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Method Article
이 연구는 초보자가 배우고 수행할 수 있는 쥐의 재현 가능한 이종 복부 심장 이식 기술을 보여줍니다. 또한, 쥐의 새로운 대동맥 역류 모델은 이종 복부 심장 이식을 수행하고 수확 후 가이드와이어를 사용하여 기증자의 대동맥 판막을 손상시킴으로써 생성됩니다.
지난 50년 동안 많은 연구자들이 생쥐와 쥐의 이종 복부 심장 이식을 보고했으며 수술 기술에 약간의 차이가 있습니다. 심근 보호를 강화하기 위해 이식 절차를 수정하면 기증자의 심장 기능을 유지하면서 허혈 시간을 연장할 수 있습니다. 이 기술의 요점은 다음과 같습니다 : 기증자의 심장을 내리기 위해 수확하기 전에 기증자의 복부 대동맥을 절개합니다. 기증자의 관상 동맥을 차가운 심정지 용액으로 관류하는 것; 문합 절차 중 기증자의 심장을 국소적으로 냉각합니다. 결과적으로, 이 절차는 허용 가능한 허혈 시간을 연장하기 때문에 초보자도 쉽게 수행할 수 있고 높은 성공률을 달성할 수 있습니다.
또한, 우경동맥에서 카테터를 삽입하고 지속적인 심초음파 유도하에 천연 대동맥판막에 구멍을 뚫어 만든 기존 기술과는 다른 기술을 사용하여 새로운 대동맥 역류(AR) 모델을 확립했습니다. 새로운 AR 모델을 사용하여 이종 복부 심장 이식을 수행했습니다. 프로토콜에서 기증자의 심장을 적출한 후 뻣뻣한 가이드와이어를 기증자의 상완 동맥에 삽입하고 대동맥 뿌리를 향해 전진합니다. 저항이 느껴진 후에도 가이드와이어를 더 밀어 대동맥 판막에 구멍을 뚫어 AR을 유도합니다. 이 방법을 사용하여 대동맥 판막을 손상시키는 것은 기존의 AR 모델에 설명 된 절차보다 쉽습니다. 또한 이 새로운 AR 모델은 수혜자의 순환에 기여하지 않습니다. 따라서 이 방법은 종래의 시술보다 더 심각한 AR 모델을 생성할 것으로 예상된다.
쥐의 이종 복부 심장 이식은 1964년 Abbott et al.1에 의해 처음 보고되었으며 급성 및 만성 동종이식 거부반응, 심장 동종이식 혈관병증, 허혈-재관류 손상 및 심장 리모델링을 연구하는 데 사용되었습니다 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11 . 지난 50 년 동안 절차에 일부 수정 사항이 추가되었습니다. 현재 절차의 기본 사항은 다음과 같습니다. 기증자의 상행 대동맥과 폐동맥(PA)은 각각 수혜자의 복부 대동맥과 하대정맥에 끝에서 나란히 문합됩니다. 기증자의 좌심방과 심실은 강내 흐름을받지 못하지만 혈액은 기증자의 관상 동맥 시스템으로 흐릅니다. 따라서 디클램핑 후 기증자의 심장이 다시 뛰기 시작합니다.
수백 또는 수천 건의 수술 경험이 있는 일부 전문가들은 이종 복부 심장 이식에 대한 짧은 허혈 시간으로 높은 성공률을 보고했습니다 2,3,4,5; 그러나 초보자가 처음부터 짧은 허혈 시간을 달성하는 것은 어렵습니다. 충분한 심장 보호는 기증자의 심장을 좋게 수축시키는 데 중요한 요소입니다. 심근 보호가 불충분하면 기증자의 심장이 뻣뻣해질 수 있습니다. 따라서 우리는 기증자의 심장 보호를 강화하기 위해 이식 절차를 수정했습니다. 이 연구의 목적 중 하나는 허용 가능한 허혈 시간을 연장하기 때문에 초보자도 쉽게 수행할 수 있는 재현 가능한 이종 복부 심장 이식 절차를 입증하는 것입니다.
