작업 모드에 Situ 심장 관류 Ex normothermic: 심장 기능 및 대사 평가

요약

Normothermic 전 situ 심장 관류 (ESHP) 치는, 반 생리 적인 상태에서 마음을 유지 합니다. 작업 모드에서 수행 될 때 ESHP 심장 기능 및 장기 생존을 기증자의 정교한 평가 수행할 수 있는 기회를 제공 합니다. 여기, 우리는 ESHP 동안 심근 성능 평가 대 한 우리의 방법을 설명합니다.

초록

(냉장, CS), 장기 보존을 위한 현재 표준 방법 안전 보존 시간을 제한 하 고 불리 한 후 이식 결과의 위험을 증가 하는 추 허 혈의 기간을 제공 합니다. 또한, CS의 정적 자연 보존 간격 동안 기관 평가 또는 개입에 대 한 허용 하지 않습니다. Normothermic 전 situ 심장 관류 (ESHP)은 찬 허 혈 심장에 산소, 영양분이 풍부한 perfusate를 제공 하 여 최소화 기증된 심장의 보존을 위한 새로운 방법입니다. ESHP 비 열 등으로 표시 되었습니다 표준 기준 기증자의 보존에 CS로 마음 그리고 죽음의 순환 결정 후 기증 하는 마음의 임상 이식 용이 하 게 또한 있다. 현재, 임상만 사용할 수 있습니다 ESHP 장치 심근 성능 평가 제한 언로드된, 비 작업 상태, 마음 perfuses. 반대로, 작업 모드에서 ESHP 기능 및 대사 매개 변수 생리 적인 조건 하에서 평가 의해 심장 성능 종합 평가 대 한 기회를 제공 한다. 또한, 이전 실험 연구는 ESHP 작업 모드에서 향상 된 기능 보존에 발생할 수 있습니다 제안 했다. 여기, 우리 다른 동물 모델 및 심장 크기에 대 한 재현은 대형 포유 동물 (돼지) 모델에 심장의 원래의 관류 ex에 대 한 프로토콜을 설명 합니다. 이 ESHP 장치에 소프트웨어 프로그램 원하는 대동맥 및 좌 심 방 압력을 유지 하기 위해 펌프 속도의 실시간 및 자동 제어에 대 한 허용 하 고 다양 한 기능과 electrophysiological 매개 변수에 대 한 최소한의 필요를 평가합니다 감독/조작입니다.

서문

임상 관련성

이후 1967 년에서 첫 심장 이식 심장 이식의 대부분 측면 크게 진화, 냉장 (CS) 기증자 심장 보존¹표준 남아 있다. CS는 장기 안전 보존 간격 (4-6 시간)를 제한 하 고 기본 이식 부전^2,,34의 위험을 증가 하는 추 허 혈의 기간을 제공 합니다. CS의 정적 특성 함수 또는 치료 개입의 평가 기관 조달과 이식 사이의 시간에 가능 하지 않습니다. 이것은 확장된 기준 기증자 마음 (DCD), 순환 사후 기증을 포함 한 수요와 현재 기증자 수영장^5,6사이의 상당한 격차를 극복을 위한 장애물을 만드는 특정 제한 이다. 주소로 원래의 심장 관류 전이 제한을 제안 하고있다 보존 기증된 마음, 제공 하 여 찬 국 소 빈 혈 가능성을 최소화의 소설, 반 생리 적인 방법으로 산소, 영양분이 풍부한 perfusate 보존 시간 동안 마음에 ^{1 , 7 , 8}.

전 situ 심장 관류

격리 된 심장의 현장 검사 전 자주 사용된 방법 중 하나는 Langendorff 관류입니다. 에이 방법, 오스카 Langendorff 1895 년에, 관상 동맥에 그리고 빈에 마음으로 격리 된 심장의 관상 부 비 동 밖으로 혈액 흐름에 의해 도입 및 박동 상태^9,10. Transmedics 기관 케어 시스템 장치 (OCS)는 Langendorff 모드에서 임상 ESHP 비 열 등으로 표시 되었습니다 표준 기준 기증자 마음¹의 보존에 CS로 DCD 마음 ^{의 임상 이식 촉진 했다 그러나 11}., 있다 장기 생존 능력을 평가 하는 장치의 기능에 대 한 우려로 다양 한 기증자 마음 처음 transplantable 생각 OCS³에 재 관류 후 버려졌다. OCS는 Langendorff (비 작업) 모드에서 마음을 지원 하 고 따라서 심장^3,12의 펌핑 기능 평가 대 한 제한 된 용량을 소유한 다. 증거의 성장 시체가 나왔다 심장 기능의 평가 평가 및 선택 ESHP^{3 중 이식에 대 한 마음에 대 한 신뢰할 수 있는 도구가 될 수 있습니다 제안, 장기 생존 능력을 평가 하는 더 나은 방법을 제공 하는 기능 매개 변수 ,12,,1314}, 게다가, 전 situ 끼얹는다 돼지 마음에 우리의 연구 제안 작업 모드에서 ESHP 동안 심장의 향상 된 기능 보존을 제공 한다 관류 간격^15,16.

