This work was supported by Biotech Risk Assessment Grant Program competitive grand no. 2006-39454-17438 to A. Snow, K. Mercer, and H. Alexander from the United States Department of Agriculture, National Institute of Food and Agriculture. Experiments using this method were conducted at and supported by the University of Kansas Field Station, a research unit of the Kansas Biological Survey and the University of Kansas. The authors would like to thank P. Jourdan and E. Regnier for helpful reviews on earlier versions of this manuscript. Additionally, this work was aided by the contributions of the staff at the University of Kansas Field Station, Waterman Farm at the Ohio State University (OSU), the USDA Ornamental Plant Germplasm Center at OSU, and the Seed Biology Lab in the Department of Horticulture and Crop Science at OSU, especially E. Renze, S. Stieve, A. Evans, and E. Grassbaugh, for technical support.

1.複数の種または単一の種の制御された交雑から種子を収集注：母性（シード生成する）親として野生、ハイブリッド、および作物の種類を使用して、種ヒマワリの1年生内の15のクロスタイプ（ヒマワリ）から種子を使用この例。 <ol><li>生育期の終わりに、標識された袋に成熟種子の頭を収集します。標準形式での親のクロスタイプ（ すなわち 、母性のx父方）で標識された封筒での籾殻と場所、種子からクリーンシード。 </li><li>同一の親のクロスタイプの同数から種子の等量を使用して大規模な封筒で一緒にバルク種子。例えば、同じ母系と父系の両親と10のクロスタイプから100の種子。 （クロスタイプ）の情報を識別して封筒にラベルを付けます。これらの大きな封筒は、第2節に埋葬ストリップを充填で使用するためのシードマスターです。 </li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody&gt; <tr><td></td><td colspan="3"> 母親の親 </td></tr><tr><td> 父方の親 </td><td>ワイルド：WxW </td><td> F 1：WXC </td><td>クロップ：CXC </td></tr><tr><td>ワイルド：WxW </td><td> 0％WxW </td><td> 25％F 1 XW† </td><td> 50％CXW† </td></tr><tr><td> BC：WxF1またはF1xW </td><td> 12.5％WxBC </td><td> 37.5％F 1 XBC </td><td> 62.5％CxBC </td></tr><tr><td> F 1：WXC </td><td> 25％WxF 1† </td><td> 50％F 1 XF 1 </td><td> 75パーセントのCxF 1† </td></tr><tr><td> F 2：F 1 XF 1 </td><td> 25％WxF 2 </td><td> 50％F 1 XF 2 </td><td> 75パーセントのCxF 2 </td></tr><tr><td>クロップ：CXC </td><td> 50％WXC† </td><td> 75％のF 1クロスシー† </td><td> 100％CXC </td></tr></tbody></table> 表1.親のクロストン手受粉。ひまわりの作物野生ハイブリッドクロスタイプから生産YPESはシード埋葬実験で使用するための人工授粉を用いて製造されました。すべてのクロスタイプの場合、母体の親が最初にリストされ、父方の親は、第二記載されています。 †でマークされたクロス型は同じ％の作物の対立遺伝子が異なる母方の両親との相互クロスタイプのペアの一部です。ペース、BA ら ：表は、以前に公開されています。 （2015）15。 2.カスタムシード埋葬ストリップを作成します。 注：この例では、3除去日付トリートメントや15の反復を持っていたので、我々は合計45ストリップを必要としました。この例では、ストリップあたり15区画はので、私たちは15、7×10cmの区画を収容するために十分な細かいメッシュのポリエステル布や蚊帳を必要と使用しています。 図1を参照してください。 <ol><li>各シードストリップのための布の20×10センチメートルのストリップを切断することによって起動します。 </li><li>その後、半分に生地を折る、測定し、区画をマーク。 HIGを使用しましたH-温度グルーガンは、1ショート（10センチメートル）の端をシールします。