国立衛生研究所によってサポートされているR01-AA015614、R01-AA014973、T32-AA014127およびK12-GM088021を付与します。著者は、技術支援とDRSのためにサマンサL. Blomquistに感謝します。批判的に原稿やビデオを評価するためのケビン·コールドウェル、ドナルドパートリッジ。

すべての動物の手続きは、ニューメキシコ州 - 健康科学大学センター施設内動物管理使用委員会によって承認された。 1。蒸気商工総会<ol><li>上、下、前、後、サイド、ドア（ 図1、表1）のためのビデオで提供さ寸法に丸鋸やジグソーで切断のポリカーボネートシート。 </li><li>丸鋸やジグソーで、フロントパネルの中央にある幅の広い16インチ×8インチの高さの開口部をカット。 </li><li>測定し、室のドアになります10インチのポリカーボネートシートで18インチの上にピアノのヒンジ用の穴をマーク。 </li><li>ドアに、5/16インチのドリルビットとカウンターシンク穴を開け、3/16インチのドリルビットとネジ用の穴を開けます。ネジの頭のためにドアの内側にカウンターシンク穴を開けていることを確認してください。 </li><li>溶接用ポリカーボネートシートを準備します。 </li><li>あちこちに組み立てるNT、＃16ウェルドオンを用いたボトムパネル上に戻し、サイドパネル。 </li><li> ＃16溶接式とパネル間のギャップをシール。 </li><li> ＃16溶接式で上部パネルを取り付けます。 </li><li>溶接部が硬化しながら、所定の位置にすべてのものを保持するためにバークランプまたは重い教科書を使用してください。 </li><li>ドアヒンジを取り付けるための開口部以下のフロントパネル1インチ上にポリカーボネートの12インチピースで1インチを取り付けます。 </li><li>治すために溶接式のために少なくとも24時間を許可します。 </li><li> 12インチ、長さ1インチの長さのPEX管の1枚PEX管の2枚をカット。 </li><li> 5月16日のドリルビットを使用すると、一方の端から12インチPEX管のそれぞれ約1〜2インチで穴を開けます。 </li><li>離れてコネクタからある穴に3/8インチのT型コネクタに2×12インチのPEXチューブを取り付けます。 </li><li> 3/8インチのプラグがPEX管の開放端にキャップ。 </li><li> 4-40小ねじとナットを使用してフロントパネルやドアにピアノヒンジを取り付けます。 </li><li>ガイドとしてドアを用いて、m個室内のフロントパネルに1インチのスペーサー上にピアノのヒンジのために必要な穴を箱舟。 </li><li> 3月16日インチのドリルビットを使用すると、ピアノのヒンジのフロントパネルに穴を開けます。 </li><li> 4-40小ねじとナットを使用してフロントパネルのドア、ピアノヒンジを取り付けます。 </li><li>サイドアームの両側にワッシャーとナットが付いているビデオのようにトグルクランプを組み立てる。 </li><li>フロントパネル上のトグルクランプ用のマークとドリル3/16インチの穴と4-40小ねじとナットでトグルクランプを取り付けます。 </li><li>ドアの内側に3/8インチのゴム球シールを追加します。 </li><li> （5/8インチ）退屈なドリルビットを使用すると、入口ポートのトップパネルの中央に穴を開けます。 </li><li>出口ポートは、背面パネルの下部/中心部の1/2インチの穴を開けます。 </li><li>出口ポート穴に蒸気室の奥壁を貫通した貫通壁のアダプター3/8インチのネジ部を押​​すことにより、出口ポートを組み立てます。からナットを取り付け所定の位置に保持するために、チャンバー内。 </li><li>ポリカーボネートシートから保護カバーを取り外します。 </li><li> T型コネクタにPEX管の1インチのピースを取り付け、内側からチャンバの上部の穴からPEXチューブを強制します。 </li><li>外部から1インチPEX管の上部に3/8インチ90肘を取り付けます。 注：ドアに1/2インチの穴を開け、穴に1/2インチのシールセプタムを挿入します。 </li><li>空気だけで室内を制御するために繰り返して1から22を繰り返します。 </li></ol> 2。ラックおよびエアー配達国会<ol><li>マテリアルリストに記載されているカート/ラックにチャンバーを配置する場合は、製造元の指示に従って、カートを組み立てる。 </li><li>予備のナットとボルトで、気流制御因子を保持するために、ラックにポリカーボネートのスクラップピースを取り付けます。 </li><li>どこでもポリカーボネート、マークとドリル気流レギュレータの3/4インチの穴のスクラップピースオンとナットでレギュレータを添付提供しました。 </li><li>空気流量調節器の入口と出口のポートに3/8インチのスルーACアダプタを接続します。 </li><li>エアレーション石、＃8栓とクイックリリースのインラインコネクタをエタノールフラスコを組み立てます。 </li><li> 図1に示すように、3/8インチTYGONチューブを用いて、空気ポンプおよびエタノールフラスコに流量レギュレータを接続する。 </li><li> 図1に示すように、空気のみ室は、入口3/8インチ、3/8インチのタイゴンチューブ90肘に気流調整器の出口ポートを接続します。 </li></ol><img alt="図1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51839/51839fig1highres.jpg" width="500" /> 図1は、蒸気室の構成の概略図。T-コネクタは、低雑音エアポンプに取り付けられている。 T-コネクタの一方の側にのみ空気が直接蒸気チャンバのための空気流調節器に接続されている。他のSIDEを再度分割し、2つの異なる気流調整器、空気用とエタノール1に取り付けられている。示すように、空気室に直接レギュレータに接続されている。エタノール蒸気室、一つの空気流調整器は、フィルターフラスコ内の液をエタノールに浸漬エアレータ石に接続されている。示されるように、フィルターフラスコのサイドアームポートは、エアレギュレータの出力に接続されている。マージされたエタノール蒸気及び空気は、エタノール蒸気室の入口に接続されている。出口管（図示せず）は、室内の換気口に接続されている。 3。テスト蒸気チェンバースとエタノールレベルを調整<ol><li> 、フィルターフラスコに190プルーフエタノール600ミリリットルを追加エアレーション石を挿入し、フラスコのサイドアームにチューブ入口にフック。 </li><li>閉鎖室のドアとエアーポンプをオンにします。 </li><li>約半分の空気がそれと混合されている空気のような液体アルコール流れるように気流制御因子を調整します。 Adjusエタノール室のアルコールと空気の混合流への空気だけエアフロートン。 </li><li>チャンバは空気エタノール濃度を測定する前に少なくとも30分間平衡化することができます。 </li><li>隔壁を介して18G針及び60mlのシリンジで空気を5mlを抽出することにより、空気エタノール濃度を測定する。バック60ミリリットル（1：12希釈）にプランジャーを描くことで室内空気と、そのサンプルを希釈する。製造業者の指示に従って、飲酒を用いて空気エタノールレベルを測定する。室内空気の希釈は、飲酒の検出範囲内のアルコール蒸気のレベルを達成するために必要とされる。 NOTE：アルコール暴露の異なるレベルを使用する場合、希釈を調整する必要があり得る。 </li><li>約4.5〜5グラム/デシリットル（空気のデシリットル当たりの気化アルコールのグラム）の風アルコール濃度を達成するの​​に必要な出発点として、空気流調整器を調整する。 </li></ol> 4。動物の繁殖<ol><li>グループの家の女性は、卵巣のサイクルを同期させるために、少なくとも1週間/ 6マウス（2〜3ヶ月）をC578BL。 </li><li>個別に少なくとも2週間のオスのC57BL / 6マウス（2-5ヶ月）を収容する。 </li><li>同期した後に、交配を可能にするために5日間、独身男性と独身女性の中に入れた。 </li><li>交尾の後、男性を削除し、個別に、女性を収容し、室内に配置します。 </li></ol> 5。前産後エタノール蒸気暴露<ol><li>子犬の死を防ぐために、出生日を除いて（午前6時 - 午後6時から点灯）ライトサイクル中の午前10時から始まる1日4時間、エタノール蒸気に妊娠中のダムを公開します。 </li><li> （G）5、G13-G14、およびG18-G20は妊娠を監視するために妊娠の日にダムを量る;寝具は、女性が取り扱いを最小限にするために体重を測定したことを日に変更されました。 </li><li>毎日それらに吸収され、任意のエタノールを用いてペレットの消費を避けるために、エタノール暴露群のための食糧を交換してください。 </li><li>当日の誕生は、動物にさらさないでください。出産後、P1〜P12から午前10時から始まる1日4時間にわたってダムや子犬を公開します。 </li><li> P2、P8、P12、およびP25に子犬を比較検討する。と追加の取り扱いを最小限に抑えるためにP8とP12にベッドを変更してください。 </li><li>すぐに最後の暴露（P12）の後に、標準的な動物飼育室にケージを移す。 </li></ol>

