腰椎不安定性のマウスモデル

これは、マウスモデルを誘導する手術であり、腰椎間椎間板変性関連研究の代替手段を提供する。この堅牢なLSIモードは、特別な機器を必要としません。再現性があり、比較的短時間で椎間板変性を誘導するために使用できます。

切開深部と出血を制御し、各間耳間プロセスの切除を行うことは、実験の成功の移植のための2つの重要な費用です。ペダル反射への応答の欠如を確認した後、麻酔をかけた8週齢、男性、C57黒6マウスをスペリン位置の外科パッドに置き、動物の目に軟膏を塗布する。小さな動物トリマーを使用して、下部胸部領域から仙骨領域の上部まで外科領域を剃り、組織拭きで剃った毛皮を取り除きます。

ガーゼを使用して剃った領域に脱毛クリームを塗布し、3分以上後にクリームを取り除き、露出した皮膚を0.9滅菌生理食塩水の2ミリリットルで洗い流します。その後、カスタムメイドの外科用円筒形パッドを腹部の下に置き、腰椎を上げます。L3およびL5椎骨を露出させるためには、人差し指を使用して腰椎および椎骨の皮下棘プロセスに触れ、胸椎および仙椎のプロセスを比較して腰椎領域を同定する。

75%アルコールで皮膚をすすい、解剖顕微鏡を使用してメスを使用して、中胸部から股関節までの腰部に3〜4センチメートルの中線皮膚切開を行います。脊柱の両側のL3からL5までの棘プロセスに沿って浅い後部麻痺を作るために先端に挿入された後筋膜のV字形によって腰椎を識別し、スカルプレルを使用して、左右にL3からL5までの浅い後部麻痺を作る。次に、2組の眼筋鉗子を使用して筋肉層を分離し、L3をL5の棘プロセスおよび上頭靭帯に曝露する。

個々のスピナスプロセスを分離するには、静脈シヤを使用して、間緊張靭帯を切断し、L3からL5のスピンスプロセスおよび間緊張靭帯を切除する。その後、無菌番号5シルク編組縫合糸を使用して、椎体筋を再び取り付けずに皮膚切開を閉じ、クロルテトラサイクリン塩酸軟膏を外科部位に塗布する。3Dヒストモルフォメトリック解析では椎間板測定が可能で、3D構造解析では組織全体の体積を定量できます。

椎間板容積は、手術後1週間で有意に増加し、処置後2~16週が減少し、同じ期間に測定された椎間板の高さの減少と一致する。脳端板内の空洞の増加は、0.089以上の骨膜分離値の増加率と手術後のエンドプレート体積の有意な増加によって定量化されるようにLSIマウスでも観察される。モデルエンドプレートは同様の表現型を示し、LSIがエンドプレート肥大およびキャビティ数の増加を招くことを示す。

L5椎骨容積は、16週で観察された統計的な違いを伴う術後のわずかに増加する。骨と組織の総体積比の有意な減少は、手術後16週も存在し、LSIが後の段階で椎骨骨喪失を引き起こすことを示す。LSIエンドプレートで認められる破骨細胞の数が増加したLSI動物においても、細胞内の胞子の減少が促進される。

このモデルは、5つ目の腰椎のみ、または第1腰部から第5腰部に異なる数の椎骨を取り付けることによって変更できます。