接着剤が少しではなく、完全に冷えたら、シールを作成するために一緒に生地の側面を押してください。 注意：皮膚との接触が延長される場合は高温接着剤や接着剤銃のヒントは、火傷を引き起こす可能性があります。 </li><li>各区画マークで開いた短い方の端に折り畳まれた縁から、グルーライン。コンパートメント間の穴がないシールを確実にするために接着剤の線に沿って2つのファブリックの側面を押してください。コンパートメントの間の移行種子は実験誤差に寄与する。 注：今の区画が作成されていることを、折り畳まれていないエッジが開いて種子とその識別情報（クロスタイプ名）を受信する準備ままにしてください。 </li><li>ランダムに各ストリップのための区画にシードクロスタイプを割り当てます。 <ol><li>種子の背番号（各区画20は、この例で使用されている）でシードコンパートメントを埋めます。ラベルには、彼らがすることができるようにカットツーフィットプラスチックの庭のダーツに産業マーカーを使用埋葬に耐えます。 注意：代替的標識法を使用することができます。 </li><li>各区画は、種子及びそのラベルで充填された後、高温の接着剤銃で直ちに区画をシール。全体シードストリップが完全に密封されるまで進みます。複製、ブロックおよび/または治療情報と第一の区画で、全体的なストリップにラベルを付けます。 注：私たちは時間的な除去、ブロックを持っていたし、ブロック内のストリップを複製するため、私たちの研究のために、私たちはこの情報のすべてが含まれていました。 </li><li>次のストリップに移動する前に、必要に応じて区分し、スポット接着剤の間のギャップを確認してください。 </li></ol></li></ol><img alt="図1" src="/files/ftp_upload/54663/54663fig1.jpg" /> 図1.埋葬シードストリップ概略図。個々の区画のためのクロスタイプ識別を示す埋葬ストリップの例。母親の親は、第二の列挙され父方の親と最初に表示されます。色は異なる母体の親子関係を示し、作物のためのF 1雑種のための青、野生の黄色、赤と。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54663/54663fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 3.フィールドにシードストリップベリー<ol><li>家のストリップに指定された深さにプロットを掘ります。分析におけるサブプロットとしてストリップはランダム除去日がメインプロットと区画IDとして使用されることを可能にするために配置された個々のブロック（この例では、十字型）にストリップを割り当てます。 </li><li>地球とストリップをカバーしています。カット金属メッシュのハードウェア布が埋設されたストリップの上にプロットし、場所10cmよりも大きくなるように。地球とエッジとカバーの布端を固定するU-ピンを使用してください。 注：このカバーは穴を掘るシード捕食者を排除するためです。別の選択肢として、マーサーら 13を構築し、その分野のLOCAに強烈なゴーファーの圧力に起因するシードストリップを囲まれたハードウェア布の箱を埋める。） </li><li>ストリップの場所と除去の日付が明確に書かれたレコードを補完するために区別するために着色された測量のフラグを配置します。 </li></ol> 4.ストリップを発掘し、種子を評価<ol><li>与えられた除去の日付に割り当てられたシードストリップを掘ります。彼らは種子の評価が行われる実験室に到達するまでクールな湿った環境でストリップを維持します。これは、湿った新聞にストリップを包装及び輸送または翌日配達のためにクーラーに置くことによって達成することができます。 </li><li>ストリップは、外部破片があいまい種子ないことを十分にきれいになるまで水でストリップからの泥や土を洗い流してください。 </li><li>一度にオープンつの区画をカットするはさみを使用してください。発芽した種子をカウントし、それらを削除します。明らかに死んだ種子（ 例えば、腐敗、または腐敗の種子）をカウントします。さらに、未発芽休眠、および死んだ種を区別するために標識、濡れたペトリサイズ吸取紙に未発芽種子を置きます。 <ol><li>発芽してペトリ皿を置きます25°C / 10°C 12時間の昼/夜：標準的な発芽条件のための成長チャンバセットに種子。シード1週間が発芽することを許可します。でもそれ、彼らは野外条件下で発芽しなかったので、これらのような生存したが、未発芽をカウントします。 </li></ol></li><li>成長チャンバ処理後、試験はテトラゾリウムクロリド（TZ）13を用いて生存率を未発芽種子の残り。これを達成するために、AOSAテトラゾリウム試験ハンドブック14を用いた研究の種のためのTZの適切なのパーセント溶液を作ります。この例では、1％溶液が使用されます。 <ol><li>半分に未発芽種子をカットし、半分を置き、胚と胚乳は（種子が浮くことがあり、これは大丈夫です）種子をカバーするのに十分なTZ溶液を含むペトリ皿に表示されました。 </li><li> 30℃に設定したインキュベーターにTZペトリ皿を置き、3時間を待ちます。注：必要であれば、より高い温度は、より速い反応になりますが、過度染色は危険です。 </li></ol></li> &lt;LI&gt;インキュベーターからペトリ皿を削除し、評価します。染色されていない種子が死んでいる一方で、その胚で赤色に染色されている種子は、発芽可能です。マージナル例および特定の種を区別について詳しくは、AOSAテトラゾリウムテストハンドブックを参照してください。 </li></ol>