著者らは、開示することは何もありません。

ここでは、詳細に蒸気吸入室の構築のための方法を記載する。チャンバーを構築するために必要な材料とツールは、商業的供給者の数から容易に入手可能であり、チャンバーの建設のための手順は比較的簡単です。我々はここで説明するシステムは、逆流や混合を防止するために、任意のインラインチェックバルブが含まれていません。私たちは、空気中に私たちはどんな混合または空気中?...

妊娠中に飲むと有意な影響を受けた個人とその家族の生活の質を低下させる多くの臓器やシステムに永続的な変化を引き起こし、胎児に害を与えることができます。それは、女性の約百分の10から30までは、どんちゃん騒ぎパターン1,2 1-8％の飲用で、米国では妊娠中に飲んでいると推定されている。胎児の発育中にエタノール曝露によって生じる効果の範囲は、集合的に胎児性アルコールスペクトラム障害（FASDs）として知られている。最近の推定値はFASDs米国3 2-5％と高い有病率との公衆衛生上の大きな問題であることを示している。 FASDsのより深刻な症状は発育遅延、頭蓋顔面異常、および学習障害などの神経行動障害、ことを特徴としている胎児性アルコール症候群（FAS）、である。 FASの有病率は、米国で3 0.2から0.7パーセントであると推定されている。 FASDsに現在利用可能な治療は部分的にのみ有効であるより効果的な治療法の開発は、障害のこの複雑なスペクトルの細胞および分子基盤の理解不足によって制限されます。 妊娠は妊娠2の後の段階の間に、検出された禁欲続いてきた前に、国民の先天異常の予防研究（NBDPS）からのデータは、妊娠中の女性は、最も一般的に1 番目の学期中に飲むことを示している。 NBDPSも妊娠中のエタノール消費の第二の最も一般的なパターンは、妊娠2のすべての学期全体の飲酒を伴うことがわかった。この理由は、胎児のエタノール曝露（たとえ低線量で）、妊婦管理へのアクセスが制限され、精神神経疾患のための肯定的な歴史、および虐待またはエタノール4への依存の潜在的に有害な影響についての意識の欠如が含まれています。興味深いことに、NBDPSは、消費の3番目の最も一般的なパターンは1時に禁欲を関与することが報告<supそれは多くの場合、器官形成はほとんど完了しているため飲用が安全であることを想定している&gt;セントと3 番目の学期中に消費に続く2 番目の学期。これは神経回路が深い洗練2を受ける期間であるので、 第3学期は、エタノール誘発神経系の損傷に対する高い感受性の周期である。 NBDPSも1 番目と3 番目の学期中に2禁欲続く2 回目の学期を通して消費を含め、妊娠中に発生するアルコール消費量の他、それほど頻繁なパターンを同定した。 妊娠中の女性で観察されたエタノール消費の異なるパターンをモデル化する試みにおいて、発達エタノール曝露パラダイムの数が最も一般的であり、5,6、ラットおよびマウスで、多様な動物種を使用して確立されている。これらの動物における妊娠期間、通常、ラス人間の妊娠の1 番目と2 番目の学期に相当し、約3週間と、TS。多くのげっ歯類の研究では、この期間中の様々な用量およびエタノール曝露のパターンの影響を評価している。頻繁に妊娠したマウスやラットにエタノールを投与するために使用される方法の例としては、流動食7,8を経由して投与を含む、飲料水9,10、サッカリン甘くソリューション11の自発的な飲酒、胃強制経口投与12、蒸気の吸入13にエタノールを加えて、および皮下または腹腔内注射14。これらの研究の結果は、妊娠の初期段階での暴露は（6,15に概説されている）、脳全体に神経回路を損傷するのに十分であることを実証し、FASDsとヒトで観察赤字のいくつかをで要約している。 げっ歯類を用いた実験も証明されていることを第 3と同等の間の暴露</sup&gt;約ラットとマウスでは出生後の最初の1〜2週間に相当し、人間の妊娠の学期は、かなり脳の発達を損なう可能性があります。この期間中の曝露は、新生児ラットやマウスにエタノールを投与することによってモデル化されています。エタノールは、人工飼育動物16-18、胃内挿管19、皮下注射瘻孔20内を介して供給することを含む様々な方法、および蒸気吸入21,22を使用して、これらの動物に投与されている。これらの研究は、説得力のある脳の成長のスパートがエタノール6の発達への影響に対する高い脆弱性の周期であることを実証した。 上述したように、妊娠のすべての学期中に飲酒は、女性2におけるエタノール消費の一般的なパターンです。しかしながら、比較的少数の研究は、動物モデルを用いて露光のこのパターンの影響を評価している。これらの研究のいくつかはadvantagをとっている第3学期と同等のラットおよびマウスの場合と同様に、 子宮内ではなく、新生児期に発生した大規模な動物のE。これらの動物モデルは、ヒト以外の霊長類23,24と羊25〜27が含まれています。しかしながら、これらの動物モデルが広くコスト高と専門医療施設の必要性、部分的には、FASDs研究に使用されていない。げっ歯類は、より一般的に胎児の発育5に全三半期のエタノール曝露の効果を特徴付けるために使用されてきた。モルモットは、人間28,29のそれに脳の成熟に彼らの大規模な出生前の開発との類似点が与えられ、この点で特に有利で ​​あった。モルモットでは、ヒト第3三半期の等価開発期間を含む子宮内エタノール曝露の効果を特徴付けることが可能であった。これらの動物の比較的高いコスト、ならびにそれらの妊娠の比較的長い持続時間（〜67日）、FASDs研究に取り組んでいくつかの研究室にその使用を制限している。 そのため、生物医学研究での費用対効果と幅広い用途のため、研究者らは、妊娠のすべての妊娠期にエタノールへの暴露をモデル化するために、ラットを用いてきた。初期の研究では、ラットを0.08グラム/デシリットルのダムのピーク血中エタノール濃度（BEC）、その結果胃人工的に飼育する新生児（出生後日数（P）1月10日）を経てエタノールを投与し、続いて流動食を経由して、妊娠中に暴露したそして子犬0.16グラム/デシリットル中。このパラダイムは視神経髄鞘に長期的な変化を引き起こし、小脳30〜32におけるバーグマングリア繊維の数を減少させた。 第3トリメスター相当（P4-9）33,34の一部の間新生児政権が続く胃内挿管を経由してどんちゃん騒ぎ状に妊娠したラットのダムにエタノールを投与した人工的な飼育条件を使用して同様に、マイヤーとの共同研究。 PEAK母体およびPUP BECはは妊娠20日目及びP6の両方で0.3グラム/デシリットルた。この全学期の露出パラダイムは、妊娠33の選択された期間中に公開されるの仔で観察されるものよりも有意に大きかった成長遅延をもたらした。さらに、すべての三半期の間に相当のエタノールに暴露したラットは、小脳プルキンエそれ以外の期間34中に暴露した動物で観察されたものより大きかった顆粒細胞の数の減少を示した。海馬細胞数の減少もこのパラダイムで報告したが、これらの効果は35学期相当の3 回目の間に、主に暴露の結果であると思われた。妊娠ラットおよび新生児マウスの両方に胃内胃管栄養法を介して、エタノール投与することを含む方法は、すべての妊娠初期露光36をモデル化するために使用されている。ダムでの0.13グラム/デシリットル（妊娠17日目）およびP6の仔での0.24グラム/ DLの前記下部電極が得られ、この方法は、誘発されLON海馬と視床下部におけるモノアミン神経伝達物質レベルのG-持続的変化、および海馬37,38で結合タンパク質2 DNAメチルトランスフェラーゼとメチル化CpGの発現を増加させた。同じような露出パラダイム（ダムや子犬での0.2グラム/デシリットル中のBEC = 0.14〜0.2グラム/デシリットル）を使用して、ギル·Mohapel ら 39は、成体ラットの歯状回における新しい未熟な神経細胞の数の増加を検出したことをエタノール誘発神経損傷または成人生まれのニューロンの成熟の変化に代償機構を表すことができる。捜査官はまた、流動食を経由してダムを公開するか、妊娠中や授乳9,40の両方の間に水を飲むことによって、すべての学期エタノール曝露をモデル化しようとしました。それは、典型的には、低子犬BECは（; 41,42 例えば 、0.002〜0.05グラム/デシリットル）になるので、自分の母乳を経由して子犬を暴露の有用性は限られている。 マウスもextensを使用されている発達エタノール曝露の影響を特徴づけるためにively。この動物モデルの多くの遺伝子改変されたマウス系統が5利用可能な付加的な利点を、ラット動物モデルのため、上記の強みの多くの株式。マウスは正常に1 番目 、2 番目または妊娠43,44の第3三半期中にエタノールの効果を特徴付けるために使用されてきた。それはヒトの妊娠三半期のすべてに相当する時にマウスを露出させるために技術的に困難であるので、これらの動物のすべての妊娠初期暴露の影響は、十分に特徴付けられていない。例えば、ラットで成功裡に使用されている人工飼育し、胃の強制経口投与では、マウス45でのより専門的な手順が必要です。我々の知る限り、これまでの唯一の研究では、マウスを使用して、すべての学期エタノール曝露の効果を研究しようとしました。これらの動物を、飲料水デュリエタノール溶液に曝露した妊娠·授乳46 ng の 。母親のBECはは0.07グラム/デシリットルと子犬前記下部電極が決まったが、ダムのものの割合であることが期待されていないでした。 ここでは、アルコールは蒸気吸入室を経由して、妊娠中のダムや新生児の両方に投与されたマウスの全ての三半期のエタノール曝露のための新しいモデルを説明します。蒸気室は従来の設計47に基づいて建設された。私たちは、吸入室を構築し、露出手続きを行う方法についての詳細な手順を提供する。また、達成することができBECはと仔の生存と成長に暴露の影響に関する情報を提供します。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="636">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:320px;">Item</td>
