Protocol for Measuring Mitophagy in Hep-3B Cancer Cells 17

시작하려면 70-80 %의 융합 된 Hep-3B 세포를 섭취하십시오. 각각의 웰로부터 250 마이크로리터의 배지를 제거하고, 적절한 처리 또는 비히클과 함께 50 마이크로리터의 배지를 첨가한다. 염색 시약이 들어 있는 각 웰에 배지 50마이크로리터를 추가하고 염료와 함께 세포를 배양합니다.

배지를 제거하고 세포를 예열된 PBS로 세척한 후, 실온에서 15분 동안 200 마이크로리터의 고정 용액으로 세포를 고정시켰다. 그런 다음 고정액을 디캔팅하고 200마이크로리터의 PBS로 간단히 세척합니다. 마지막으로 200마이크로리터의 PBS를 추가합니다.

세포를 섭씨 4도에서 빛으로부터 덮고 보호한 상태로 유지하고 24시간 이내에 이미지를 촬영하십시오.