randomised clinical trials of drug-eluting stents.</a> Lancet. 364, 583-591 (2004).</li><li>Wiviott, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+oral+antiplatelet+therapy+for+reduction+of+ischaemic+events+including+stent+thrombosis+in+patients+with+acute+coronary+syndromes+treated+with+percutaneous+coronary+intervention+and+stenting+in+the+TRITON-TIMI+38+trial:+a+subanalysis+of+a+randomised+trial.">Intensive oral antiplatelet therapy for reduction of ischaemic events including stent thrombosis in patients with acute coronary syndromes treated with percutaneous coronary intervention and stenting in the TRITON-TIMI 38 trial: a subanalysis of a randomised trial.</a> Lancet. 371, 1353-1363 (2008).</li><li>van Werkum, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+coronary+stent+thrombosis:+the+Dutch+Stent+Thrombosis+Registry.">Predictors of coronary stent thrombosis: the Dutch Stent Thrombosis Registry.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 53, 1399-1409 (2009).</li><li>Finn, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+responses+to+drug+eluting+stents:+importance+of+delayed+healing.">Vascular responses to drug eluting stents: importance of delayed healing.</a> Arterioscler. Thromb Vasc. Biol. 27, 1500-1510 (2007).</li><li>Joner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+drug-eluting+stents+in+humans:+delayed+healing+and+late+thrombotic+risk.">Pathology of drug-eluting stents in humans: delayed healing and late thrombotic risk.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 48, 193-202 (2006).</li><li>Cines, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cells+in+physiology+and+in+the+pathophysiology+of+vascular+disorders.">Endothelial cells in physiology and in the pathophysiology of vascular disorders.</a> Blood. 91, 3527-3561 (1998).</li><li>Hristov, M., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells:+characterization,+pathophysiology,+and+possible+clinical+relevance.">Endothelial progenitor cells: characterization, pathophysiology, and possible clinical relevance.</a> J. Cell Mol. Med. 8, 498-508 (2004).</li><li>Rabelink, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells:+more+than+an+inflammatory+response?.">Endothelial progenitor cells: more than an inflammatory response?.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 24, 834-838 (2004).</li><li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+evaluation+of+drug-eluting+stents+for+peripheral+applications:+recommendations+from+an+expert+consensus+group.">Preclinical evaluation of drug-eluting stents for peripheral applications: recommendations from an expert consensus group.</a> Circulation. 110, 2498-2505 (2004).</li><li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+neointimal+response+to+coronary+artery+injury+in+pigs+and+dogs.+Implications+for+restenosis+models.">Differential neointimal response to coronary artery injury in pigs and dogs. Implications for restenosis models.</a> Arterioscler. Thromb. 14, 395-400 (1994).</li><li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restenosis+and+the+proportional+neointimal+response+to+coronary+artery+injury:+results+in+a+porcine+model.">Restenosis and the proportional neointimal response to coronary artery injury: results in a porcine model.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 19, 267-274 (1992).</li><li>Ali, Z. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+in-stent+stenosis+in+ApoE+knockout+mice:+insights+from+a+novel+mouse+model+of+balloon+angioplasty+and+stenting.">Increased in-stent stenosis in ApoE knockout mice: insights from a novel mouse model of balloon angioplasty and stenting.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 27, 833-840 (2007).</li><li>Chamberlain, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+of+in+situ+stenting.">A novel mouse model of in situ stenting.</a> Cardiovasc. Res. 85, 38-44 (2010).</li><li>Rodriguez-Menocal, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+of+in-stent+restenosis.">A novel mouse model of in-stent restenosis.</a> Atherosclerosis. 209, 359-366 (2010).</li><li>Costa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Covalent+immobilization+of+antimicrobial+peptides+(AMPs)+onto+biomaterial+surfaces.">Covalent immobilization of antimicrobial peptides (AMPs) onto biomaterial surfaces.</a> Acta Biomaterialia. 7, 1431-1440 (2011).</li><li>Soehnlein, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil-derived+cathelicidin+protects+from+neointimal+hyperplasia.">Neutrophil-derived cathelicidin protects from neointimal hyperplasia.</a> Science Translational Medicine. 3, 103ra198 (2011).</li></ol>