			<td style="width:180px;">Company</td>
			<td style="width:72px;">Cat #</td>
			<td style="width:64px;">Qty</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polycarbonate 1/4&#34; clear 48&#34; x 24&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>8574K23</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Foam Rubber bulb seal 3/8&#34;w x 7/32&#34;h&#160;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>93085K67</td>
			<td>10ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Weld-on #16</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>7515A11</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Piano hinge 12&#34; long</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1658A11</td>
			<td>2 x 1ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hold-down toggle clamps standard</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5126A26</td>
			<td>8</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PEX tubing 1/2&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>51275K88</td>
			<td>10ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K608</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed plug fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5462K79</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K596</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K851</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Phillips Machine screw 4-40</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>91772A112</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Machine screw hex nut 4-40</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>90480A005</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Panel-mount flowmeter 2-20</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>41945K76</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89001-800</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Precision Seal Septa</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89084-490</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole</td>
			<td>VWR</td>
			<td>59581-367</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50&#39;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89068-556</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50&#39;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89068-502</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Aerator Stone P2120</td>
			<td>VWR</td>
			<td>32573-007</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; T-connectors Pk of 20</td>
			<td>VWR</td>
			<td>46600-060</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">VWR Disconnectors tapered Pk of 10</td>
			<td>VWR</td>
			<td>46600-110</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8 Hose Barb valved in-line coupling</td>
			<td>Colder Products Company</td>
			<td>HFCD17612</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Air pump medium capacity</td>
			<td>LMI Manufacturers</td>
			<td>DB60L</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Nexelate Wire Shelving 36&#34;W X 24&#34;D X 63&#34;H</td>
			<td>Global industrial</td>
			<td>T9A990135</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Stem Casters Set of (4) 5&#34; Polyurethane Wheel</td>
			<td>Global industrial</td>
			<td>T9A500591</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Breathalyzer Alco-Sensor III</td>
			<td>Intoximeters, Inc.</td>
			<td>ASIII</td>
			<td>1
			<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="636">
				<colgroup>
					<col />
					<col />