<ol>
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W., Rapset, M., Lienhard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tetrazolium+test+for+seed+viability.">The tetrazolium test for seed viability.</a> Mississippi Sta Uni Ag Exp Sta Techn Bull. 51, 1-63 (1962).</li><li>Association of Official Seed Analysts. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Tetrazolium Testing Handbook. , (2010).</li><li>Alexander, H. M., Emry, D. J., Pace, B. A., Kost, M. A., Sparks, K. A., Mercer, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+maternal+effects+and+nuclear+genetic+composition+change+across+the+life+cycle+of+crop-wild+hybrids.">Roles of maternal effects and nuclear genetic composition change across the life cycle of crop-wild hybrids.</a> Am J Bot. 10 (7), 1176-1188 (2014).</li><li>Weiss, A. N., Primer, S. B., Pace, B. A., Mercer, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+effects+and+embryo+genetics:+germination+and+dormancy+of+crop-wild+sunflower+hybrids.">Maternal effects and embryo genetics: germination and dormancy of crop-wild sunflower hybrids.</a> Seed Sci Res. 23, 241-255 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

ここでは、フィールド内の予め選択された期間での種子発芽、休眠および多様な種株式の死亡率を観察するために、シード埋葬ストリップを使用するための方法を提示します。個々のパケットは、個々のパケットの作成以上のストリップとコンパートメント構造の（1）の速度にあるのではなくストリップを使用することの利点。 （2）パケットを省略したり、意図せずにいずれかを除去する危険性なしに一つの動きで複数の区画を除去する容易さと速さを。土が硬く、フィールド条件が冷えているときに、ここで示す例で除去日付の2は、冬の間だったように、この方法は、労働と人間のミスの可能性の両方を低減します。種子のストリップはまた、研究者がフィールドにヒューマンエラーによって変更することができないようにして、実験室でのコンパートメントの位置をランダム化することを可能にすることによって、実験の物流を支援します。我々が予測された自然発芽倍の幅を包含除去時間の選択によって種子バンクのダイナミクスにおける当社の例ハイブリッド種子は、種子バンクに固執し、将来の集団に貢献するための可能性について推論を行うことができます。この方法の1つの制限は、区画間の種子の一部の移動が、種子の大きさに応じて、避けられないことです。このため、（およびプロトコルに記載されているように）研究者は、種子の移動を最小限に抑えるために区画間の高温接着剤シールを二重にチェックすることが重要です。 シード埋葬実験といくつかの問題がタイミングについてちゃっかり考えることによって回避することができます。研究種及び研究目的の自然のサイクルに関連した時間に埋葬し、除去の日付を選択します。それは、すぐに自然の種子はできるだけ流した後に植えるのがベストです。除去の日付は通常の発芽挙動の評価のためのピーク実生発生時間の観察に基づいて選択する必要があります。以前の日付の添加はまた、研究者は早期発芽をキャプチャすることができます。ベックause私たちの以前の研究は、いくつかの不適応な発芽は、いくつかのクロスタイプで休眠性の欠如を完了することが原因で発生した、我々は数週間しか埋葬（除去1、晩秋）15、16の後に非常に早期除去の日付を選択したことを示していました。 個々のパケットを超えるストリップの利点は、ダース以上の区画は、埋め込み除去し、灌漑や栄養治療に複数の削除の日付からすべてを含む複雑な実験的なデザインを可能にする、1として評価することができるということです。調べでは、彼らが主な効果であることを理解した上で、最も懸念している治療を可能にするブロックを構築するために世話をする必要があります。私たちの例では、時間をかけて、シード行動を強調したが、他の治療法は、それがフィールドレイアウトの考慮を必要とし、実験的な設計段階でブロック内の配置を複製することになる適用することができます。ランダムブロック内のストリップ埋葬位置を割り当てることにより、除去時間は、主効果として分析することができます。 &lt;評価が始まる前にストリップ全体のためにペトリサイズ吸取紙の前標識されたスタックを準備シードストリップを除去した後、Pクラス= &quot;jove_contentは&quot;&gt;、ヒューマンエラーを低減します。同様に、開いて一度に1つのコンパートメントを評価して精度を維持するのに役立ちます。成長室に未発芽種子を配置すると、昼と夜の温度が研究種のための最適な種子の発芽条件と一致していることを確認してください。標準的な発芽条件（25℃/ 10℃12時間の昼/夜）種の多種多様な適切かもしれないが、これは、すべての種には当てはまりません。 シード染色パターンのTZ処理アプリケーションと評価強く研究結果に影響を与えると考えています。成長チャンバ処理後の未発芽種子を評価する場合、所与の種のためのTZの正確な濃度に関する文献（またはAOSAテトラゾリウムテストハンドブック14）を参照してください。判断しながら、個々のTZステンド秒EEDS、種子の生存率と土壌から出現し、苗を生産することができない場合があり、組織を、呼吸を示すことができる染色した種子-弱を発芽する種子の能力の違いを覚えておくことが重要です。それは本当に休眠種子が最適発芽条件で発芽したままものであると述べ、まだ試験したときにまだ強く生存しています。これらの種子は、永続的シードバンクに貢献し、今後数年間で発芽する可能性が高いだけ種子です。 これらのメソッドのアプリケーションの数は、ここで概説したものを超えても可能です。種子埋葬ストリップは実験単位と実験計画の実質的に任意の数のためにカスタマイズすることができます。彼らは、異なる種、種子の大きさ、または状態/処置を比較するために適用することができます。これらのメソッドの建物は、生態学的に関連するコンテキストで多くの種の基本的な種子生物学の知識を深める可能性を秘めています。