利害の衝突は宣言されていない。

ステント内血栓症及び再狭窄のリスクを軽減し、薬剤溶出性ステントのための新しいコーティングの開発を維持するために、動物モデルにおけるステント移植を容易、簡単かつアクセス可能な方法が必要とされている。マウスは、ステント留置、そのような薬剤の効率後動脈リモデリングの複雑なメカニズムを研究するための理想的なシステムを提供します。マウスにおけるステント内再狭窄のための既存のモデルは困難であり、高い外科的スキルを必要とし、出血や麻痺17-19などの合併症の高いリスクを暗示する。例えば、血管のバルーン拡張後、レシピエントマウス17の頸動脈にステントセグメントの移植後のドナーマウスの胸部大動脈へのステント移植モデルにおいて、病態のメカニズムの研究ではありません唯一のドナー材料に受信者の反応によってだけでなく、栄養血管と外膜の大規模な損傷によって影響を与えた。ステンレスのsteeの移植バルーン拡張19後直接腹部大動脈へリットルステントがあるため動脈切開のサイト上で腹部大動脈から血栓症や出血後の後肢麻痺の高い死亡率（35％）が続いている。螺旋状の大腿動脈18を介して、腹部大動脈にニチノールステント自己拡張の移植は、盲目的に正しい位置にステントを配置する大動脈に大腿動脈から分岐に沿ってステントを演出する主に起因する高い手術のスキルを必要とします。この手順は、高い大腿神経を損傷する危険したがって、後肢の麻痺が続く。これらの手順と比較して、マウスでのステント移植の我々のモデルは、高い手術のスキルを必要としません。 我々のモデルは、動脈の改造上の異なる薬剤コーティングの効果を分析するために、シンプルで簡単で効率的な方法を提供して、ステントの配置は視界の下で行われ、損傷神経または他の構造のないリスクが存在していません。 COMプレックスは分子メカニズムは、容器の直接アクセスのみならず、マウス頸動脈ステント留置術の我々のモデルで簡単に調べただけでなく、別のノックアウトマウス株の存在に起因することができます。 つの制限として、臨床手順と比較して、我々のモデルは健康なマウス/動脈を使用し、既存のプラーク（いないステント内再狭窄が、ステント内狭窄）にステント留置は実行されません。また、ステント移植前にバルーン拡張を実行しないでください。ただし、両方のモデルで血管壁の大規模な損傷に起因し、reparatoryプロセスが似ています。残念なことに、金属由来のアーチファクトに起因する、新内膜の増殖のin vivoモニタリングにおける超音波またはコンピュータ断層撮影のような既存の撮像方法では不可能である。別の制限要因は、金属加工のいくつかの専門知識を必要とする金属系ステントの薄い切片です。 この方法を用いて、我々はなかったLL-37で被覆された好中球指示biofunctionalized小型化されたニチノール·ステントは介入療法の21の後に血管の治癒を促進するための新しい概念を提供し、再狭窄、ステントに減らすこと。、表示することができこれらの制限にもかかわらず、このモデルは、と思われる今まで、最も適したシステム、それによって、お金と時間の節約には、ステントと動脈の改造中に分子事象への影響のための新しい薬剤コーティングを調査する。さらに、このモデルは容易にすべての治療仮説が不快と予期しない影響を避けるために、より大きな動物又はヒトに適用する前に検証することができるように、ヒトに、より類似しているハムスター、に適合させることができる。