					<col />
					<col />
				</colgroup>
				<tbody>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;width:320px;">Item</td>
						<td style="width:180px;">Company</td>
						<td style="width:72px;">Cat #</td>
						<td style="width:64px;">Qty</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Polycarbonate 1/4&#34; clear 48&#34; x 24&#34;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>8574K23</td>
						<td>10</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Foam Rubber bulb seal 3/8&#34;w x 7/32&#34;h&#160;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>93085K67</td>
						<td>10ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Weld-on #16</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>7515A11</td>
						<td>3</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Piano hinge 12&#34; long</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>1658A11</td>
						<td>2 x 1ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Hold-down toggle clamps standard</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5126A26</td>
						<td>8</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">PEX tubing 1/2&#34;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>51275K88</td>
						<td>10ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K608</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed plug fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5462K79</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K596</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K851</td>
						<td>1</td>
					</tr>
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						<td height="20" style="height:20px;">Phillips Machine screw 4-40</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>91772A112</td>
						<td>1</td>
					</tr>
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						<td height="20" style="height:20px;">Machine screw hex nut 4-40</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>90480A005</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Panel-mount flowmeter 2-20</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>41945K76</td>
						<td>3</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89001-800</td>
						<td>2</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Precision Seal Septa</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89084-490</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole</td>
						<td>VWR</td>
						<td>59581-367</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50&#39;</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89068-556</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50&#39;</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89068-502</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Aerator Stone P2120</td>
						<td>VWR</td>
						<td>32573-007</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; T-connectors Pk of 20</td>
						<td>VWR</td>
						<td>46600-060</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">VWR Disconnectors tapered Pk of 10</td>
						<td>VWR</td>
						<td>46600-110</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8 Hose Barb valved in-line coupling</td>
						<td>Colder Products Company</td>
						<td>HFCD17612</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Air pump medium capacity</td>
						<td>LMI Manufacturers</td>
						<td>DB60L</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Nexelate Wire Shelving 36&#34;W X 24&#34;D X 63&#34;H</td>
						<td>Global industrial</td>
						<td>T9A990135</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Stem Casters Set of (4) 5&#34; Polyurethane Wheel</td>
						<td>Global industrial</td>
						<td>T9A500591</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Breathalyzer Alco-Sensor III</td>
						<td>Intoximeters, Inc.</td>
						<td>ASIII</td>
						<td>1</td>
					</tr>
				</tbody>
			</table>
			</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

