Sample Digestion and Tissue Expansion of Polymerized Tissue

시작하려면 중합 된 보관 된 신선한 조직 또는 파라 포름 알데히드 고정 마우스 뇌 조직으로 슬라이드를 가져 가십시오. 보안경을 착용하고 면도날을 사용하여 겔화 챔버의 두 개의 유리 슬라이드를 분리합니다. 부피를 최소화하기 위해 조직 주위의 블랭크 젤을 다듬고 균질화 후 젤의 방향을 추적하기 위해 비대칭으로 절단해야 합니다.

면도날로 슬라이드에서 젤이 함유된 티슈를 부드럽게 들어 올립니다. 2밀리리터 원심분리기 튜브로 옮깁니다. 섭씨 80도로 예열된 균질화 버퍼로 튜브를 상단까지 채웁니다.

그런 다음 섭씨 80도에서 8-60시간 동안 진탕하면서 샘플을 배양합니다. 원심분리기 튜브의 내용물을 6웰 플라스틱 세포 배양 플레이트의 단일 웰에 붓고 이송 피펫으로 변성 완충액을 제거합니다. 하이드로겔에서 남은 SDS를 완전히 제거하려면 1% 비이온성 계면활성제 용액으로 샘플을 세척합니다.

마지막으로 샘플을 섭씨 4도에서 PBS와 0.02% 아지드화나트륨에 보관합니다.