アテローム性動脈硬化症の進行によって生じる心血管疾患は、先進国における死亡の主要な原因である。アテローム性動脈硬化症、冠状動脈を通る血流に影響を与え、血管の内腔に拡張されたプラークの形成をもたらす、内皮損傷1〜血管壁の焦点距離、炎症性線維増殖性応答である。炎症を起こした歯垢2の薄い線維性被膜の破裂から心筋梗塞結果の75％以上。この合併症は、致命的なことができるので、ステント留置と経皮経管（冠動脈）形成術（PTCA）は、現在の医療行為における第一選択の治療となりました。方法は狭く冠状動脈の拡張、したがって、血流の回復を可能にします。同時に、それは内皮および血管壁3に程度の傷害を引き起こす。しかし、この治療の長期的な効果が過大動脈remodeによって制限される玲と再狭窄4。 ステントの雇用により、PTCAは、急性血管閉鎖5の後に血行再建を可能にし、複雑な病変の治療において、より効果的になりました。この方法は、10％未満6〜ステント内再狭窄の発生率を減少させる。これらの利点の横に、冠動脈血行再建術のためにこの第一選択治療はまた、ステント内血栓症と再狭窄の生命を脅かすリスクを負いません。 ステント内血栓症は、血小板および損傷部位にフィブリンの大量付着続い容器の脱内皮化、によって引き起こされる。患者の26％は、ステント内血栓症や心筋梗塞7の63％ダイ苦しむ。再狭窄は、血管平滑筋細胞（VSMC）、細胞外マトリックス（ECM）の堆積、およびリモデリングの新生内膜過形成（移動および増殖を含む、血管壁に対する機械的損傷後の創傷治癒の過程を指し容器の。多くの場合、侵襲的な再介入はステント内血栓症と再狭窄に起因する深刻な狭めるアテローム性動脈硬化の血管を拡張したことが必要になる。 ステント内血栓症を防止するために、抗血栓薬との長期的な治療が必要である8。再狭窄、数ヶ月のためのポリマーコーティングからの薬物溶出ステント、新世代のような免疫抑制剤（ 例えば 、シロリムス、エベロリムス、ゾタロリムス）と抗がん剤などの溶出抗増殖剤（ 例えばパクリタキセル）9,10を防ぐために。これらの薬は新生内膜形成および再狭窄を減少させていますが、彼らが阻害再内皮によるステント内血栓症のリスクが高いを維持します。 動脈損傷後、内皮区画の維持が血栓性合併症を防止することが重要である。生理的条件下では、人間の内皮は、小さな回転率11を示しています。病理下ogical条件は、しかし、内皮の整合性が成熟内皮細胞を包囲し、内皮前駆細胞（EPCは）を循環させることにより迅速な回復が12,13必要とされるように、損なわれる。 大型動物で14-16またはマウス大動脈動脈におけるこれらの複雑な分子機構の研究は限られたデータ17-19を提供し、非常に難しい手順です。ステント内血栓症と再狭窄の新モデルを削減する新たなステントコーティングの効率をテストするには不可欠である。 ニチノールがあるため、正常臨床使用におけるベアメタルステントとして使用されているその &quot;高弾性、形状記憶効果と患者に良い耐性のステントのための理想的なプラットフォームを表します。この合金は20を塗布し、マウスの頸動脈に注入することができるが500μm、外径を小型化するステントを作成することが可能となる。マウスcに対する小型化ニチノールステントの開発arotid動脈は、ステント移植によって誘導される正確な分子メカニズムの研究を可能にし、再狭窄を防ぐために、迅速かつ効率的に異なる薬物被覆の効果をテストする可能性を提供する。さらに、異なるノックアウトマウス株の存在が新生内膜の成長とステント内血栓症に関与して異なる分子の役割を明確に巨大な優位性を表しています。