この方法の全体的な目的は、確実に、フィールド条件下で経時的に種子の生存率を評価することです。 土壌シードバンクは、一過性または長年1,2持続し得るいずれかの土壌表面上に、表面のゴミの中、または土壌断面内に分散分散し、実行可能な、まだ未発芽種子の予備です。ここに提示されたものと同様のシード埋葬方法は数十種を使用して17年間の研究に適用されたときに、生存可能な種子は、3試験の種の多くで発見されました。種子休眠は生存実生のための条件の適切な組み合わせは、4を発生するまで、発芽をシードするブロックです。休眠リリースのための外部トリガが発芽することが可能になるまで休眠残って、種子がそのような低い冬の気温、栄養制限、または季節の干ばつなどの過酷な条件を、生き残るために許可することができます。休眠リリースのトリガーはfで左拡張寒さ、化合物への暴露から変化させることができます怒り、または動物の胃の酸5との磨耗や接触による種皮の物理攻撃。発芽手がかりは、属または種特異的であることと、多くの場合、過去の自然淘汰の結果でわかるように、不適応種子発芽が不適切なときに発生し、種子や苗木死亡または悪い苗の成長につながる可能性があることです。休眠は休眠リリース（ 例えば 、物理的休眠、生理的休眠）のメカニズムに基づいて種類数に分類されてきたが、6種子休眠は、少なくともの1植物生物学のトピックを理解まま。したがって、個々の種または関連する生態学的条件の下で種子のグループの状態の評価を可能にするフィールドの研究は、単に実験室での標準的な発芽試験に依存しているものよりも高い説明力を持っています。 既知の種特性の搾取は休眠のメカニズムへの洞察を提供することができます。種子休眠の制御は共同です生理学的および形態学的要因の遺伝的制御を含むmplex、。休眠機構の幅を完全に理解するにはまだ解明されていないが、一般的なモデルは、2つの植物ホルモンジベレリン（GA）とアブシジン酸（ABA）7間のフィードバック関係を含む、浮上しています。 ABAは休眠状態を維持する働きをしながら、彼らの休眠に対する生理的成分を有する種子のためのこの一般化モデルでは、GAは、休眠解除のための信号となります。母性遺伝的影響だけでなく、母体の成長環境は母系生成組織と発生シグナル8を介して、休眠やサイズなどの他の種子の特性に影響を与えることができます。母性発生した外部構造体（または種子被覆材）は、生理的手がかりと組み合わせた時刻に、休眠を維持することができます。母体由来シード材が母植物の遺伝子によって制御されているので、彼らは、種子の実際の核の遺伝子構成を反映していない場合があります。私達は私達を持っていますED作物野生ハイブリッドの配列からヒマワリの1年生の痩果は9,10。このように、多様な種、十字型、または遺伝子型を含む研究デザインについての情報を収集することができますシードの特性上、これらの母体の対胚遺伝的影響を引き出すために交差します種子休眠、発芽および生存の生態と遺伝。 種子発芽および生存の表現型は、人口動態に影響を与えることができる方法の重要な例は、作物野生ハイブリッドゾーンで見ることができます。栽培植物の栽培時の選択はほとんど休眠性を排除し、成長期の外で生き残るために種子の能力を低下させます。しかし、作物の野生ハイブリッドゾーンの栽培と野生型間の遺伝子流動、またはハイブリダイゼーションは、種子バンクのダイナミクスの潜在的な影響で、野生集団に作物の対立遺伝子（または遺伝子変異体）を再導入することができます。栽培と近縁野生種間の雑種は、潜在的に有することができる作物野生ハイブリッドゾーンで発見しますわずか数栽培の外部条件を生き残るために期待される表現型（ 例えば 、冬季）11との中間休眠の表現型の多様性、。 この原稿の目的は、私たちが現場条件の下で彼らの自然な変化を調査するために、異なる期間で発芽、休眠、および種子の種類の範囲の生存を評価することができるシード埋葬ストリップ法を使用して、方法を示すことです。私たちは種子の特性上、母体と胚遺伝的影響に興味を持っているので、この例では、15作物野生ハイブリッドクロスタイプからヒマワリの種を採用しました。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="440">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col span="2" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">Small coin envelopes</td>
			<td style="width:72px;">Any</td>
			<td style="width:64px;"></td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Large coin envelopes</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">fine meshed polyester mosquito netting</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">high-temperature glue gun</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">high-temperature glue stick refills</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Industrial permenant markers</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">plastic garden labels</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">scissors</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Shovel</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Metal mesh hardward cloth</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surveyor&#39;s flags, multiple colors</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Wet newspaper</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">cooler</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">blotter paper</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">petri dishes</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Temp. controlled growth chamber</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">razor blades</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">petri dishes</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tetrazolium chloride</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">water</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">heat incubator</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reliable method for assessing seed germination, dormancy, and mortality under field conditions

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester fabric and glue can be folded and glued to construct a strip of compartments that house seeds and identifying information, while allowing contact with soil leachate, water, microorganisms, and ambient temperature. Strips may be constructed with a wide range of compartment numbers and sizes and allow the researcher to house a variety of genotypes within a single species, different species, or seeds that have experienced different treatments. As opposed to individual seed packets, strips are more easily retrieved as a unit. While replicate packets can be included within a strip, different strips can act as blocks or can be retrieved at different times for observation of seed behavior over time. We used a high temperature glue gun to delineate compartments and sealed the strips once the seed and tags identifying block and removal times were inserted. The seed strips were then buried in the field at the desired depth, with the location marked for later removal. Burrowing animal predators were effectively excluded by use of a covering of metal mesh hardware cloth on the soil surface. After the selected time interval for burial, strips were dug up and seeds were assessed for germination, dormancy and mortality. While clearly dead seeds can often be distinguished from ungerminated living ones by eye, dormant seeds were conclusively identified using a standard Tetrazolium chloride colorimetric test for seed viability.