ESHP 기구 작업 모드에서 마음을 보존 수 있는 안전 하 고 정확 하 게 미리 유지 하기 위해 자동화, afterload 및 흐름 율의 수준을 보유 해야 합니다. 또한, 이러한 시스템 실시할 수 심장 기능의 포괄적인 평가 촉진 하기 위하여 유연성을 보유 해야 합니다. 여기에 사용 되는 ESHP 장치 1) 제공 하는 사용자 지정 소프트웨어를 장착 하 고 원하는 대동맥 (Ao)과 좌 심 방 (LA) 압력/유량을 유지 하 고 2) 제공 기능 매개 변수의 실시간 분석 및 압력 파형의 시각적 평가 감독에 대 한 최소한의 필요 합니다. 표준 액체 가득 압력 변환기, 압력 데이터는 취득 하 고 흐름 데이터 전송 시간 도플러 흐름 프로브 인수. 이 신호는 각각 다리와 아날로그 입력, 디지털화 됩니다. 마음은 부드러운 실리콘 막에 큰 혈관을 약간의 상승으로 가로로 배치 됩니다. Cannulation 첨부 파일 통합 제동 심 실 방출에 대 한 준수 챔버 막 통과. 이 작품의 목표는 전 situ 관류에 대 한 프로토콜 심장 이식 분야에 큰 포유동물 (요크 셔 돼지) 모델에서 작업 모드에서 normothermic, 반 생리 적인 조건 하에서 심장의 평가 연구원 제공.

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프로토콜

이 원고에 모든 절차는 동물 관심과 배려를 위한 가이드에 캐나다 위원회의 지침 및 실험 동물의 사용에 따라 수행 했다. 프로토콜의 앨버타의 대학 제도 동물 보호 위원회에 의해 승인 되었다. 이 프로토콜은 35-50 kg 사이 여성 청소년 요크 셔 돼지에 적용 되었다. ESHP 절차에 참여 하는 모든 개인은 적절 한 biosafety 훈련을 받았다 했다.

1. 미리 수술 준비

1. 기관 실 제대로 장치 장바구니에 놓고 장기 챔버 내부 실리콘 지원 막 설치 합니다. 아오, 폐 동맥 (PA) 및 라 연결점은 그림 1에서 볼 수 있습니다.
2. ESHP 튜브 ( 그림 2AB에표시) 네트워크 oxygenator 및 필터를 설치 합니다. oxygenator를 열교환기 물 선 및 청소 가스 튜브를 연결.
3. 장소는 흐름 관상 공동/PA 및 해당 튜브에 라 흐름 측정 프로브 합니다.
4. 회로에 대표 라인에 Ao와 라 압력 트랜스듀서를 연결 합니다.
5. 모든 배관 연결이 단단히 연결 되어 모든 stopcocks 및 luer 잠금 연결 되지 않은 사이트에 제대로 닫혔는지 확인 합니다.
6. 프라임 수정된 Krebs Henseleit 버퍼 (NaCl, 85;의 750 mL와 회로 KCl, 4.6; NaHCO₃, 25; KH₂포, 1.2; MgSO₄, 1.2; 포도 당, 11; 그리고 CaCl₂, 1.25 mmol/L) 8% 알 부 민을 포함 하. -공기 펌프 챔버 (그림 3) 나뭇잎 있도록 입구 위에 펌프 콘센트를 배치 하 여 Ao와 라 펌프 공기. 솔루션 일반적는 관류의 시작 전에 oxygenized 필요 하지 않습니다.
7. Ao와 라 펌프는 드 방영 후 회로 끝났다 소프트웨어를 시작 합니다.

2. ESHP 소프트웨어 초기화 및 조정

참고: 여기에서 사용 하는 ESHP 장치 달성 하 고 유지 하기 위해 펌프 속도의 제어 라와 아오 압력을 원하는 수 있도록 사용자 지정 소프트웨어 프로그램을 갖추고 있다. 소프트웨어는 또한 기능 매개 변수를 분석 하 고 압력 파형 (그림 4)에 대 한 시각적 평가 제공 합니다.