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nitinol-stents (self-made from nitinol-struts)</td>
			<td>Fort Wayne Metals, Castlebar, Ireland NiTi#1, superelastic, straight annealed, light oxide, diameter 500 &mu;m</td>
			<td>custom-made product</td>
			<td>Institute for Textile Technology and Mechanical Engineering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicon tube</td>
			<td>IFK Isofluor, Germany</td>
			<td>custom-made product</td>
			<td>diameter 500 &mu;m, section thickness 100 &mu;m, polytetrafluorethylene catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZ/X9</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps</td>
			<td>FST, Germany</td>
			<td>91197-00</td>
			<td>standard tip curved 0.17 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine 10%</td>
			<td>CEVA, Germany</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine 2%</td>
			<td>Medistar, Germany</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthene</td>
			<td>Bayer, Germany</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>FST, Germany</td>
			<td>91460-11</td>
			<td>Straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas scissor</td>
			<td>Aesculap, Germany</td>
			<td>OC 498 R</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5/0 Silk</td>
			<td>Seraflex</td>
			<td>IC 108000</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7/0 Silk</td>
			<td>Seraflex</td>
			<td>IC 1005171Z</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>guide-wire</td>
			<td>Abbott Vascular</td>
			<td>1001782-HC</td>
			<td>0.014-inch angioplastie guide-wire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Michel suture clips</td>
			<td>Aesculap, Germany</td>
			<td>BN507R</td>
			<td>7.5 x 1.75 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Michel Forcep</td>
			<td>Aesculap, Germany</td>
			<td>BN730R</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of stent implantation in the carotid artery for the study of restenosis

最後の数十年でステント開発に大幅な進歩にもかかわらず、心血管疾患は、西洋諸国の死亡の主な原因のまま。別の薬剤溶出型ステントの開発によって提供される利点の横に、冠動脈血行再建術はまた、ステント内血栓症と再狭窄の生命を脅かすリスクを負いません。新たな治療戦略の研究はステント留置および再狭窄プロセスを研究するための適切な方法の欠如によって損なわれる。ここでは、血管リモデリングと異なる薬物コーティングの効果の分子機構便利な方法で研究する可能性を提供するマウス頸動脈内ステント移植の迅速かつアクセス可能な手順を説明する。