多様母体の親子と作物の対立遺伝子の割合がクロスタイプ（ 表1）は、パーセントで除去日付を横切って異なった未発芽、発芽、および死んだ種子（ 図2及び3）。第三の除去（スプリング）により未発芽すべての種子が本当に休止状態であることが判明した一方で未発芽種子のTZテストを使用して、我々は、第二の除去（早春）（ 表2）で、いくつかの真の休眠種子を発見しました。 一般的に、低い作物の対立遺伝子の割合は、晩秋に不適応な発芽を減少させた（ 図2）。早春の除去では、すべてのクロスタイプは高い発芽していたが、その割合は死んでいない未発芽（ 図3）が異なっていました。母体の野生のクロスタイプは未発芽残ることが多かった一方で、特に、作物母体の親子関係とのクロスタイプはより高い死亡率を持っていました。ばねによって、発芽は、いくつかのクロスタイプのために減少しました。直感に反するが、これが原因以前の発芽クロスタイプのための埋葬ストリップ内の種子の死亡に起因する可能性が高いです。したがって、死亡率は、より多くの作物のようなクロスタイプ（ すなわち 、より高い作物対立遺伝子の比率を持つもの）作物母方の両親（ 図3）によって生成されるために高かったです<img alt="図2" src="/files/ftp_upload/54663/54663fig2.jpg" /> 晩秋の最初の除去で図2.発芽。最初の除去の日におけるヒマワリ作物野生のクロスタイプの発芽、晩秋インチクロスタイプはマークとして作物対立遺伝子の割合を増加させることにより、y軸上に編成されます。母親の親は、各クロスタイプのために最初に表示されています。同じ文字が続く（SEバー付き）発芽最小二乗手段多重比較のためのテューキー・クレーマー調整を使用して有意差はありません。パック：図は、以前に公開されていますE、 ら。（2015）15。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54663/54663fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/54663/54663fig3.jpg" /> 図3.パーセント発芽、早春（C）、春ための第二の除去（早春）と第3の除去（春）早春（A）、春（B）のために発芽。パーセント、未発芽％ を未発芽、および死亡率 （ D）、および早春（E）とスプリング（F）除去の日付のデッドパーセント。ひまわり作物野生ハイブリッドクロスタイプは、ほとんどの作物のようなy軸の下部にあるy軸と最も野生様の上で、作物の対立遺伝子の割合を増加させることによって編成されています。クロスタイプ母性親が最初に表示されます。最小二乗同じ文字が続く（SEバー付き）、発芽した未発芽とデッドシードするための手段は、多重比較のためのTukey-Kramerの調整を使用して有意差はありません。図は、以前に掲載されました：ペース、 ら（2015）15。。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54663/54663fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> クロスタイプ </td><td> TZ休止 </td><td> 標準誤差 </td></tr><tr><td> WxW </td><td> 0.071 </td><td> 0.0131 </td></tr><tr><td> WxBC </td><td> 0.041 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> WxF1 </td><td> 0.089 </td><td> 0.0136 </td></tr><tr><td> WxF2 </td><td> 0.054 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> F1xW </td><td> 0 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> F1xBC </td><td> 0.013 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> WXC </td><td> 0.075 </td><td> 0.0131 </td></tr><tr><td> F1xF1 </td><td> 0.007 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> F1xF2 </td><td> 0.013 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> CXW </td><td> 0 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> CxBC </td><td> 0 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> F1xC </td><td> 0 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> CxF1 </td><td> 0 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> CxF2 </td><td> 0 </td><td> 0.0126 </td></tr><tr><td> CXC </td><td> 0 </td><td> 0.0126 </td></tr></tbody></table> 永続的シードバンクに貢献する可能性が高い表2種子。最小二乗は、第二（早春）除去における未発芽種子の割合休眠端数するための手段。種子は、テトラゾリウム塩素を使用して、生存可能であると判断されました良好な発芽条件でのインキュベーション後のIDE。 。、ら （2015）15ペース：表は、以前に公開されています。

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Reliable Method for Assessing Seed Germination, Dormancy, and Mortality under Field Conditions

ここでは、埋葬、標識されたシードストリップ及びテトラゾリウムクロリド（TZ）生存性テストを使用して、フィールド条件の下で種子生存率、発芽と休眠を評価するためのプロトコルを提示します。

フィールド条件の下で種子発芽、休眠、および死亡率を評価するための信頼性の高い方法

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester ...

reliable-method-for-assessing-seed-germination-dormancy-mortality

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Environment

10.4K ビュー.  Ohio State University. ここでは、埋葬、標識されたシードストリップ及びテトラゾリウムクロリド（TZ）生存性テストを使用して、フィールド条件の下で種子生存率、発芽と休眠を評価するためのプロトコルを提示します。 

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Surface Renewal: An Advanced Micrometeorological Method for Measuring and Processing Field-Scale Energy Flux Density Data

Advanced micrometeorological methods have become increasingly important in soil, crop, and environmental sciences. For many scientists without formal training in atmospheric science, these techniques are relatively inaccessible. Surface renewal and other flux measurement methods require an understanding of boundary layer meteorology and extensive training in instrumentation and multiple data management programs. To improve accessibility of these techniques, we describe the underlying theory of surface renewal measurements, demonstrate how to set up a field station for surface renewal with eddy covariance calibration, and utilize our open-source turnkey data logger program to perform flux data acquisition and processing. The new turnkey program returns to the user a simple data table with the corrected fluxes and quality control parameters, and eliminates the need for researchers to shuttle between multiple processing programs to obtain the final flux data. An example of data generated from these measurements demonstrates how crop water use is measured with this technique. The output information is useful to growers for making irrigation decisions in a variety of agricultural ecosystems. These stations are currently deployed in numerous field experiments by researchers in our group and the California Department of Water Resources in the following crops: rice, wine and raisin grape vineyards, alfalfa, almond, walnut, peach, lemon, avocado, and corn.

Surface renewal is a micrometeorological method that is being used increasingly to determine energy fluxes, but its technical complexity makes it inaccessible to a broad audience. We describe the steps needed to set up and calibrate a surface renewal field station, to acquire and process data, and to correctly interpret results.

Advanced micrometeorological methods have become  increasingly important in soil, crop, and environmental sciences.  For many scientists without formal ...

環境学

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

Maize is a major cereal crop worldwide. However, susceptibility to biotrophic pathogens is the primary constraint to increasing productivity. U. maydis is a biotrophic fungal pathogen and the causal agent of corn smut on maize. This disease is responsible for significant yield losses of approximately $1.0 billion annually in the U.S.1 Several methods including crop rotation, fungicide application and seed treatments are currently used to control corn smut2. However, host resistance is the only practical method for managing corn smut. Identification of crop plants including maize, wheat, and rice that are resistant to various biotrophic pathogens has significantly decreased yield losses annually3-5. Therefore, the use of a pathogen inoculation method that efficiently and reproducibly delivers the pathogen in between the plant leaves, would facilitate the rapid identification of maize lines that are resistant to U. maydis. As, a first step toward indentifying maize lines that are resistant to U. maydis, a needle injection inoculation method and a resistance reaction screening method was utilized to inoculate maize, teosinte, and maize x teosinte introgression lines with a U. maydis strain and to select resistant plants.
Maize, teosinte and maize x teosinte introgression lines, consisting of about 700 plants, were planted, inoculated with a strain of U. maydis, and screened for resistance. The inoculation and screening methods successfully identified three teosinte lines resistant to U. maydis. Here a detailed needle injection inoculation and resistance reaction screening protocol for maize, teosinte, and maize x teosinte introgression lines is presented. This study demonstrates that needle injection inoculation is an invaluable tool in agriculture that can efficiently deliver U. maydis in between the plant leaves and has provided plant lines that are resistant to U. maydis that can now be combined and tested in breeding programs for improved disease resistance.