또한, 일부 연구자들은 쥐의 대동맥 역류(AR) 모델을 보고했는데, 이는 좌심실(LV) 리모델링에 대한 약제의 효과를 조사하는 데 사용되었습니다12,13,14,15. 종래의 절차는 다음을 포함한다: (1) 마취 후 우측 경동맥을 노출시키기 위해 우측 측면 경부 절개가 이루어지고; (2) 카테터가 이 혈관에서 캐뉼러되고 대동맥 뿌리를 향해 전진합니다. (3) AR은 지속적인 심초음파 유도 하에 천연 대동맥 판막에 구멍을 뚫음으로써 유도됩니다.
그러나 심초음파 탐침을 잡고 대동맥 판막을 뚫고 상행 대동맥, 대동맥 판막 및 심초음파로 카테터를 잘 보는 것은 어렵습니다. 또한 급성 AR에 따른 심부전은 또 다른 합병증입니다. 따라서 이러한 문제를 해결하기 위해 쉽게 만들 수 있고 수혜자의 순환에 기여하지 않는 새로운 AR 모델이 이 작업에 확립되었습니다. 이 연구의 또 다른 목적은 이종 복부 심장 이식을 사용하고 수확 후 가이드와이어를 사용하여 기증자의 대동맥 판막을 손상시켜 AR 모델을 만드는 것입니다.
모든 동물 시술은 일본 정부 환경성의 "동물 복지 및 관리에 관한 법률 개요"와 "실험 동물의 통증 관리 및 유지 및 감소에 관한 기준"과 일본 과학 위원회의 "동물 실험의 적절한 실시 지침"에 따라 수행되었습니다16. 17,18. 동물 프로토콜은 도쿄 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(M-P19-065)에서 검토하고 승인했습니다.
1. 쥐의 이종 복부 심장 이식
참고: 이종 복부 심장 이식은 생후 7-9주령의 수컷 Jcl:Wistar 쥐에서 수행되었습니다. 6.7x 내지 45x 배율의 현미경을 사용하여 절차를 수행했습니다. 수술 기구는 멸균을 위해 고압증기멸균되었습니다.
2. 쥐의 이종 복부 심장 이식을 이용한 새로운 AR 모델
참고: 이종 복부 심장 이식을 사용하는 새로운 AR 모델은 7-9주령의 수컷 Jcl:Wistar 쥐를 사용하여 생성되었습니다. 6.7x 내지 45x 배율의 현미경을 사용하여 절차를 수행했습니다. 수술 기구는 멸균을 위해 고압증기멸균되었습니다.
일반 모델과 관련하여 디클램핑 후 우수한 LV 수축이 성공적으로 확립되었습니다. 이식된 심장의 허혈 시간과 수용자의 마취 시간은 각각 약 60분 및 130분이었다(표 1).
새로운 AR 모델에서 디클램핑 후에도 우수한 LV 수축이 얻어졌습니다. AR 모델에서 이식된 심장의 허혈 시간과 수혜자의 마취 시간은 정상 모델보다 약 5분 10분 더 길었다(표 2). AR 모델?...
이식 중에 기증자의 심장이 뻣뻣해지는 것을 방지하기 위한 주요 단계가 발견되었습니다. 첫째, 기증자의 심장을 내리기 위해 수확하기 전에 기증자의 복부 대동맥을 절개하는 것이 중요합니다 4,7. 기증자의 수술이 기관 내 삽관없이 수행되면 개흉술 후 호흡이 중단되어 기증자의 폐 순환을 방해합니다. 결과적으로 기증자의 심장에 과부하가 걸려 클?...
저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.
영어 편집을 해주신 Editage (www.editage.com)에게 감사드립니다.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Antisedan (atipamezole) | Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. | ||
Domitor (medetomidine) | Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. | ||
Dormicum (midazolam) | Maruishi Pharmaceutical Co., Ltd. | ||
heparin | AY Pharmaceuticals Co.,Ltd. | ||
Jcl:Wistar rats | CLEA Japan, Inc. | ||
microscope | Orinpas Co., Ltd. | SZ61 | |
modified Krebs-Henseleit cardioplegic solution | Merck KGaA | ||
sevoflurane | FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation | ||
SURGICEL FIBRILLAR | Johnson & Johnson K.K. | ||
Vetorphale (butorphanol) | Meiji Animal Health Co., Ltd. |
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