construction of vapor chambers used to expose mice to alcohol during the equivalent of all three trimesters of human development

開発中のアルコールへの暴露をまとめて胎児性アルコールスペクトラム障害（FASDs）として知られており、形態学的および行動異常の星座になることがあります。スペクトラムの最も深刻な終わりに発育遅延、頭蓋顔面異形学、および神経行動赤字が特徴胎児性アルコール症候群（FAS）が、ある。げっ歯類を含む動物モデルを用いた研究は、FASDsの病態に関与する多くの分子·細胞メカニズムを解明した。妊娠中のげっ歯類のエタノール投与は、妊娠の第一および第二の妊娠期にヒトへの暴露をモデル化するために使用されている。ヒトでの妊娠後期のエタノール消費は、新生児げっ歯類を用いてモデル化されています。しかし、いくつかの齧歯類の研究は、ヒトの妊娠、妊娠中の女性に共通しているエクスポージャーのパターンの全3学期に相当時のエタノール曝露の効果を特徴としている。ここでは、O容易からの蒸気室を構築する方法を示してそれぞれが6つの標準のマウスのケージに収容することができbtainable材料。我々は、すべての3つの学期中に、最小の取り扱いで、エタノールへの曝​​露をモデル化するために使用することができる蒸気室パラダイムを記載している。我々の研究は、妊娠中のダムがエタノールに重要な代謝の耐性を開発したことを示している。しかし、新生仔マウスは、代謝寛容と胎児の数、胎児体重、胎盤重量、子犬/リットルの数、死者の子犬/リットルの数を開発していない、と子犬重量が大幅にエタノール曝露による影響を受けなかった。このパラダイムの重要な利点は、遺伝子組み換えマウスを用いた研究への適用である。さらに、このパラダイムは、動物の取り扱い、胎児性アルコール研究の主要な交絡を最小限に抑えます。