1. ESHP 프로그램을 시작 하려면 모니터에 프로그램 바로 가기를 클릭 합니다.
2. "설정" 페이지에서 "초기화"를 클릭 합니다. 초기화 메시지 보드 (그림 5)에 표시 됩니다.
3. 동일한 페이지에 "제로 라 흐름"과 "제로 PA 흐름" 클릭 흐름 센서 0. 메시지 보드에 표시 됩니다.
4. 실리콘 지원. 의 높이를 압력 변환기의 높이 조정 압력 트랜스듀서, 0는 Ao와 라 압력 변환기 (및 기타 트랜스듀서는 압력을 확인 하도록 설정) 분위기를 열고 "제로 모든 압력" 버튼을 클릭 합니다. 메시지 보드에 표시 됩니다.
5. "기본" 페이지에서 기관 상공에 Ao 정에서 나타나는 시점까지 점차적으로 Ao 펌프 속도 증가. 현재 시스템에서이 900-1000 분당 회전 (RPM)와 함께 이루어집니다.
6. 1.5 l 총 perfusate 볼륨을가지고 perfusate 솔루션에 혈액의 750 mL을 추가 (에 설명 된 대로 "수술, 혈액, 그리고 심장 조달 수확" 섹션) 라 정에 남아 있는 공기 그래서 라 펌프 PRM (800-900 RPM)가 증가 하 고 또는 실리콘 지원 막 아래 라 튜브입니다.
7. 제어 소프트웨어를 초기화 하 고 취소의 ESHP 기구 방송, 후 기증자 심장 조달 진행할 수 있습니다.

3. 준비와 마 취

1. 20 mg/kg의 마 취 제 및 피하 premedication 위한 아트로핀의 0.05 mg/kg를 관리 합니다.
2. 수술 스위트 돼지를 전송 고 테이블 normothermia를 유지 하기 위해 난방을 운영 테이블에 돼지를 놓습니다.
3. 산소 유량 마스크 유도 동물 무게와 마 취 시스템에 대 한 적정 닫힌 원 마 취 회로 대 한 산소 흐름 20-40 mL/kg을 해야 합니다.
4. 4-5%; isoflurane 설정 하나 또는 2 분 후이 3%를 줄일 수 있습니다.
5. 마 취의 깊이 평가 합니다. 돼지 경우 수술 비행기에는 없는 철수 반사 유해 자극에 대 한 응답입니다.
6. 마 취의 적절 한 깊이의 확인, 후 삽 관 법을 진행 합니다.
7. (선호) 혀에 펄스 속도도 프로브를 걸거나 귀. 펄스 프로브가 측정 산소 포화는 90% 이상 유지 한다.
8. 왼쪽 및 오른쪽 팔꿈치 영역에 머리의 면도 하 고 왼쪽 억압. 피부 오일을 비누와 물으로 세척 하 고 알콜로 씻어 완전히 건조. ECG 연락처를 놓습니다. 수술 사이트와 리드 와이어 간섭을 하지 마십시오. 올바른 위치에 리드를 연결 합니다.
9. 마 취를 유지 하려면 산소 흐름 (20-40 mL/kg) 및 흡입 가스 속도 (1-3%)를 조정 합니다. 심장 박동은 80-130 박동/분 호흡 속도 12-30 호흡/분 이어야 한다 이어야 한다.
10. 면도, 세척 하 고 aseptically 절 개 사이트를 준비.