<ol><li>マウスの左頸動脈に小型化されたニチノールステントの注入が25〜30分かかりますし、介入時の容器の損傷に起因する主に10％の死亡率を示しています。良好な生存率は、ステント植え込みの時間（5％の死亡率）で、重量は25グラム有するマウスで観察されている。したがって、我々は、25〜27グラ​​ムの重量を持つ移植マウスのために選んだ。手術後、マウスは2-5分であり、物理的な障害の中に麻酔から回復する、 例えば麻痺のように、観察される。ステント留置は、ステントは、血流（ 図1C）で脱臼されていないことを示した後にマイクロコンピュータ断層撮影（マイクロCT）は、イメージングが一週間行った。残念なことに、これらの画像における新生内膜形成の分析は、金属由来のアーチファクト（ 図1D、1E）のため不可能である。 </li><li>我々はすぐにステントの下、容器のunstented領域の任意の容器又は内皮損傷は観察されなかった、（ 図2A）組織によって検出などと内皮のための特定の染色（ 図2B、抗マウスCD31抗体）によって。見やすくするために、セクションは、二光子レーザー走査顕微鏡（ 図2B、2C）を用いてスキャンした。 </li><li> 25〜27グラ​​ムの重量を有するマウス者：ステント容器に、15％の永久的な拡張は、（動脈ステント1,15:1比）が検出される。新生内膜の形成と血栓形成は、古典的な組織学的染色（ 例えばヘマトキシリン·エオシン、ギムザ、Movat、トルイジンブルー、マッソン·トリクローム·ゴールドナー、 図3A、3B）により分析することができる。ラミナ外耳と国際はもう表示されませんので、プラークの大きさは、外部との差と腔エリア（：234566±3315μm2で、腔面積を意味する：12036±2662μmの2プラーク面積を意味する）として算出した。外周も（​​：1799±14μmのを意味する）を測定した。分析のための細胞組成、セクションでは、特定のマーカーとdeplastifiedと染色する必要があります。再内皮化のために、我々は、Cy3結合抗CD31抗体を使用し、平滑筋細胞の増殖FITC結合抗SMA抗体（ 図3C）である。ステント留置後1週間：再内皮化、総腔面（23.07±3.14パーセントの平均）にCD-31陽性のステンドグラスの割合として算出した。 </li></ol>もちろん、特定の染色の無制限の数は、各研究室の経験に応じて、可能です。種々の炎症性サイトカインのための浸潤細胞（単球、リンパ球）、または染色のミオシン重鎖の分析、平滑筋細胞のより良好な特性評価のためだけでなく、分析は、試験の目的に応じて、実行することができる。 <img alt="図1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50233/50233fig1highres.jpg" sr<html> C = &quot;/ files/ftp_upload/50233/50233fig1.jpg&quot; /&gt; 外科手術の図1の回路図の概要（）。血流がしっかりと同様に、総頸動脈を囲む結び目を引っ張って内頸動脈および近位外頸動脈に結び目を結合することにより遮断される。ステントを含むシリコンチューブを外頸動脈の小さな切開部を通して外頸動脈に導入される。ステントが所望の位置に達した後、シリコンチューブをガイドワイヤ上に引き戻され、ステントの形状記憶の拡張を可能にする。外科的移植（B）の後一週間ステントの位置を示すマイクロCT画像。材料由来のアーチファクトに起因する、新生内膜増殖の分析が不可能である（C、D）。 3fig2highres.jpg &quot;SRC =&quot; / files/ftp_upload/50233/50233fig2.jpg &quot;/&gt; 図2容器のUnstented面積をトルイジンブルー（A）および内皮CD31特異的染色（B、C）に示されるように、外科的処置によって影響されない。 <img alt="図3" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50233/50233fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50233/50233fig3.jpg" /> 図3プラークの分析は、古典的な組織学的染色（ 例えばマッソン·トリクローム·ゴールドナー（））により行うことができる。組織化された血栓がある場合には、容器が完全に閉塞する（B）が観察され、新生内膜内部の黒染色フィブリンの堆積により検出することができる。再内皮化（Cy3で、赤）又は平滑筋細胞の増殖（FITC、緑）の特異的なマーカーを用いて二重免疫蛍光染色によって検出した。対比は4 &#39;、6 -ジアミジノ-2 -フェニルインドール（DAPI、青）（C）を用いて行った。私たちは、未完了腔再内皮（右、シングル矢印）に比べてステントストラットの完了再内皮（左、二重矢印）に気づいた。

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A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

マウス頸動脈内ステント移植のモデルが記載されている。他の同様の方法に比べて、この手順が異なる薬剤溶出ステントおよび再狭窄の分子機構に対する血管壁の反応便利な方法で勉強する可能性を提供し、非常に、迅速かつ簡単にアクセスできます。

再狭窄の研究のための頸動脈内ステント留置のマウスモデル

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

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25.2K ビュー.  RWTH Aachen University. マウス頸動脈内ステント移植のモデルが記載されている。他の同様の方法に比べて、この手順が異なる薬剤溶出ステントおよび再狭窄の分子機構に対する血管壁の反応便利な方法で勉強する可能性を提供し、非常に、迅速かつ簡単にアクセスできます。

