Microinjection을 사용 Aphids에 바이러스성 전송 생리 장벽을 테스트

요약

Aphids는 식물 바이러스의 효과적인 송신기입니다. 바이러스의 진딧물 microinjection, 우리가 오늘이 표시됩니다 절차는, 연구자, 창자를 거치지 않고 직접 진딧물의 hemocoel에 circulative 방식으로 바이러스 전송을위한 2 개의 주요 장벽 중 하나를 바이러스를 주입 수 있도록하는 기술입니다. 동일한 기술은 또한 RNAi을 위해 dsRNA를 주입하는 데 사용됩니다.

초록

가족 Luteoviridae에서 감자 loafroll 바이러스 (PLRV)는 solanaceous 식물을 감염. 이것은 주로, 더 그린 복숭아 진딧물, aphids로 전송됩니다. 감염되지 않은 진딧물이 감염된 식물에 피드를하면 그것은 공장 체관부을 통해 바이러스를 계약. 일단 섭취, 바이러스가 hemolymph (곤충 혈액)에 곤충 창자에서 통과해야 다음 새 공장으로 전송하기 위해 침샘을 통과해야합니다. 공장 같으 니라구 때 진딧물은 다른 바이러스를 소요될 수 있습니다, 그러나 작은 파편만이 전송을 위해 두 가지 장벽보다 식물을 감염하는, 창자 및 침샘에 통과합니다. 연구실에서는, 우리는 PLRV 전송을 공부 physalis 발전소를 사용합니다. 이 호스트에서 증상이 stunting 및 interveinal 위황병 (녹색 남은 정맥과 정맥 사이에 나뭇잎의 yellowing)이 특징입니다. 우리가 존재하는 비디오 벡터 PLVR 바이러스와 창자 바이러스는 전송을 방해하고 있는지 테스트를하지 곤충에 진딧물 microinjection을 수행하는 방법을 보여줍니다. 우리가 존재하는 비디오 벡터 PLVR 바이러스와 창자 또는 침샘에 바이러스는 전송을 방해하고 있는지 테스트를하지 곤충에 진딧물 microinjection을 수행하는 방법을 보여줍니다.

프로토콜

1. 진딧물은 벡터 바이러스를 수있다면 테스트하려면, 우리는 2 일간에 감염된 조직에 aphids 먹이.
2. 그렇다면, 우리는 5 일 동안 건강한 공장에서 공급 수 있습니다. 공장은 다음 fumigated는 3 주 후에 우리는 증상을 찾고 시작합니다.
3. 우리는 벡터 바이러스 수 없습니다, 우리는 2 장벽 중 어떤 microinjection 절차를 사용하여 바이러스를 막는 평가할 수있는 진딧물을 찾을 때.
4. 바이러스는이를 굿 전송 장벽을 우회, hemocoel 직접 주입합니다.

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