4. 혈액 수집 조달 심장 및

1. 평가 마 취 수준 모든 최소 매 5 분 수술 평면 (아무 페달 반사 없음 깜박임 반사, 고통 스러운 자극에 무반응) 확인.
2. 메디아 sternotomy를 수행 합니다.
   1. 랜드마크로 서 jugulum와 칼을 식별 합니다.
   2. Electrocautery를 사용 하 여 피하 조직과 근 pectoralis 중요 한 근육의 섬유 사이 나누어 랜드마크 사이 중간 개발.
   3. Sternal 뼈 따라 중간에서로 표시 합니다. 전기 또는 공기 구동 보았다 sternal 뼈를 수행 합니다. 생성을 방지 하기 위해 기본 구조 (예: 심 낭 및 brachiocephalic 정 맥, 그리고 innominate 동맥)에 상해 본 점차적으로 진행.
   4. 철회는 흉 골 점차적으로, sternal 견인을 사용 하 여. 과도 한 긴장과 혈관 상해를 방지 하려면 배치 하지 마십시오 견인 기 너무 멀리 cranially.
   5. 무료로 사용 하 여 흉 골의 후부 표면에서 sternopericardial 인 대.
   6. Metzenbaum 시저와 심 낭을 열고 1-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 흉 골에 pericardial 가장자리를 수정 합니다.
3. 2-3 cm로 cranially 중간 절 개를 확장 하 고 바로 일반 경 동맥 및 내부 경 정 맥 노출.
4. 실크 넥타이 (2-0)와 혈관을 포위 망에서 인접 하 고 말 초 혈관의 제어를 얻을.
5. 각 선박에 두개골 감싸며 넥타이 넥타이.
6. 11 칼 날 각 선박의 앞쪽 1/3을 열고 각 선박에 5-6 F 덮개를 삽입 합니다. 넥타이 각각 확보 하 여 각 선박 주위 꼬리 감싸며 넥타이 선을 넣는다.
7. 압력 변환기에 연결 하는 각 칼 집 여 동맥 및 중앙 정 맥 압력을 모니터링 합니다.
8. 정 맥 1000 U/kg 덤플링을 제공 합니다.
9. 오른쪽 심 방 부속 기 주변 3-0 폴 리 프로필 렌 지갑-문자열 봉합을 놓고 올 무와 함께 그것을 확보.
10. 지갑-문자열 봉합 내부 11 블레이드를 사용 하 여 돌출부에 1 cm 절 개를 만듭니다. 2 단계 정 맥 캐 뉼 러를 삽입 (28/36 FR) 절 개는 IVC의 원심 끝 위치 안에. 정 맥 캐 뉼 러를 tieing 무 여는 정을 보안 합니다. 튜빙 클램프로는 정 맥의 콘센트를 제어 합니다.
11. 오른쪽 아 트리 움에 배치 2 단계 정 맥 정에서 750 mL 전 혈의 돼지에서 점차적으로 15 분의 기간 동안 압력가 마로 소독 한 유리 용기, 수집과 동시에 같은 isotonic 결정성 솔루션의 1 리터는 볼륨을 바꿉니다 Plasmalyte a.
12. Perfusate의 1.5 L의 최종 볼륨에 도달 (이 750 mL Krebs Henseleit 버퍼 포함 8% 알 부 민으로 이전 준비 되었습니다) 관류 회로에 혈액을 추가 합니다. perfusate Krebs Henseleit 포함 8% 알 부 민 솔루션 및 기증자 동물 ¹⁷에서 전체 혈액의 1:1 조합 이다.
13. 오름차순 Ao에 cardioplegia 바늘 (14-16 F)을 놓고 올 무와 그것을 보호 합니다.
14. Cardioplegia 가방 cardioplegia 정 맥을 연결 하 고 cardioplegia 500 mL 혈액 cardioplegia의 마지막 볼륨에 도달 (세인트 토마스 병원 솔루션)의 400 mL를 100 mL의 혈액을 추가.
15. Exsanguination 여 돼지를 안락사. (연구의 목적)에 따라 관류의 시작 후에 perfusate에 더 많은 혈액을 추가, 혈 그것에 10-30 U/mL 헤 파 린을 추가 하 고 짧은 기간에 대 한 유리 컨테이너 또는 4 ° C에서 비닐 봉투에 저장 하려는 경우 (시간
16. 크로스 클램프 오름차순 아오 아오 클램프와 Ao 루트 cardioplegic 솔루션 제공
17. Cardioplegic 솔루션의 제공 완료 후 크로스-클램프를 제거 하 고 수행 하는 cardiectomy.
    1. 그들의 대표 정에 Ao와 PA를 연결의 용이성, 부분적으로 오름차순 Ao Metzenbaum가 위를 사용 하 여 PA에서 해 부.
    2. 열 등 한 우수한 베 나 카바 각각에 대략 1 cm의 길이 떠나 transect
    3. 폐 정 맥 transecting 여 후부 mediastinum에서 마음을 구분 합니다.
    4. 아치 선박 Ao 내림차순의 세그먼트 함께 획득 되는 Ao의 모든 보장 심장 삭제하시오 PA 분기까지 유지 합니다.
18. 빈 심 혼의 무게. 전 situ 보존 간격 체중 증가의 금액은 기관 부 종에 대 한 통계로 사용할 수 있습니다.