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Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for objective diagnosis but also for the evaluation of therapeutic efficacy and resilience to trauma. Ongoing research is directed at identifying molecular biomarkers for PTSD, including traumatic stress induced proteins, transcriptomes, genomic variances and genetic modulators, using biologic samples from subjects' blood, saliva, urine, and postmortem brain tissues. However, the correlation of these biomarker molecules in peripheral or postmortem samples to altered brain functions associated with psychiatric symptoms in PTSD remains unresolved. Here, we present an animal model of PTSD in which both peripheral blood and central brain biomarkers, as well as behavioral phenotype, can be collected and measured, thus providing the needed correlation of the central biomarkers of PTSD, which are mechanistic and pathognomonic but cannot be collected from people, with the peripheral biomarkers and behavioral phenotypes, which can.
Our animal model of PTSD employs restraint and tail shocks repeated for three continuous days - the inescapable tail-shock model (ITS) in rats. This ITS model mimics the pathophysiology of PTSD 17, 7, 4, 10. We and others have verified that the ITS model induces behavioral and neurobiological alterations similar to those found in PTSD subjects 17, 7, 10, 9. Specifically, these stressed rats exhibit (1) a delayed and exaggerated startle response appearing several days after stressor cessation, which given the compressed time scale of the rat's life compared to a humans, corresponds to the one to three months delay of symptoms in PTSD patients (DSM-IV-TR PTSD Criterian D/E 13), (2) enhanced plasma corticosterone (CORT) for several days, indicating compromise of the hypothalamopituitary axis (HPA), and (3) retarded body weight gain after stressor cessation, indicating dysfunction of metabolic regulation.
The experimental paradigms employed for this model are: (1) a learned helplessness paradigm in the rat assayed by measurement of acoustic startle response (ASR) and a charting of body mass; (2) microdissection of the rat brain into regions and nuclei; (3) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for blood levels of CORT; (4) a gene expression microarray plus related bioinformatics tools 18. This microarray, dubbed rMNChip, focuses on mitochondrial and mitochondria-related nuclear genes in the rat so as to specifically address the neuronal bioenergetics hypothesized to be involved in PTSD.

We describe a rat model of post traumatic stress disorder (PTSD) that reveals the persistent alterations in neuroendocrine function and the delayed long-term, exaggerated fear response, characteristic of PTSD patients. The animal model and methods described here are useful for correlating biomarkers in brain nuclei, which are mechanistic but cannot be measured in patients, with biomarkers in peripheral white blood cells, which can.

PTSDの、ニューラル血液学的および行動的相関関係を明らかにするための動物モデルにおけるバイオマーカー

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

医学

Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel stenting are crucial for translational approaches1,2.
The commonly used animal models include mice, rats, rabbits, and pigs3-5. However, the translation of these models into clinical settings remains difficult, since those biological processes are already studied in animal vessels but never performed before in human research models6,7. In this video we demonstrate a new humanized model to overcome this translational gap. The shown procedure is reproducible, easy, and fast to perform and is suitable to study the development of intimal hyperplasia and the applicability of diverse stents.
This video shows how to perform the stent technique in human vessels followed by transplantation into immunodeficient rats, and identifies the origin of proliferating cells as human.

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

This video shows a model to study the development of intimal hyperplasia after stent deployment using a human vessel (IMA) in an immunodeficient rat model.

人間の内胸動脈（IMA）移植およびステント留置術：ステント内再狭窄の開発を研究するための人体モデル

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in peripheral arterial bypass surgery as well as in arteriovenous fistulas.1-5 The experimental procedure of vein graft interposition in the common carotid artery by using the cuff-technique has been applied in several research projects to examine the aetiology of neointimal hyperplasia and therapeutic options to address it. 6-8 The cuff prevents vessel anastomotic remodeling and induces turbulence within the graft and thereby the development of neointimal hyperplasia.
Using the superior caval vein graft is an established small-animal model for venous arterialization experiment.9-11 This current protocol refers to an established jugular vein graft interposition technique first described by Zou et al., 9 as well as others.12-14 Nevertheless, these cited small animal protocols are complicated.
To simplify the procedure and to minimize the number of experimental animals needed, a detailed operation protocol by video training is presented. This video should help the novice surgeon to learn both the cuff-technique and the vein graft interposition. Hereby, the right external jugular vein was grafted in cuff-technique in the common carotid artery of 21 female Sprague Dawley rats categorized in three equal groups that were sacrificed on day 21, 42 and 84, respectively. Notably, no donor animals were needed, because auto-transplantations were performed. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice. In addition, the graft patency rate was 60 % for the first 10 operated animals and 82 % for the remaining 11 animals. The blood flow at the time of sacrifice was 8&plusmn;3 ml/min. In conclusion, this surgical protocol considerably simplifies, optimizes and standardizes this complicated procedure. It gives novice surgeons easy, step-by-step instruction, explaining possible pitfalls, thereby helping them to gain expertise fast and avoid useless sacrifice of experimental animals.