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

The use of a needle injection method to inoculate maize and teosinte plants with the biotrophic pathogen Ustilago maydis is described. The needle injection inoculation method facilitates the controlled delivery of the fungal pathogen in between the plant leaves where the pathogen enters the plant through the formation of appresoria. This method is highly efficient, enabling reproducible inoculations with U. maydis.

トウモロコシとテオシンテ線における ウスチラゴ の病原性を評価するための迅速かつ効率的な方法

Maize is a major cereal crop worldwide. However, susceptibility to biotrophic pathogens is the primary constraint to increasing productivity. U. maydis is ...

Preparation and Testing of Plant Seed Meal-based Wood Adhesives

Recently, the interest in plant seed meal-based products as wood adhesives has steadily increased, as these plant raw materials are considered renewable and environment-friendly. These natural products may serve as alternatives to petroleum-based adhesives to ease environmental and sustainability concerns. This work demonstrates the preparation and testing of the plant seed-based wood adhesives using cottonseed and soy meal as raw materials. In addition to untreated meals, water washed meals and protein isolates are prepared and tested. Adhesive slurries are prepared by mixing a freeze-dried meal product with deionized water (3:25 w/w) for 2 hr. Each adhesive preparation is applied to one end of 2 wood veneer strips using a brush. The tacky adhesive coated areas of the wood veneer strips are lapped and glued by hot-pressing. Adhesive strength is reported as the shear strength of the bonded wood specimen at break. Water resistance of the adhesives is measured by the change in shear strength of the bonded wood specimens at break after water soaking. This protocol allows one to assess plant seed-based agricultural products as suitable candidates for substitution of synthetic-based wood adhesives. Adjustments to the adhesive formulation with or without additives and bonding conditions could optimize their adhesive properties for various practical applications.

To facilitate the effort in seeking more economic and environment-friendly formulations of natural product-based wood adhesives, this work demonstrates the preparation and testing of plant seed-based wood adhesives. This protocol allows one to assess plant seed-based agricultural products as suitable candidates for the substitution of synthetic-based wood adhesives.

植物種子ミールベースの​​木材接着剤の調製および試験

Recently, the interest in plant seed meal-based products as wood adhesives has steadily increased, as these plant raw materials are considered renewable ...

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% fine dust formation within the EU15. But NH3 emissions also mean a considerable loss of nutrients. Many studies on NH3 emission from organic and mineral fertilizer application have been performed in recent decades. Nevertheless, research related to NH3 emissions after application fertilizers is still limited in particular with respect to relationships to emissions, fertilizer type, site conditions and crop growth. Due to the variable response of crops to treatments, effects can only be validated in experimental designs including field replication for statistical testing. The dominating ammonia loss methods yielding quantitative emissions require large field areas, expensive equipment or current supply, which restricts their application in replicated field trials. This protocol describes a new methodology for the measurement of NH3 emissions on many plots linking a simple semi-quantitative measuring method used in all plots, with a quantitative method by simultaneous measurements using both methods on selected plots. As a semi-quantitative measurement method passive samplers are used. The second method is a dynamic chamber method (Dynamic Tube Method) to obtain a transfer quotient, which converts the semi-quantitative losses of the passive sampler to quantitative losses (kg nitrogen ha-1). The principle underlying this approach is that passive samplers placed in a homogeneous experimental field have the same NH3 absorption behavior under identical environmental conditions. Therefore, a transfer co-efficient obtained from single passive samplers can be used to scale the values of all passive samplers used in the same field trial. The method proved valid under a wide range of experimental conditions and is recommended to be used under conditions with bare soil or small canopies (&#60;0.3 m). Results obtained from experiments with taller plants should be treated more carefully.

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Ammonia emissions are a major threat to the environment by eutrophication, soil acidification and fine particle formation and stem mainly from agricultural sources. This method allows ammonia loss measurements in replicated field trials enabling statistical analysis of emissions and of relationships between crop development and emissions.

キャリブレーションされたパッシブサンプリング - NHのマルチプロット場計測<sub&gt; 3</sub&gt;ダイナミックチューブ法の組み合わせによる排出量およびパッシブサンプラー

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% ...

Sediment Core Sectioning and Extraction of Pore Waters under Anoxic Conditions

We demonstrate a method for sectioning sediment cores and extracting pore waters while maintaining oxygen-free conditions. A simple, inexpensive system is built and can be transported to a temporary work space close to field sampling site(s) to facilitate rapid analysis. Cores are extruded into a portable glove bag, where they are sectioned and each 1-3 cm thick section (depending on core diameter) is sealed into 50 ml centrifuge tubes. Pore waters are separated with centrifugation outside of the glove bag and then returned to the glove bag for separation from the sediment. These extracted pore water samples can be analyzed immediately. Immediate analyses of redox sensitive species, such as sulfide, iron speciation, and arsenic speciation indicate that oxidation of pore waters is minimal; some samples show approximately 100% of the reduced species, e.g. 100% Fe(II) with no detectable Fe(III). Both sediment and pore water samples can be preserved to maintain chemical species for further analysis upon return to the laboratory.

