果物の香りを改善することは、繁殖プログラムの主な目的の一つです。そのためには、果物中の揮発性成分を測定できる信頼性の高い技術が必要です。この技術は速く、半自動化され、1日あたり22までのサンプルを測定することを可能にする。
また、それは比較的安価であり、最小限のサンプル処理を必要とします。この方法は、経済的に重要なベリー作物など、すべての果物種に簡単に適用することができる。また、検出された化合物のライブラリーサイズを容易に大きくすることができる。
まず、ウェイド冷凍サンプルを含む5ミリリットルのチューブに塩化ナトリウム溶液を1ミリリットル加えます。サンプルが完全に解凍され、均質化されるまでチューブを振ります。その後、室温で5分間5,000回gで遠心分離機を行う。
1,000マイクロリットルピペットチップの端を切り、ヘッドスペースファイルを含む塩化ナトリウムに上清に転送するためにそれを使用します。ヘッドスペースファイルを含むサンプルごとに、5マイクロリットルの内部標準を追加します。閉じたヘッドスペースファイルをGC-MSオートサンプラーに室温で置き、HS-SPME/GC-MSを自動実行し、生物学的複製がオートサンプラーの連続した位置に配置されないようにします。
17回G.17回で攪拌して52°Cでヘッドスペースファイルを10分間事前にインキュベートし、SPMEデバイスをバイアルに挿入してヘッドスペースにファイバーを露出させ、17倍のGで50°CでVOC抽出を行います。その後、250°Cで5分間窒素でSPMEクリーニングステーションで繊維をきれいにします。検出原稿に記載されているように、イオントラップ質量分析計に結合されたガスクロマトグラフでVOCを分析します。
生の GC-MS プロファイル ファイルを開きます。化合物を同定するには、保持時間、質量スペクトル、コヴァッツリニアリテンションインデックスを、正規の標準から得られた保持インデックスと比較します。各商業規格について、イオンを充電する最も豊富な質量で保持時間にアポイントを付けます。
次に、各 VOC に対して特定の M by Z イオンを選択します。バッチ効果補正の場合、各サンプルのVOCピーク領域を、同じ実行で分析したコントロールサンプル内の対応するピーク領域に正規化します。
熟したブラックカラントフルーツ揮発性全イオンクロマトグラムプロファイルHS-SPME/GC-MSによって得られた63のVOCを同定した、エステル、アルデヒド、アルコール、ケトン、テルペンおよびフラン類は、ベリー果実種をプロファイリングするために開発されたライブラリに基づく。観察された最も豊富なピークのいくつかは、2つのモノテルペン、リナロールとテルピネオール、および2つのC6化合物、2-ヘキセナルおよび3-ヘキセナルに対応しています。純粋な商業規格のスペクトルとの比較で黒電流プロファイルから得られた質量スペクトルは、2-ヘキセナルおよびテルピネオールについて示されている。
4つの異なる黒電流品種のVOCプロファイルのPCAは、PC1がその位置に基づいてサンプルを分離するので、環境が揮発性含有量に強く影響することを示した。ベン・ティランは残りの品種から明確に分離しているので、効果的な遺伝子型はPC2で観察することができる。4つの評価された黒い電流品種におけるリナロールと2-ヘキセナルの相対的な含有量は、リナロール含有量が一般的にスコットランドよりもポーランドで高かったのに対し、2-ヘキセナルは反対の傾向を示したことを確認する。
リナロールの割合はベン・ティラン品種で最も高く、2-ヘキセナルの割合はベン・トロン品種で最も高かった。適切な揮発性抽出を保証するために、細かい粉末に粉砕し、凍結材料から始めることが重要です。抽出したら、できるだけ早く、サンプルを自動サンプラーに入れるべきです。
この方法は、他の代謝プラットフォームと組み合わせて、他の重要な代謝を同定し、食物味または栄養価について、増強された有機的特性を有する品種を繁殖させることができる。