Neointimal hyperplasia is the primary cause of stenosis in arterialized veins. We propose a new protocol whereby the right external jugular vein is grafted using the cuff technique in the common carotid artery of Sprague Dawley rats. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice.

ラットの総頚動脈で外頚静脈グラフトの介在：洗練された顕微鏡下手術の訓練

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

左前下の動脈の結紮を通して心筋虚血再灌流傷害のマウスモデル

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

マウスにおけるタキサンの薬物動態学的および薬力学的分析のための頸動脈煎茶

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. While these therapies lead to the rapid restoration of blood flow, these technologies remain limited by restenosis in the case of bare metal stents and angioplasty, or reduced healing and possibly enhanced risk of thrombosis in the case of drug eluting stents. A key pathophysiological mechanism in the formation of restenosis is intimal hyperplasia caused by the activation of vascular smooth muscle cells and inflammation due to arterial stretch and injury. Surgeries that induce arterial injury in genetically modified mice are useful for the mechanistic study of the vascular response to injury but are often technically challenging to perform in mouse models due to the their small size and lack of appropriate sized devices. We describe two approaches for a surgical technique that induces endothelial denudation and arterial stretch in the femoral artery of mice to produce robust neointimal hyperplasia. The first approach creates an arteriotomy in the muscular branch of the femoral artery to obtain vascular access. Following wire injury this arterial branch is ligated to close the arteriotomy. A second approach creates an arteriotomy in the main femoral artery that is later closed through localized cautery. This method allows for vascular access through a larger vessel and, consequently, provides a less technically demanding procedure that can be used in smaller mice. Following either method of arterial injury, a degradable drug delivery patch can be placed over or around the injured artery to deliver therapeutic agents.

We describe a surgical technique that produces wire injury in the femoral artery of mice to induce neointimal hyperplasia to serve as a model testing system for the perivascular delivery of therapeutic compounds for the inhibition of restenosis.

血管周囲ドラッグデリバリーパッチの移植に大腿動脈ワイヤ傷害のマウスモデル

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

A Murine Model of Arterial Restenosis: Technical Aspects of Femoral Wire Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to atherosclerotic plaque development or the rupturing of established plaques, interrupts normal blood flow leading to various morbidities such as myocardial infarction and stroke. In the clinic endovascular procedures such as angioplasty are commonly performed to reopen the lumen. However, these treatments inevitably damage the vessel wall as well as the vascular endothelium, triggering an excessive healing response and the development of a neointimal plaque that extends into the lumen causing vessel restenosis (re-narrowing). Restenosis remains a major cause of failure of endovascular treatments for atherosclerosis. Thus, preclinical animal models of restenosis are vitally important for investigating the pathophysiological mechanisms as well as translational approaches to vascular interventions. Among several murine experimental models, femoral artery wire injury is widely accepted as the most suitable for studies of post-angioplasty restenosis because it closely resembles the angioplasty procedure that injures both endothelium and vessel wall. However, many researchers have difficulty utilizing this model due to its high degree of technical difficulty. This is primarily because a metal wire needs to be inserted into the femoral artery, which is approximately three times thinner than the wire, to generate sufficient injury to induce prominent neointima. Here, we describe the essential surgical details to effectively overcome the major technical difficulties of this model. By following the presented procedures, performing the mouse femoral artery wire injury becomes easier. Once familiarized, the whole procedure can be completed within 20 min.

The mouse femoral artery wire injury model of restenosis is technically challenging. In this protocol we show the key technical details essential for successfully performing wire injury to induce consistent&#160;neointima for studies of restenosis.