5. ESHP 장치 및 관류의 개시에 심장의 위치

1. 초과 조직 Metzenbaum 시저와 라 주위를 정돈 하 고 일반적인 오리 피스를 만들려고 폐 정 맥 사이 잘라.
2. 장소 3-0 폴 리 프로필 렌 봉합 사를 사용 하 여 라 구멍 주위 지갑 문자열 봉합.
3. 봉합 하 고 가까운 3-0 폴 리 프로필 렌 봉합으로 열 등 한 베 나 정 맥. 열어 뛰어난 베 나 카바 유지 하려면 오른쪽 심 실 (RV) 압축 해제는 perfusate 예 열 하 고 조직된 리듬 달성 때까지 관류의 시작 부분에 둡니다.
4. 라 구멍에 라 정을 놓고 올 무 (그림 6)와 그것을 보호 합니다.
5. 부드럽게 짠 다 드 공기 마음 심을 "5.5에서. 그리고 5.7에 추가. 로 부드럽게 심장 압박으로 1600 rpm Ao 펌프 속도 증가. Ao 루트에서 나머지 공기 innominate 및 subclavian 지점을 통해 방출 될 것입니다.
6. 아오 정 실리콘 막에 포함 하는 Ao를 연결 합니다. 실크 넥타이 정 주위 Ao를 보안 합니다. 긴장 또는 비틀면 없이 적절 한 거짓말을 달성 하기 위해 Ao 트림.
7. Ao 펌프 속도 1600 RPM를 증가. Ao 루트에서 나머지 공기 innominate 및 subclavian 지점을 통해 방출 될 것입니다.
8. Ao 지우기 라인 innominate 동맥에 연결 합니다. 실크 넥타이와 연결을 보안 합니다.
9. 올 무 실크 넥타이 왼쪽된 하 동맥 구멍. 무와 클로저를 장악 하 고 스냅. 하 동맥의 구멍을 통해 중개자 칼 집 (5 층)을 놓습니다. Ao 밸브 기능을 방해 하지 않습니다 있도록 테 길이 방향이 제대로 조정 확인 하십시오.
10. Ao 압력 트랜스듀서 중개자 칼 집 쪽 포트에 연결 합니다.
11. 모니터에 Ao 압력 읽기. 30 mm Hg의 평균 압력에 도달 Ao 펌프 속도 조정 합니다. 이 시점에서 (시간 0)는 관류 비 작업 모드 (Langendorff 모드)에서 시작 됩니다 그리고 PA에 어두운 deoxygenated perfusate의 외관은 관상 동맥 흐름의 재건 립의 반사판. 필요한 경우는 관류의 기간에 따라 타이머를 설정 합니다.
12. 열 교환기에 설정 하 고 설정 온도 38 ° c perfusate 약 10 분에 37-38 ° C까지 따뜻한 것입니다. Normothermic 돼지 심장의 관류는 관류에 걸쳐 38 ° C에 온도 유지.
13. 관류의 첫 번째 시간에 대 한 비 작업 모드에는 관류를 유지 합니다. 0 mmHg에 라 압력을 유지 하기 위해 라 펌프 속도 조정 합니다.
14. Perfusate 온도 일단 > 34 ° C, 심장 리듬과 속도 평가 하 고 필요한 (5-20 줄)로 defibrillate. 마음은 완전히 부정맥을 시도 하기 전에 압축을 확인 합니다.
15. 혈액 가스 분석기를 사용 하 여 녹은 가스 상태를 확인 하십시오. PH를 유지 하기 위해 가스 혼합물을 조정: 7.35-7.45 동맥 부분 압력 이산화탄소 (P는_는CO₂): 35-45 mmHg, 동맥 부분 압력 산소 (P는_aO₂): 100-150 mmHg, 그리고 산소 포화 (이렇게₂) ≥95 %의.
16. 일단 마음은 normothermic와 안정 된 리듬에, 뛰어난 베 나 정 맥 선.
17. 오른쪽 심 방 벽을 100 박동/min에 AAI 모드에서 심장 속도 임시 맥 박 조정기 리드를 연결 합니다.
18. 심장의 표면 epicardial 심전도 전극 연결 합니다.
19. 관류 Langendorff 모드에서의 1 시간 후 작업 모드로 전환 됩니다. 이 위해 소프트웨어의 "원하는 무릎" 섹션에서 메인 페이지의 왼쪽에 욕망 라 압력 (일반적으로 6-8 mmHg)를 입력 하 고 피드백 루프를 시작 하려면 버튼을 클릭 합니다. 라 펌프 속도 자동으로 증가 하 고 감소 원하는 라 압력을 유지 하 고 활성화 된 작동 모드는 녹색 버튼으로 표시 됩니다.
20. 심장 작동을 시작, 관상 동맥 혈관 저항 낮은 확장기 압력의 결과로 떨어질 것 이다. 작업 모드에서 관류 동안 afterload로 40 mmHg의 Ao diastolic 압력을 유지 하기 위해 Ao 펌프 속도 조정 합니다.

