この方法は、ナノ医薬品の安全性に関する医療分野での回答に役立ちます。この技術の利点は、それが標準であり、製品の評価のために世界的に使用されている、ナノ医薬品に。この手順のデモンストレーションは、ナノテクノロジー特性評価ラボのバリー・ネウンです。
キャリブレーション標準調製には、900マイクロリットルのリムルス・アメボサイト・ライセートまたはLAL等級水を使用してください。100マイクロリットルの対照標準のendotoxinを、必要に応じて多くの中間希釈液を調製し、ミリリットル当たり1個の内毒素単位の濃度を有する校正規格の調製を可能とする。次に、900マイクロリットルのLAL等級水を使用し、1ミリリットルキャリブレーション基準あたり1つの内毒素単位の100マイクロリットルを使用して、ミリリットル当たり0.1の内毒素単位の濃度で、第2の校正基準を調製する。
次に、シリアル10倍希釈を繰り返して、2つの低いキャリブレーション基準を準備します。0001から1ミリリットル当たり1個の内毒素単位までの範囲の合計4つの校正基準を得た。ミリリットル品質管理あたり05内毒素単位を調製するために、コントロール標準のエンドトキシン溶液のミリリットル当たりの1つの内毒素単位の50マイクロリットルを、950マイクロリットルのLAL等級水と組み合わせます。
ソフトウェアの次の設定を選択し、テンプレートを作成します。[データの収集] を選択し、[一般] タブにテスト ID とデータ グループを入力します。ハードウェアタブで、計測器の種類と LAL 方式を選択し、シリアル番号、システム ID、およびシリアル ポート情報が画面に表示されることを確認します。
[大丈夫]を2回クリックして、機器の選択と計測器との通信を確認し、サンプルをテストする順序と同じ順序でサンプルIDを入力します。次に、デフォルトのボタンを使用して、負の制御標準曲線とテストサンプルを入力します。適切な量の負の制御校正基準を追加し、品質管理を重複した事前ラベル付きガラス管に追加します。
そして、最初のテストの下品にLALの適切な量を追加します。短い間に下品を渦し、バイアルを計器カルーセルの適切なテストスロットに入れる。サンプルをロードする前に、実証したように、テストナノ材料の希釈を最大有効希釈内で行います。
05 エンドトキシン単位を 1 ミリリットルの阻害増強制御を調製するには、対照標準エンドトキシン溶液のミリリットル当たり 1 つのエンドトキシン単位の 25 マイクロリットルを、所定の希釈時に 475 マイクロリットルの試験ナノ材料と組み合わせます。ボルテックスの後、適切なイノベーションエンハンスメントコントロールと、スパイクされていないスタディサンプルを機器にロードします。その後、アリコートアンスパイクとスパイクナノ材料は、事前に標識されたチューブに特定の希釈で。
渦を起たし、計器カルーセルにロードする前に。ゲルクロットLALを実行するには、制御標準の内毒素を4つのラムダの最終濃度に調製し、100マイクロリットルの標準を100マイクロリットルの水と組み合わせるか、サンプルをテストして対照標準のエンドトキシン2つのラムダの最終濃度を達成する。各ラムダ希釈液にリジンの100マイクロリットルを加えます。
チューブを短時間渦に入れ、チューブのラックを摂氏37度の水浴に1時間置きます。インキュベーションの最後に、滑らかな動きでチューブを反転し、固い血栓のプラス、血栓なし、または緩い血栓の場合はマイナスを使用して結果を手動で記録します。この代表的な分析では、PEGylateedリポソームドキソルビシンは希釈5で発癌性LALを妨害したが、この干渉は高い希釈で克服された。
スパイク回収は、濁度および発色性LALにおける希釈50および500、ならびに希釈5において、濁度LALにおいて製剤が試験された場合に50〜200%であった。希釈係数によって調整した場合、結果は両方のエッセイにおける妄想間で一貫していた。さらに、結果は3つのエッセイ形式の間で一貫していました。
各サンプルには独自の希釈液の範囲があり、各LALフォーマットはドキシンおよびライセートの制御標準を使用し、希釈液を調製するために使用される管を使用し、各LALエッセイごとに異なる反応を行うことを覚えておいてください。この手順では、材料に関する追加の質問に答えるために行うことができるような他の方法は、その開発後、この技術は、縫合糸およびナノ医学の分野への道を開き、ヒトにおけるナノ技術製剤の医療応用を探求し、非ヒト霊長類、ウサギ、犬、ラットを含むがこれらに限定されない臨床モデルを示した。ドキシンで作業することは非常に危険であり、個人的な保護具を着用するなどの予防措置は、常にこの手順を実行している間に取られるべきであることを忘れないでください。