図2Aは、妊娠マウスおよび新生児の子孫の両方が室内の比較的安定したエタノール蒸気の濃度に暴露されたことを示している。これらの4-6グラム/デシリットルの範囲であった。 図2Bは、前記下部電極は、時間の関数として妊娠マウスで達成を示しています。前記下部電極は、標準的なアルコール脱水素酵素ベースのアッセイ48を使用して測定した。 G5で、​?...

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Construction of Vapor Chambers Used to Expose Mice to Alcohol During the Equivalent of all Three Trimesters of Human Development

我々は、同時に6マウスのケージを収容し、容易に入手可能な材料を用いてアルコール蒸気室の構成を示す。我々はさらに、人間の妊娠のすべての3学期に相当胎児性アルコール暴露のマウスモデルでの使用を記載している。このパラダイムは、妊娠や出産後の日1月12日の間、動物を公開します。

人間開発の3つのすべての学期の等価時にはアルコールにマウスを公開するために使用蒸気チェンバースの建設

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal ...

construction-vapor-chambers-used-to-expose-mice-to-alcohol-during

Research

JoVE Journal

Medicine

14.6K ビュー.  University of New Mexico Health Sciences Center. 我々は、同時に6マウスのケージを収容し、容易に入手可能な材料を用いてアルコール蒸気室の構成を示す。我々はさらに、人間の妊娠のすべての3学期に相当胎児性アルコール暴露のマウスモデルでの使用を記載している。このパラダイムは、妊娠や出産後の日1月12日の間、動物を公開します。 

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Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel stenting are crucial for translational approaches1,2.
The commonly used animal models include mice, rats, rabbits, and pigs3-5. However, the translation of these models into clinical settings remains difficult, since those biological processes are already studied in animal vessels but never performed before in human research models6,7. In this video we demonstrate a new humanized model to overcome this translational gap. The shown procedure is reproducible, easy, and fast to perform and is suitable to study the development of intimal hyperplasia and the applicability of diverse stents.
This video shows how to perform the stent technique in human vessels followed by transplantation into immunodeficient rats, and identifies the origin of proliferating cells as human.

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

This video shows a model to study the development of intimal hyperplasia after stent deployment using a human vessel (IMA) in an immunodeficient rat model.

人間の内胸動脈（IMA）移植およびステント留置術：ステント内再狭窄の開発を研究するための人体モデル

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

医学

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current estimates put the prevalence of amblyopia at approximately 1-3%1-3, the majority of cases being monocular2. Amblyopia is most frequently caused by ocular misalignment (strabismus), blur induced by unequal refractive error (anisometropia), and in some cases by form deprivation.
Although amblyopia is initially caused by abnormal visual input in infancy, once established, the visual deficit often remains when normal visual input has been restored using surgery and/or refractive correction. This is because amblyopia is the result of abnormal visual cortex development rather than a problem with the amblyopic eye itself4,5 . Amblyopia is characterized by both monocular and binocular deficits6,7 which include impaired visual acuity and poor or absent stereopsis respectively. The visual dysfunction in amblyopia is often associated with a strong suppression of the inputs from the amblyopic eye under binocular viewing conditions8. Recent work has indicated that suppression may play a central role in both the monocular and binocular deficits associated with amblyopia9,10 .
Current clinical tests for suppression tend to verify the presence or absence of suppression rather than giving a quantitative measurement of the degree of suppression. Here we describe a technique for measuring amblyopic suppression with a compact, portable device11,12 . The device consists of a laptop computer connected to a pair of virtual reality goggles. The novelty of the technique lies in the way we present visual stimuli to measure suppression. Stimuli are shown to the amblyopic eye at high contrast while the contrast of the stimuli shown to the non-amblyopic eye are varied. Patients perform a simple signal/noise task that allows for a precise measurement of the strength of excitatory binocular interactions. The contrast offset at which neither eye has a performance advantage is a measure of the "balance point" and is a direct measure of suppression. This technique has been validated psychophysically both in control13,14 and patient6,9,11 populations.
In addition to measuring suppression this technique also forms the basis of a novel form of treatment to decrease suppression over time and improve binocular and often monocular function in adult patients with amblyopia12,15,16 . This new treatment approach can be deployed either on the goggle system described above or on a specially modified iPod touch device15.

Amblyopia is a developmental disorder of the visual cortex that is often accompanied by strong suppression of one eye. We present a new technique for measuring and treating interocular suppression in patients with amblyopia that can be deployed using virtual reality goggles or a portable iPod Touch device.

