我々は、エピソームリプログラミングによりヒトポドサイトをヒト誘導多能性幹細胞に再プログラミングすることによりヒトポドサイトを作製するためのプロトコルを記載する。これらの細胞は、ポドサイトの食品プロセスおよびポドサイト特異的マーカーの発現の点で、不死化ポドサイトよりもはるかによくin vivoポドサイトに似ています。足細胞は終末分化細胞です。
したがって、これらの細胞はもはや増殖せず、細胞培養における初代足細胞分析は制限される。細胞数が限られているという問題は、条件付きで不死化したポドサイトを使用することで克服されましたが、これらのポドサイトは脱分化した表現型と挙動を示し、基礎研究での使用に疑問を投げかけています。人工多能性幹細胞の助けを借りて、ポドサイトは、明確な食物プロセスおよびポドサイト特異的マーカーの発現を含む典型的なポドサイト形態を有するほぼ無制限の細胞数でin vitroで生成することができる。
患者特異的幹細胞を使用して足細胞に分化する場合、エクスビボで細胞の疾患特異的変化を研究することができる。症例の場合、最初の皮膚生検は遺伝性足細胞疾患の患者から採取された。私たちのプロトコルで生成された足細胞は、患者の突然変異を持つパーソナライズされた罹患細胞です。
したがって、これらの細胞は、個別のアプローチでポドサイト疾患および潜在的な治療物質を研究するための改良されたex vivoモデルを表しています。