Pharmacological Analysis of Dual-Colored F1 Transgenic Arabidopsis thaliana

이중 색상의 F1 Arabidopsis thaliana의 약리학 적 분석을 시작하려면 7 일 된 형질 전환 묘목의 자엽을 해부하고 제거하십시오. 500 밀리리터의 30 마이크로 몰 Brefeldin A 또는 BFA 용액을 1.5 밀리리터 마이크로 원심 분리기 튜브에 넣습니다. 해부 된 묘목을 담그십시오.

10밀리리터 주사기를 마이크로 원심분리기 튜브에 단단히 부착하고 1분 동안 진공을 적용합니다. 이미징 전에 30분 동안 용액에서 샘플을 배양하기 전에 주사기를 제거합니다. 다음으로, 해부 된 7 일 된 묘목을 25 밀리몰 wortmannin에 담그십시오.

침지된 샘플을 30분 동안 인큐베이션하기 전에 1분 동안 진공을 적용합니다. 형질전환 식물에서 ERL-1 밀매 경로를 조사한 결과, 브레펠딘 A 용액에 30분 동안 노출된 결과 BFA 시체로 알려진 큰 구획에서 ERL-1-YFP 검출이 나타났습니다. Brefeldin A는 ERL-1의 재활용 또는 엔도사이토시스를 시사하는 ERL-1 트래피킹을 차단할 수 있음을 나타냅니다.

형질전환체를 30분 동안 워트만닌으로 처리했을 때, WM 체라고 불리는 고리 모양의 구조가 ERL-1-YFP에 의해 강조되었습니다. ERL-1-YFP가 다소포체로 운반된 것으로 나타났으며, 이는 ERL-1이 분해를 위해 액포로 가는 경로를 따랐음을 나타냅니다.