弱視における抑制の測定と治療

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

A Phenotyping Regimen for Genetically Modified Mice Used to Study Genes Implicated in Human Diseases of Aging

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to lessen the impact of debilitating conditions but remain elusive in many cases. Only by understanding the causes and pathology of diseases associated with aging, can scientists begin to identify potential therapeutic targets and develop strategies for intervention. The most common age-related conditions are neurodegenerative disorders such as Parkinson's disease and blindness. Age-related macular degeneration (AMD) is the leading cause of blindness in the elderly. Genome wide association studies have previously identified loci that are associated with increased susceptibility to this disease and identified two regions of interest: complement factor H (CFH) and the 10q26 locus, where the age-related maculopathy susceptibility 2 (ARMS2) and high-temperature requirement factor A1 (HtrA1) genes are located. CFH acts as a negative regulator of the alternative pathway (AP) of the complement system while HtrA1 is an extracellular serine protease. ARMS2 is located upstream of HtrA1 in the primate genome, although the gene is absent in mice. To study the effects of these genes, humanized knock-in mouse lines of Cfh and ARMS2, knockouts of Cfh, HtrA1, HtrA2, HtrA3 and HtrA4 as well as a conditional neural deletion of HtrA2 were generated. Of all the genetically engineered mice produced only mice lacking HtrA2, either systemically or in neural tissues, displayed clear phenotypes. In order to examine these mice thoroughly and systematically, an initial phenotyping schedule was established, consisting of a series of tests related to two main diseases of interest: AMD and Parkinson's. Genetically modified mice can be subjected to appropriate experiments to identify phenotypes that may be related to the associated diseases in humans. A phenotyping regimen with a mitochondrial focus is presented here alongside representative results from the tests of interest.

A reverse-genetics approach to understanding gene families associated with human disease is presented, using mouse as a model system, and the subsequent mouse phenotyping schedule is described. Because mice defective in a gene of interest, HtrA2, manifested Parkinsonian symptoms, the phenotyping regimen is focused on identifying neurological defects.

老化のヒトの疾患に関与する遺伝子を研究するために使用される遺伝子改変マウス用表現型レジメン

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to ...

Contractility Measurements of Human Uterine Smooth Muscle to Aid Drug Development

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We describe methods to measure ex vivo myometrium contractility. This assay can be used to investigate factors and molecules involved in the modulation of myometrial contraction and to determine their excitatory or inhibitory actions, and hence their therapeutic potential in vivo. Biopsies are obtained from women undergoing cesarean section delivery with informed consent. Fine strips of myometrium are dissected, clipped and attached to a force transducer within 1 mL organ baths superfused with physiological saline solution at 37 &#176;C. Strips develop spontaneous contractions within 2&#8211;3 h under set tension and remain stable for many hours (&#62;6 h). Strips can also be stimulated to contract such as by the endogenous hormones, oxytocin and vasopressin, which cause concentration-dependent modulation of contraction frequency, force and duration, to more closely resemble contractions in labor. Hence, the effect of known and novel drug leads can be tested on spontaneous and agonist-induced contractions.
This protocol specifically details how this assay can be used to determine the potency of known and novel agents by measuring their effects on various parameters of human myometrial contraction. We use the oxytocin- and V1a receptor antagonists, atosiban and SR49059 as examples of known compounds which inhibit oxytocin- and vasopressin-induced contractions, and demonstrate how this method can be used to complement and validate pharmacological data obtained from cell-based assays to aid drug development. The effects of novel agonists in comparison to oxytocin and vasopressin can also be characterized. Whilst we use the example of the oxytocin/ vasopressin system, this method can also be used to study other receptors and ion channels that play a role in uterine contraction and relaxation to advance the understanding of human uterine physiology and pathophysiology.

This article describes experimental protocols to study ex vivo contractions of human myometrium and their application in drug discovery. This technique is used to improve the understanding of myometrial physiology and pathophysiology as well as to validate pharmacological data from novel research probes or drug leads.

援助医薬品開発への人間の子宮平滑筋の収縮力測定

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based three-chamber bags (3CBs) and soybean-oil-based compounded bags (CoBs) in hospitalized adult patients. We designed a multicenter, randomized, prospective, open-label, noninferiority protocol to compare the efficacy, safety, and distribution of olive-oil-based 3CBs and soybean-oil-based CoB formulations in adult Chinese patients requiring PN during surgical intervention. Subjects were randomized to receive either one of the study treatments using an interactive voice or web-based recognition system in accordance with the randomization code. Randomization was further stratified based on the study site and surgical category. Both treatment groups received similar amounts of calories and protein. In addition, the two study treatments contained a similar composition of the amino-acid component. The only difference between the two PN formulations was the lipid constitution. The duration of administration of study treatments was a minimum of 5 days up to a maximum of 14 days after the surgical procedure. The primary efficacy endpoint was serum prealbumin levels on day 5 of the study. Noninferiority was proved if the anti-log of the lower bound of the 95% confidence interval (CI) of the treatment difference was at least 0.80. Other efficacy measures included treatment preparation time; duration to achieve tolerability of oral nutrition; associated infectious complications; length of hospitalization; and laboratory assessment of markers of nutrition, inflammation, metabolism, and oxidative stress. A total of 458 patients were enrolled in the study. The results showed that olive-oil-based 3CBs were non-inferior to soybean-based CoBs, besides being well tolerated. The infection rate was found to be significantly lower in the olive-oil-based 3CB group. Thus, this study may be used as a reference for future research on lipid emulsion and 3CBs.