A protocol for sectioning sediment cores and extracting pore waters under anoxic conditions in order to permit analysis of redox sensitive species in both solids and fluids is presented.

無酸素状態下での堆積物コアセクショニングと間隙水の抽出

We demonstrate a method for sectioning sediment cores and extracting pore waters while maintaining oxygen-free conditions. A simple, inexpensive system is ...

Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropod populations in rice. When used in combination with an enclosure, application of this sampling device provides absolute estimates of the populations of arthropods as numbers per standardized sampling area. The sampling efficiency depends critically on the sampling duration. In a mature rice crop, a two-minute sampling in an enclosure of 0.13 m2 yields more than 90% of the arthropod population. The device also allows sampling of arthropods dwelling on the water surface or the soil in rice paddies, but it is not suitable for sampling fast flying insects, such as predatory Odonata or larger hymenopterous parasitoids. The modified blower-vac is simple to construct, and cheaper and easier to handle than traditional suction sampling devices, such as D-vac. The low cost makes the modified blower-vac also accessible to researchers in developing countries.

Assessment of arthropod abundance in crops is critical for investigating population dynamics and species interactions. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropods in rice.

節足動物のフィールドサンプリングのためのリーフブロワー-VACの変更と応用

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

Measuring and Mapping Patterns of Soil Erosion and Deposition Related to Soil Carbonate Concentrations Under Agricultural Management

Spatial patterns of soil erosion and deposition can be inferred from differences in ground elevation mapped at appropriate time increments. Such changes in elevation are related to changes in near-surface soil carbonate (CaCO3) profiles. The objective is to describe a simple conceptual model and detailed protocol for repeatable field and laboratory measurements of these quantities. Here, accurate elevation is measured using a ground-based differential global positioning system (GPS); other data acquisition methods could be applied to the same basic method. Soil samples are collected from prescribed depth intervals and analyzed in the lab using an efficient and precise modified pressure-calcimeter method for quantitative analysis of inorganic carbon concentration. Standard statistical methods are applied to point data, and representative results show significant correlations between changes in soil surface layer CaCO3 and changes in elevation consistent with the conceptual model; CaCO3 generally decreased in depositional areas and increased in erosional areas. Maps are derived from point measurements of elevation and soil CaCO3 to aid analyses. A map of erosional and depositional patterns at the study site, a rain-fed winter wheat field cropped in alternating wheat-fallow strips, shows the interacting effects of water and wind erosion affected by management and topography. Alternative sampling methods and depth intervals are discussed and recommended for future work relating soil erosion and deposition to soil CaCO3.

Spatial patterns of soil erosion and deposition can be inferred from differences in ground elevation mapped at appropriate time increments. Such changes in elevation are related to changes in near-surface soil carbonates. Repeatable methods for field and laboratory measurements of these quantities and data analysis methods are described here.

測定と土壌侵食と堆積土炭酸濃度農業経営に関連のパターンのマッピング

Spatial patterns of soil erosion and deposition can be inferred from differences in ground elevation mapped at appropriate time increments. Such changes ...

A Flexible Low Cost Hydroponic System for Assessing Plant Responses to Small Molecules in Sterile Conditions

A wide range of studies in plant biology are performed using hydroponic cultures. In this work, an in vitro hydroponic growth system designed for assessing plant responses to chemicals and other substances of interest is presented. This system is highly efficient in obtaining homogeneous and healthy seedlings of the C3 and C4 model species Arabidopsis thaliana and Setaria viridis, respectively. The sterile cultivation avoids algae and microorganism contamination, which are known limiting factors for plant normal growth and development in hydroponics. In addition, this system is scalable, enabling the harvest of plant material on a large scale with minor mechanical damage, as well as the harvest of individual parts of a plant if desired. A detailed protocol demonstrating that this system has an easy and low-cost assembly, as it uses pipette racks as the main platform for growing plants, is provided. The feasibility of this system was validated using Arabidopsis seedlings to assess the effect of the drug AZD-8055, a chemical inhibitor of the target of rapamycin (TOR) kinase. TOR inhibition was efficiently detected as early as 30 min after an AZD-8055 treatment in roots and shoots. Furthermore, AZD-8055-treated plants displayed the expected starch-excess phenotype. We proposed this hydroponic system as an ideal method for plant researchers aiming to monitor the action of plant inducers or inhibitors, as well as to assess metabolic fluxes using isotope-labeling compounds which, in general, requires the use of expensive reagents.

A simple, versatile, and low-cost in vitro hydroponic system was successfully optimized, enabling large-scale experiments under sterile conditions. This system facilitates the application of chemicals in a solution and their efficient absorption by roots for molecular, biochemical, and physiological studies.

無菌状態で小さな分子に対する植物の反応を評価するための柔軟な低コスト化の養液栽培システム

A wide range of studies in plant biology are performed using hydroponic cultures. In this work, an in vitro hydroponic growth system designed for ...

