시작하려면 약 40마리의 Lucilia sericata 번데기를 1.5일 동안 짝짓기한 신흥 성인 수컷 및 암컷 Nasonia 말벌에 기생합니다. 기생 후 12-24 시간 이내에 멸균 해부 바늘을 사용하여 번데기 껍질의 한쪽 끝을 조심스럽게 엽니 다. 껍질의 다른 쪽 끝을 잡고 말벌 배아를 찾습니다.
그런 다음 배아를 PBS로 적신 멸균 세포 여과기로 옮깁니다. 일단 20 내지 30 배아가 이식되면, 10%의 차아염소산나트륨 용액의 1, 000 마이크로리터로 그들을 세척한 다음 멸균된 PBS와 70% 에탄올로 세척한다. 마지막으로 멸균 PBS로 세 번 세척합니다.
다음에, PBS로 미리 습윤된 폴리프로필렌 메쉬 시트를 24웰 플레이트에 놓는다. 멸균 된 작은 브러시를 사용하여 말벌 배아를 세포 여과기에서 폴리 프로필렌 메쉬 시트로 부드럽게 옮깁니다. 말벌 사육을 위해 준비된 NRM 50 마이크로 리터를 시트로 각 우물에 첨가하십시오.
그런 다음 각 우물 사이에 1 밀리리터의 멸균 수를 추가하여 성장을위한 습한 환경을 유지하십시오. 다음날, 알코올 소독 핀셋을 사용하여 유충을 함유 한 폴리 프로필렌 메쉬를 한 우물에서 다른 우물로 옮기고 50 마이크로 리터의 평형 NRM을 첨가하십시오. 9-11 일간의 수유 후 유충의 80 % 이상이 흰색 또는 노란색 번데기로 발전해야합니다.
그런 다음 메쉬를 깨끗한 우물 판으로 옮깁니다. 본 연구에서는 유충에서 번데기까지 무균 말벌의 생존율이 NRM 버전 3으로 무균 말벌을 사육하는 것에 비해 크게 향상되었습니다. 또한, 무균 말벌과 전통적으로 사육된 말벌 사이의 생성 기간에는 차이가 없었습니다.