6. ESHP 중 대사 지원

참고: Krebs Henseleit 버퍼 솔루션을 포함 한 장기 관류 솔루션은 일반적으로 주 에너지 기질으로 포도 당을 포함.

1. 관류 동안 일정 한 간격 (예: 혈액 가스 분석)과 포도 당 수준을 확인 합니다. 소비 속도 따라 사용 하 여 표준 주입 펌프 교체 포도 당 연속 동맥 주입 및 큰 알 약 복용량에 의해 6-8 mmol/l는 관류에 걸쳐 포도 당의 동맥 농도 유지 하기 위해.
2. 별도 주입 펌프를 사용 하 여 인슐린의 2 U/h 관류, 연구의 목적에 따라 인슐린 주입 속도 변경에 걸쳐 perfusate 제공 합니다.
3. 심장의 β-adrenoceptor 자극에 대 한 표준 주입 펌프를 사용 하 여 perfusate에 피 네 프 린의 0.08 µ g/분을 전달 하 고는 관류를 통해 계속. 또는, dobutamine의 4 µ g/분의 주입은 사용할 수 있습니다.

7. 항균 및 항 염증 성 에이전트

1. 관류의 시작에서 perfusate를 넓 스펙트럼 항생제 (예: piperacillin tazobactam의 3.375 그램)를 추가 합니다.
2. 필요한 경우, 연구의 목적에 따라 perfusate에 항 염증 성 에이전트 (예: methylprednisolone의 500 mg)를 추가 합니다.

8입니다. 기능 평가

참고: 소프트웨어를 자동으로 제어 하는 ESHP는 계산 하 고 10 초 마다 정상 hemodynamic 및 기능 인덱스를 기록.

1. 정상 상태 수축 기 및 diastolic 기능 평가
   1. 평가 및 중개자 칼 집 하 동맥 앞부분에서 배치를 통해 정상 상태 데이터의 기록을 위한 좌 심 실 (LV) 작업 모드에 있는 동안에 액체 채워진 피그 카 테 터를 놓습니다.
      1. 식 염 수와 피그 테 플러시 및 내부 가이드 와이어를 장소.
      2. 부드럽게 칼 집 정 하 동맥에 배치 이전에 카 테 터를 삽입 합니다. 최대한 빨리 Ao 밸브를 통과 guidewire를 천천히 제거 하 고 피그 테 LV 압력 라인에 연결.
      3. 모니터에 LV 압력 파를 따릅니다. 테는 라스베가스 안에 제대로 배치는 압력 파의 확장기 부분 0를 도달 한다 메모의이 단계 가능 하다 작업 모드에서 이후 아오 밸브 챔버를 입력 수 피그 카 테 터에 대 한 일반적으로 개방 해야 합니다. 피그 카 테 테 르는 LV에 LV 압력 변환기에 연결 된 일단 압력 변화 (dP/dT min과 dP/dT max)의 라스베가스 최대 및 최소 속도 자동으로 기록 됩니다.
   2. 심장 질량 (mL·min^-1·g^-1), 주어진된 상수 라 압력 (6-8 mmHg), 및 40 mm Hg, Ao diastolic 압력 그리고 100 beats·min^-1의 심장 박동에서 라 선 측정된 flow 색인 생성 하 여 심근 성능을 결정 합니다. 라 압력 없는 Ao 부족 가정 심장 출력을 같습니다. Ao 압력 파형 아무 Ao 부족 확인을 검사 합니다.
2. 미리 recruitable 선 작업 (PRSW)의 평가
   참고: PRSW 끝 확장기 볼륨과 LV 선 작업 (LVSW) 간의 선형 관계 이며 심 실 기능, 미리, afterload, 및 심 실^18,19의 크기의 평가 대 한 인덱스를 나타냅니다. PRSW¹³아래에 설명된대로 비 침략 적 패션에서이 시스템으로 측정할 수 있습니다.
   1. 이후 테 PRSW 분석 결과의 정확도 부정적인 영향을 미칠 것입니다 그 중 부정맥을 유발 수 있습니다 라스베가스에서 피그 카 테 터를 제거 합니다.
   2. 메인 페이지의 "캡처 PVL" 섹션에서 분석 (일반적으로 100-200 RPM) 동안 라 펌프 속도에 드롭 원하는 수익률을 조정 하 고 원하는 시간 동안 분석 열린다 (일반적으로 10-12 s) (그림 4).
   3. 위에서 언급 한 조정을 수행한 후 "기록 PVL"를 클릭 합니다. 소프트웨어 작동 모드를 자동으로 종료 되며 점차적으로 LVSW와 라 압력을 동시에 녹음 하면서 라 펌프 RPM를 감소. 데이터 수집의 결론, 소프트웨어 PRSW를 새로 구입한 데이터 집합에 선형 회귀를 수행 합니다. ESHP 소프트웨어는 분석 완료 메시지는 분석의 상관 계수를 보여주는 메인 페이지에 표시 됩니다. 계수 (r 값) 바람직한 경우 "OK"를 누릅니다 (일반적으로 > 0.95). PRSW 분석 결과 기록 됩니다.
   4. 관류 작업 모드로 돌아가려면 분석을 수행한 후 "시작 작업 모드; 언론" 클릭 소프트웨어 Langendorff (비 작업) 모드에서 계속 그렇지 않으면. 회색 버튼 작업 모드에 반환을 나타내는 녹색으로 바뀝니다. PRSW 분석은 필요에 따라 반복, 각 새로운 시도 하기 전에 확인 라 압력/유량 값이 이전 상태 값을 반환 합니다.