Laboratory and Field Protocol for Estimating Sheet Erosion Rates from Dendrogeomorphology

Sheet erosion is among the crucial drivers of soil degradation. Erosion is controlled by environmental factors and human activities, which often lead to severe environmental impacts. The understanding of sheet erosion is, consequently, a worldwide issue with implications for both environment and economies. However, the knowledge on how erosion evolves in space and time is still limited, as well as its effects on the environment. Below, we explain a new dendrogeomorphological protocol for deriving eroded soil thickness (Ex) by acquiring accurate microtopographic data using both terrestrial laser scanning (TLS) and microtopographic profile gauges. Additionally, standard dendrogeomorphic procedures, dependent on anatomical variations in root rings, are utilized to establish the timing of exposure. Both TLS and microtopographic profile gauges are used to obtain ground surface pro&#64257;les, from which Ex is estimated after the threshold distance (TD) is determined, i.e., the distance between the root and the sediment knickpoint, which allows de&#64257;ning the lowering of the ground surface caused by sheet erosion. For each profile, we measured the height between the topside of the root and a virtual plane tangential to the ground surface. In this way, we intended to avoid small-scale impacts of soil deformation, which may be due to pressures exerted by the root system, or by the arrangement of exposed roots. This may provoke small amounts of soil sedimentation or erosion depending on how they physically affect the surface runoff. We demonstrate that an adequate microtopographic characterization of exposed roots and their associated ground surface is very valuable to obtain accurate erosion rates. This finding could be utilized to develop the best management practices designed to eventually halt or perhaps, at least, lessen soil erosion, so that more sustainable management policies can be put into practice.

Characterizing erosion from dendrogeomorphology has usually focused on accurately finding the starting time of root exposure, by examining macroscopic or cell level changes caused by exposure. Here, we offer a detailed description of different novel techniques to obtain more precise erosion rates from highly accurate microtopographic data.

実験室およびフィールド プロトコル Dendrogeomorphology からシート侵食速度の推定

Sheet erosion is among the crucial drivers of soil degradation. Erosion is controlled by environmental factors and human activities, which often lead to ...

Assessing the Particulate Matter Removal Abilities of Tree Leaves

Based on the conventional cleaning methods (water cleaning (WC) + brush cleaning (BC)), this study evaluated the influence of ultrasonic cleaning (UC) on collecting various sized particulate matter (PM) retained on leaf surfaces. We further characterized the retention efficiency of leaves to various sized PM, which will help to assess the abilities of urban trees to remove PM from ambient air quantitatively. 
Taking three broadleaf tree species (Ginkgo biloba, Sophora japonica, and Salix babylonica) and two needleleaf tree species (Pinus tabuliformis and Sabina chinensis) as the research objects, leaf samples were collected 4 days (short PM retention period) and 14 days (long PM retention period) after the latest rainfall. PM retained on the leaf surfaces was collected by means of WC, BC, and UC in sequence. Then, retention efficiencies of leaves (AEleaf) to three types of the various sized PM, including easily removable PM (ERP), difficult-to-remove PM (DRP), and totally removable PM (TRP), were calculated. Only around 23%-45% of the total PM retained on leaves could be cleaned off and collected by WC. When the leaves were cleaned through WC+BC, the underestimation of the PM retention capacity of different tree species was in the range of 29%-46% for various sized PM. Almost all PM retained on leaves could be removed if UC was supplemented to WC+BC. 
In conclusion, if the UC was complemented after the conventional cleaning methods, more PM on leaf surfaces could be eluted and collected. The procedure developed in this study can be used for assessing the PM removal abilities of different tree species.

The ultrasonic cleaning method was applied to elute the particulate matter (PM) retained on leaf surfaces after PM was eluted by the conventional cleaning methods (water cleaning only or water cleaning plus brush cleaning). The methodology can help to improve the estimation accuracy for PM retention capacity of leaves.

葉の木の粒子状物質の除去能力を評価します。

Based on the conventional cleaning methods (water cleaning (WC) + brush cleaning (BC)), this study evaluated the influence of ultrasonic cleaning (UC) on ...

フィールド条件の下で種子発芽、休眠、および死亡率を評価するための信頼性の高い方法

要約

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この動画の章

Surface Renewal: An Advanced Micrometeorological Method for Measuring and Processing Field-Scale Energy Flux Density Data

トウモロコシとテオシンテ線におけるウスチラゴの病原性を評価するための迅速かつ効率的な方法

植物種子ミールベースの木材接着剤の調製および試験

キャリブレーションされたパッシブサンプリング - NHのマルチプロット場計測

無酸素状態下での堆積物コアセクショニングと間隙水の抽出

節足動物のフィールドサンプリングのためのリーフブロワー-VACの変更と応用

測定と土壌侵食と堆積土炭酸濃度農業経営に関連のパターンのマッピング

無菌状態で小さな分子に対する植物の反応を評価するための柔軟な低コスト化の養液栽培システム

実験室およびフィールドプロトコル Dendrogeomorphology からシート侵食速度の推定

葉の木の粒子状物質の除去能力を評価します。

フィールド条件の下で種子発芽、休眠、および死亡率を評価するための信頼性の高い方法

要約

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Surface Renewal: An Advanced Micrometeorological Method for Measuring and Processing Field-Scale Energy Flux Density Data

トウモロコシとテオシンテ線における ウスチラゴ の病原性を評価するための迅速かつ効率的な方法

植物種子ミールベースの​​木材接着剤の調製および試験

キャリブレーションされたパッシブサンプリング - NHのマルチプロット場計測

無酸素状態下での堆積物コアセクショニングと間隙水の抽出

節足動物のフィールドサンプリングのためのリーフブロワー-VACの変更と応用

測定と土壌侵食と堆積土炭酸濃度農業経営に関連のパターンのマッピング

無菌状態で小さな分子に対する植物の反応を評価するための柔軟な低コスト化の養液栽培システム

実験室およびフィールド プロトコル Dendrogeomorphology からシート侵食速度の推定

葉の木の粒子状物質の除去能力を評価します。

トウモロコシとテオシンテ線におけるウスチラゴの病原性を評価するための迅速かつ効率的な方法

植物種子ミールベースの木材接着剤の調製および試験

実験室およびフィールドプロトコル Dendrogeomorphology からシート侵食速度の推定