Preparing Sapphire Discs for Cell Culture

3 밀리미터 x 0.16 밀리미터 사파이어 디스크를 1 밀리리터 에탄올이 들어있는 2 밀리리터 원심 분리기 튜브로 옮기고 초음파 세척기에서 10 분 동안 초음파 처리합니다. 표면에 눈에 띄는 침전물이 없을 때까지 각 사파이어 디스크를 알코올 램프 불꽃에 태우십시오. 내용제성 펜을 사용하여 각 사파이어 디스크의 한 면에 숫자를 표시합니다.

라벨이 붙은 사파이어 디스크를 라벨이 붙은 면이 위를 향하도록 하여 35mm 배양 접시의 바닥에 놓습니다. 세포 배양 접시를 자외선 하에서 사파이어 디스크로 30 분 동안 소독합니다. 핀셋으로 사파이어 디스크를 뒤집어 라벨이 붙은 면이 아래를 향하도록 하고 자외선 아래에서 추가로 30분 동안 살균합니다.

MTn 태그를 발현하는 안정적인 HeLa 세포주를 준비된 사파이어 디스크에 시딩하고 세포 인큐베이터에서 80-90% 밀도로 성장시킵니다.