9. 신진 대사 평가 전 라의 마음을 끼얹는다

1. 심장의 대사 상태를 평가 하 고 모든 1-2 h Ao (동맥), 그리고 PA (정 맥) 라인에서 수집 된 ESHP, perfusate 샘플의 혈액 가스 분석에서 얻은 정보를 사용 하는 동안 perfusate.
2. 혈액 가스 분석 (모든 1-2 h) 가스와는 perfusate의 이온 상태 모니터링을 수행 합니다. 가스 구성 (O₂ 와 CO₂)를 조정 하 고 7.35-7.45, paO₂ 100-150 mmHg, 및 35-45 mmHg의 파 코₂ 의 pH를 유지 하기 위해 속도 청소. 조정 하 고 (예: 필요한 경우 염화 칼슘의 추가 의해) 관류 동안 칼륨과 생리 적인 범위에서 칼슘의 perfusate 이온 농도 유지.
3. 혈액 가스 분석 하 고 관상 동맥 혈 류 량에서 얻은 정보를 사용 하 여 변화 매개 변수를 계산 하. 예를 들어 심근 산소 소비 (MVO₂), 계산 하 고 (나) 기계적 효율을 다음과 같이 LV:
   1. MVO₂ mL O₂ · 분^-1 · 100 g^-1산소 내용 (카오₂ -CvO₂) 동맥 정 맥 상의 차이 관상 동맥 혈 류 량 (CBF)를 곱하여 결정 합니다.
      MVO₂ = [카오₂ -CvO₂ (mL O₂ · 100 mL^-1)] × CBF (mL. 민^-1 . 100 g 심장 질량), 어디에;
      동맥 산소 함유량 (카오₂) = [1.34 (mL O₂ . g Hb^-1) × Hb 농도 (g · 100 mL^-1) × 산소 포화 (%)] + [0.00289 (mL O₂ · mm Hg^-1 · 100 mL^-1) × 파 오₂ (mm Hg)]
      정 맥 산소 함유량 (CvO₂₎ = [1.34 (mL O₂ · g Hb^-1) × Hb 농도 (g · 100 mL^-1) × 산소 포화 (%)] + [0.00289 (mL O₂ · mm Hg^-1 · 100 mL^-1) × PvO₂ (mm Hg)]
   2. (나)는 LV 기계적 효율을 다음과 같이 계산.
      나 = LVSW (J. 이길^-1) / MVO₂ (J.^-1를 이길) 어디
      작업 뇌졸중 = {평균 동맥 압력 (mmHg)-라 압력 (mmHg)} × {라 흐름 (mL. 분^-1) / 심장 속도 (뛰는. 분^-1)} × 0.0001334 (J. mL^-1 . mmHg^-1), 그리고
      MVO₂ (J. 이길^-1) = {MVO₂ (mL. 분^-1) / 심장 속도 (친다. 분^-1)} × 20 (줄. mL^-1)

10. 관류의 끝에 ESHP 장치에서 마음을 제거합니다.