動脈再狭窄のマウスモデル：大腿ワイヤー傷害の技術的な側面

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

持続的な障害と皮質虚血を研究するために高齢ラットにおける一般的な頸動脈閉塞と永久遠位中大脳の実行

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves focal endothelial-selective transgenesis, thereby allowing an investigator to determine the biological roles of endothelial-expressed transgenes and to quantify the in vivo transcriptional activity of DNA sequences in large artery endothelial cells. The method uses surgical isolation of rabbit common carotid arteries and an arteriotomy to deliver a transgene-expressing viral vector into the arterial lumen. A short incubation period of the vector in the lumen, with subsequent aspiration of the lumen contents, is sufficient to achieve efficient and durable expression of the transgene in the endothelium, with no detectable transduction or expression outside of the isolated arterial segment. The method allows assessment of the biological activities of transgene products both in normal arteries and in models of human vascular disease, while avoiding systemic effects that could be caused either by targeting gene delivery to other sites (e.g. the liver) or by the alternative approach of delivering genetic constructs to the endothelium by germ line transgenesis. Application of the method is limited by the need for a skilled surgeon and anesthetist, a well-equipped operating room, the costs of purchasing and housing rabbits, and the need for expertise in gene-transfer vector construction and use. Results obtained with this method include: transgene-related alterations in arterial structure, cellularity, extracellular matrix, or vasomotor function; increases or reductions in arterial inflammation; alterations in vascular cell apoptosis; and progression, retardation, or regression of diseases such as intimal hyperplasia or atherosclerosis. The method also allows measurement of the ability of native and synthetic DNA regulatory sequences to alter transgene expression in endothelial cells, providing results that include: levels of transgene mRNA, levels of transgene protein, and levels of transgene enzymatic activity.

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

This method is to introduce a transgene into the endothelium of rabbit carotid arteries. Introduction of the transgene allows the assessment of the biological role of the transgene product either in normal arteries or disease models. The method is also useful for measuring activity of DNA regulatory sequences.

生体内でウサギの一般的な頚動脈内皮細胞への遺伝子導入

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, intimal hyperplasia, and atherosclerosis. The goal of this article is to demonstrate a method for placing bilateral venous interposition grafts in a rabbit, then transducing the grafts with a gene transfer vector that achieves durable transgene expression. The method allows the investigation of the biological roles of genes and their protein products in normal vein graft homeostasis. It also allows the testing of transgenes for the activities that could prevent vein graft failure, e.g., whether the expression of a transgene prevents the neointimal growth, reduces the vascular inflammation, or reduces atherosclerosis in rabbits fed with a high-fat diet. During an initial survival surgery, the segments of right and left external jugular vein are excised and placed bilaterally as reversed end-to-side common carotid artery interposition grafts. During a second survival surgery, performed 28 days later, each of the grafts is isolated from the circulation with vascular clips and the lumens are filled (via an arteriotomy) with a solution containing a helper-dependent adenoviral (HDAd) vector. After a 20-min incubation, the vector solution is aspirated, the arteriotomy is repaired, and flow is restored. The veins are harvested at time points dictated by individual experimental protocols. The 28-day delay between the graft placement and the transduction is necessary to ensure the adaptation of the vein graft to the arterial circulation. This adaptation avoids rapid loss of transgene expression that occurs in vein grafts transduced before or immediately after grafting. The method is unique in its ability to achieve durable, stable transgene expression in grafted veins. Compared to other large animal vein graft models, rabbits have advantages of low cost and easy handling. Compared to rodent vein graft models, rabbits have larger and easier-to-manipulate blood vessels that provide abundant tissue for analysis.

This method describes the placement of interposition vein grafts in rabbits, the transduction of the grafts, and the achievement of durable transgene expression. This allows the investigation of physiological and pathological roles of transgenes and their protein products in grafted veins, and testing of gene therapies for vein graft disease.

耐久性のある遺伝子発現により一般的な頚動脈移植に頸静脈の家兎モデル

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...