Here, we present a protocol for a study comparing the efficacy, safety, and delivery of olive-oil-based 3CB and soybean-oil-based CoB formulations in adults requiring parenteral nutrition. The results revealed that olive-oil-based 3CBs is non-inferior and well tolerated compared to soybean formulations.

非経た栄養のためのオリーブオイルベースの3チャンバーバッグの安全性、有効性、および送達を評価する臨床試験

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Psychophysical Tracking Method to Assess Taste Detection Thresholds in Children, Adolescents, and Adults: The Taste Detection Threshold (TDT) Test

This paper describes a two-alternative, forced-choice, staircase, tracking procedure, called the Taste Detection Threshold (TDT) test, that provides a reliable measure of sweet, salty, and umami taste detection thresholds from childhood to adulthood. Advantages of the method include procedures that are identical for children and adults, thus allowing the determination of age-related and individual differences in taste perception, if any, and tasks that can be completed in a relatively short time frame, do not rely on continuous attention or require memorization, control for subjective response biases, and minimize the impact of language development. After a 1 hour fast, participants are presented with pairs of solutions; in each pair, one solution is water, and the other solution contains varying concentrations of the tastant.
Using a whole-mouth tasting method, participants taste each solution (without swallowing and with rinsing between tastings) and then point to the solution with a taste or that tastes different from water. The concentration of the stimulus in the subsequent pair increases after a single incorrect response and decreases after two consecutive correct responses. A reversal occurs when the concentration sequence changes direction. The task is deemed completed after the occurrence of four reversals, provided there are a maximum of two dilution steps between two successive reversals, and the series of reversals do not form an ascending pattern. These additional criteria ensure greater reliability in outcomes. The TDT is then calculated as the geometric mean of the concentrations of the four reversals. This method has real-world relevance as it provides information on a dimension of taste perception that is independent of hedonics, and that can change with aging and certain disease states, making it a valuable psychophysical test.

Psychophysical Tracking Method to Assess Taste Detection Thresholds in Children, Adolescents, and Adults: The Taste Detection Threshold TDT Test

Psychophysical tools measure the functionality of the taste system for both research and health assessment purposes. This paper describes a method to measure taste detection thresholds that can determine the lowest concentration of sucrose, sodium chloride, or monosodium glutamate that can be tasted by individuals as young as 6 years.

小児、青年、成人における味覚検出閾値を評価する精神物理学的追跡法:味覚閾値(TDT)試験

This paper describes a two-alternative, forced-choice, staircase, tracking procedure, called the Taste Detection Threshold (TDT) test, that provides a ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

ラット膝の周期的負荷誘発関節内軟骨病変モデルを生成するための非侵襲的方法

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

ラットの変形性膝関節症に対する標準化されたTuinaマニピュレーション

Tuina Manipulation to Reduce Inflammation and Cartilage Loss in Knee Osteoarthritis Rats

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its mechanism. Therefore, the manipulation of animal models of knee osteoarthritis is critical. This protocol provides a standard process for Tuina manipulation on KOA rats and a preliminary exploration of the mechanism of Tuina for KOA. The press and kneading manipulation method (a kind of Tuina manipulation that refers to pressing and kneading the specific area of the body surface) is applied on 5 acupoints around the knee joint of rats. The force and frequency of the manipulation were standardized by finger pressure recordings, and the position of the rat during manipulation is described in detail in the protocol. The effect of manipulation can be measured by pain behavior tests and microscopic findings in synovial and cartilage. KOA rats showed significant improvement in pain behavior. The synovial tissue inflammatory infiltration was reduced in the Tuina group, and the expression of tumor necrosis factor (TNF)-&#945; was significantly lower. Compared to the control group, chondrocyte apoptosis was less in the Tuina group. This study provides a standardized protocol for Tuina manipulation on KOA rats and preliminary proof that the therapeutic effects of Tuina may be related to reducing synovial inflammation and delayed chondrocyte apoptosis.

著者スポットライト:ラットにおけるTuina操作のメカニズムの理解 

We present a protocol for Tuina manipulation performed on plaster-immobilized-induced knee osteoarthritis rats. Based on the preliminary results, it suggested that the efficacy of the method relied on the reduction of inflammation and cartilage loss.

変形性膝関節症ラットの炎症と軟骨喪失を軽減するためのTuina操作

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its ...