1. 작업 모드를 종료 합니다. 0 라 펌프 RPM을가지고.
2. Ao 펌프 RPM 0으로 줄입니다.
3. 피그와 덮개를 제거 합니다.
4. 신속 하 게 마음에 모든 첨부 파일을 제거 합니다.
5. 심근 부 종 형성의 정도 결정 하기 위해 빈 심 혼의 무게.
6. 왼쪽 및 오른쪽 심에서 적절 한 크기의 조직 샘플을 받아 신속 하 게 최적의 절삭 온도 (10 월) 젤에, 포 르 말린 및 스냅 액체 질소에 그들을 동결. 향후 조사에 대 한 샘플을 저장 (10 월-80 ° C 냉동 고, 실내 온도에 제대로 밀봉된 한 콘테이너에서 포 르 말린에 저장 된 샘플에서 냉동된 샘플 스냅인).
7. 프로그램; 모든 기록 된 데이터는 저장 됩니다.
8. 나머지 조직, 혈액, 생리 활성 물질 및 기관 프로토콜에 따라 사용된 ESHP 장치 구성 요소를 삭제 합니다.
9. ESHP 카트 sanitizing 하드 표면 청소기를 사용 하 여 (예: 70% 에탄올)를 철저 하 게 청소.

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결과

(비 작업 모드)에서 관류의 시작에서 심장 normothermia 시스템 및 perfusate의 온도 도달할 때 부 비 동 리듬이 정상적으로 재개 됩니다. 입력할 때 작업 모드, 원하는 값을 접근 하는 라 압력, 방출 Ao 압력 추적 관찰 해야 하 고 라 흐름 (심장 출력의 반영) 점차적으로 증가 한다. 요크 셔 돼지 모델 (35-50 kg) 180-220 그램의 시작 심장 무게에서 초기 라 흐름 ~ 2000 mL/min, 그리고이 일반?...

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토론

성공적인 관류; 연구의 목적에 따라 정의 됩니다. 그러나,이 관류 동안 심장 기능에 시간 및 데이터의 완전 한 컬렉션의 원하는 금액에 대 한 중단된 ESHP를 포함 해야 합니다. 이 목적을 위해 프로토콜의 몇 가지 중요 한 단계를 따라 해야 합니다.

마음은 높은 산소와 에너지 요구, 기관 그리고 준수 해야 하는 중요 한 원리는 전에 cannulation 및 관류 허 혈 성 시간을 최소화. 조달,...

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자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Debakey-Metzenbaum dissecting scissors	Pilling	342202
MAYO dissecting scissors	Pilling	460420
THUMB forceps	Pilling	465165
Debakey straight vascular tissue forceps	Pilling	351808
CUSHING Gutschdressing forceps	Pilling	466200
JOHNSON needle holder	Pilling	510312
DERF needle holder	Pilling	443120
Sternal saw	Stryker	6207
Sternal retractor	Pilling	341162
Vorse tubing clamp	Pilling	351377
MORRIS ascending aorta clamp	Pilling	353617
Surgical snare (tourniquet) set	Medtronic	CVR79013
2-0 SILK black 12" x 18" strands	ETHICON	A185H
3-0 PROLENE blue 18" PS-2 cutting	ETHICON	8687H
Biomedicus pump drive (modified)	Medtronic	540	Modified to allow remote electronic control of pump speed
Biomedicus pump	Maquet	BPX-80
Membrane oxigenator D 905	SORIN GROUP	50513
Tubing flow module	Transonic	Ts410
PXL clamp-on flow sensor	Transonic	ME9PXL-BL37SF
TruWave pressure transducer	Edwards	VSYPX272
Intercept tubing 3/8" x 3/32" xX 6'	Medtronic	3506
Intercept tubing 1/4" x 1/16" x 8'	Medtronic	3108
Heated/Refrigerated Bath Circulator	Grant	TX-150
ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer	Radiometer	989-963
DLP cardioplegia cannula (aortic root cannula)	Medtronics	20613994495406
5F Ventriculr straight pigtail cathter	CORDIS	534550S
5F AVANTI+ Sheath Introducer	CORDIS	504605A
Emerald Amplatz Guidewire	CORDIS	502571A
Dual chamber pace maker	Medtronic	5388
Defibrilltor	CodeMaster	M1722B
Infusion pump	Baxter	AS50
Surgical electrocautery device	Kls Martin	ME411
Gas mixer	SECHRIST	3500 CP-G
Medical oxygen tank	praxair	2014408
Cabon dioxide tank	praxair	5823115
Bovine serum albumin	MP biomedicals	218057791